细胞色素c的提取方法

实验一、细胞色素C的制备和测定

摘要：细胞色素C为含铁卟啉的结合蛋白质，包括多种能够传递电子的含铁蛋

白质。广泛存在于各种动植物组织和微生物中。它是呼吸链中极重要的电子传递体。细胞色素C是一种细胞呼吸激活剂。在临床上可以纠正由于细胞呼吸障碍引起的一系列缺氧症状，使其物质代谢、细胞呼吸恢复正常，病情得到缓解或痊愈。在自然界中，细胞色素C存在于一切生物细胞里，其含量与组织的活动强度成正比。本实验以新鲜牛心为材料提取、制备和纯化细胞色素C，得到其粗品溶液，并进行含量测定。

关键词：细胞色素C 提取 制备 纯化 含量测定 1、原理：

细胞色素C包括多种能够传递电子的含铁蛋白质总称。广泛存在于各种动植物组织和微生物中。它是呼吸链中极重要的电子传递体，细胞色素C（cytochrome c，CytC）只是细胞色素的一种。它在呼吸链上位于细胞色素还原酶和细胞色素氧化酶之间。线粒体中的细胞色素绝大部分与内膜紧密结合，仅有细胞色素C结合轻松，较易被分离纯化。

细胞色素C为含铁卟啉的结合蛋白质，每个细胞色素C分子含有一个血红素和一条多肽链。分子质量约为13000，蛋白质部分由104个左右的氨基酸残基组成，其中赖氨酸含量较高，等电点10.2-10.8

叶绿体色素的提取、分离、定量及理化性质的鉴定

【实验目的】

1.掌握提取和分离叶绿体色素的方法； 2.掌握测定叶绿体色素含量的方法；

3.熟悉叶绿体色素的理化性质及吸光特性；

4.了解植物叶绿体色素组成及其与生境的相关性。 【实验原理】

1.叶绿体色素是植物进行光合作用的重要物质，叶绿体色素包含绿色素（包括叶绿素a和叶绿素b）和黄色素（包括胡萝卜素和叶黄素）两大类，这两类色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇或丙酮等有机溶剂提取。提取液可用色层分析的原理加以分离。因吸附剂对不同物质的吸附力不同，当用适当的溶剂推动时，混合物中各成分在两相（流动相和固定相）间具有不同的分配系数，所以它们的移动速度不同，经过一定时间层析后，便将混合色素分离。

2.叶绿素是一种二羧酸——叶绿酸与甲醇和叶绿醇形成的复杂酯，故可与碱起皂化反应而生成醇（甲醇和叶绿醇）和叶绿酸的盐，产生的盐能溶于水中，可用此法将叶绿素与类胡萝卜素分开

图一：叶绿素的结构

3.叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性，叶绿素吸收光量子而转变成激发态，激发态的叶绿素分子很不稳定，当它变回到基态时可发射出红光量子，因而产生荧光。

不同方法提取板栗壳棕色素的研究微波 提纯 分离 天然产物研究

基研础究

食品研究与开发

第1第期 20 7 0年7 3月 1 卷1== 3 I

不同方法提取板栗壳棕色素的研究梁建兰，刘秀凤。 -侯亚涛高宏宝常学东 一，, - (闹北科技师范学院食品工程系， 1河北昌黎 0 6 0; . 6 6 0 2河北省板栗工程技术研究中心，河北秦皇岛 0 60 ) 60 4摘要：以板栗壳为原料，对其棕色素的不同提取工艺和提取效果进行比较。过正交试验得到微波提取法最佳提取通

条件为：提取剂为 4%乙醇，取时间 9,波功率 6 0W,液比 1 (: )提取 6次，取率为 91,声波提 0提 0S微 4料：g 8 mL,提 .%超

取法最佳提取条件为：温度 6 0℃,提取剂为 5 0%的乙醇，料液比 18 gm,:(: L)时间 9 i, 0m n超声波功率 8提 Ow,取 8次，提取率为 8 . 6%。结果表明：微波提取法比超声波提取法的提取率高，作用时间短，节约成本，是一种短时、高效的提取方法。

关键词：栗壳；色素；板棕微波提取；超声波提取

St dyo t a t n fBr wn Pi m e si e t ut elb fe e eho s

不同方法提取板栗壳棕色素的研究微波 提纯 分离 天然产物研究

基研础究

食品研究与开发

第1第期 20 7 0年7 3月 1 卷1== 3 I

不同方法提取板栗壳棕色素的研究梁建兰，刘秀凤。 -侯亚涛高宏宝常学东 一，, - (闹北科技师范学院食品工程系， 1河北昌黎 0 6 0; . 6 6 0 2河北省板栗工程技术研究中心，河北秦皇岛 0 60 ) 60 4摘要：以板栗壳为原料，对其棕色素的不同提取工艺和提取效果进行比较。过正交试验得到微波提取法最佳提取通

条件为：提取剂为 4%乙醇，取时间 9,波功率 6 0W,液比 1 (: )提取 6次，取率为 91,声波提 0提 0S微 4料：g 8 mL,提 .%超

取法最佳提取条件为：温度 6 0℃,提取剂为 5 0%的乙醇，料液比 18 gm,:(: L)时间 9 i, 0m n超声波功率 8提 Ow,取 8次，提取率为 8 . 6%。结果表明：微波提取法比超声波提取法的提取率高，作用时间短，节约成本，是一种短时、高效的提取方法。

关键词：栗壳；色素；板棕微波提取；超声波提取

St dyo t a t n fBr wn Pi m e si e t ut elb fe e eho s

《风味化学与食品添加剂》

课程论文

论文题目食用天然色素的提取方法与发展趋势 学 院 食品科学与工程 专 业 食品科学与工程 毕业届别 2010级 姓 名 XXX 指导教师 梁 琪 教授 日 期 2013.6.19

食品科学与工程学院

食用天然色素的提取方法与发展趋势

XXX

（甘肃农业大学食品科学与工程学院，甘肃兰州，730070）

摘要：食用天然色素是指从植物、动物或微生物中提取的对食品具有着色能力的物质的总称。随着世界各国相继制订法规、淘汰大部分有毒的化学合成色素, 那些不仅有染色功能, 而且还有营养和保健功效, 并能赋予食品许多新功能的天然色素将面临广阔的市场前景。文章详细地介绍了食用天然色素及其提取技术和发展趋势。

关键词：食用天然色素 提取方法 发展趋势

前言

天然色素广泛存在于多种生物特别是动植物体中,其安全性和营养价值高,有的兼具一定的药理作用。用

仅供参考,还望各位网友多多指正!

简述红花黄色素的提取分离流程

红花为菊科植物红花( Carthamustinctorius L . ) 的干燥花，俗名草红花、红蓝花，是中医传统的活血化瘀药，具有降血压、降血脂、抗血栓等作用，在治疗冠心病、高血压及脑溢血等疾病方面有一定疗效。红花黄色素中含有多种水溶性查耳酮类物质，是红花中具有生理活性的重要成分之一。同时，红花黄色素还是一种毒性极低、着色力强、色调稳定的天然色素。其具有色泽艳丽，耐高温、耐高压、耐低温、耐光、耐酸、耐还原性和抗微生物等优点。因此，红花黄素具有较高的实用价值和开发前景。

一 红花黄色素的理化特性

红花黄色素为黄色或棕黄色粉末，熔点228-230 ℃，红花黄色素为水溶性色素，易溶于水、稀乙醇、稀丙二醇，几乎不溶于无水乙醇，不溶于乙醚、石油醚、油脂、氯仿等有机溶剂。在红花中含量为20-30%

二 红花黄色素的提取方法

2.1 传统提取法

传统的提取方法有水提醇沉法、水浸提法等。尤其是水浸提法由于其操作简单易行、溶剂无毒性、成本低廉等优势得到国内许多研究者的重视。陆国权等确定的最佳提取条件为：PH3的酸性水溶液为提取剂，料液比1:50，温度70℃，时间1.2h，提取2次，得率最高达到93.4%

【课标要求】光合作用的基本过程。

【考向瞭望】综合考查光合作用和细胞呼吸各阶段的物质变化及其相互联系。

【知识梳理】一、捕获光能的色素（“绿叶中色素的提取和分离”的实验分析）

（一）原理解读：1、色素的提取：可以用无水乙醇（或丙酮）作溶剂提取绿叶中的色素，而不能用水，因为叶绿体中的色素不能溶于水。2、色素的分离：利用色素在层析液中的溶解度不同进行分离，溶解度大的在滤纸上扩散得快，反之则慢。

（二）实验流程图示：1、提取色素：（1）称取绿叶；（2）剪碎；（3）研磨：加入少许SiO2、CaCO3和10mL无水乙醇；（4）过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布；（5）收集滤液。2、制备滤纸条：（1）长与宽略小于试管，在一端剪去两角；（2）在距剪去两角的一端1cm处画铅笔线。3、画滤液细线：（1）沿铅笔线画一条直且均匀的滤液细线；（2）干燥后，再画一两次。4、色素分离：将滤液条插入有3mL层析液的试管中，有滤液细线的一端朝下。5、观察结果：滤纸条上色素带有四条，如图。

（三）色素的吸收光谱：叶绿素a和叶绿素b主要吸收红光和蓝紫光，胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光。

（四）实验中几种化学试剂的作用：1、无水 乙醇用于提取绿叶中的色素。2、层析液用于分离绿叶中的色素。3、二氧

【课标要求】光合作用的基本过程。

【考向瞭望】综合考查光合作用和细胞呼吸各阶段的物质变化及其相互联系。

【知识梳理】一、捕获光能的色素（“绿叶中色素的提取和分离”的实验分析）

（一）原理解读：1、色素的提取：可以用无水乙醇（或丙酮）作溶剂提取绿叶中的色素，而不能用水，因为叶绿体中的色素不能溶于水。2、色素的分离：利用色素在层析液中的溶解度不同进行分离，溶解度大的在滤纸上扩散得快，反之则慢。

（二）实验流程图示：1、提取色素：（1）称取绿叶；（2）剪碎；（3）研磨：加入少许SiO2、CaCO3和10mL无水乙醇；（4）过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布；（5）收集滤液。2、制备滤纸条：（1）长与宽略小于试管，在一端剪去两角；（2）在距剪去两角的一端1cm处画铅笔线。3、画滤液细线：（1）沿铅笔线画一条直且均匀的滤液细线；（2）干燥后，再画一两次。4、色素分离：将滤液条插入有3mL层析液的试管中，有滤液细线的一端朝下。5、观察结果：滤纸条上色素带有四条，如图。

（三）色素的吸收光谱：叶绿素a和叶绿素b主要吸收红光和蓝紫光，胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光。

（四）实验中几种化学试剂的作用：1、无水 乙醇用于提取绿叶中的色素。2、层析液用于分离绿叶中的色素。3、二氧

武汉植物学研究2009,27(4):432~436JournalofWuhanBotanicalResearch

蛇苔细胞色素C(CytC)的序列分析及功能预测

边春象

1,3

,李劲涛,彭正松,阮期平

213*

(1.西华师范大学生命科学学院,四川南充 637002;2.北京工业大学生命科学与生物工程学院,北京 100124;

3.绵阳师范学院分子生物学与生物制药重点实验室,四川绵阳 621000)

摘 要:通过核酸序列比对,在蛇苔cDNA文库中获得细胞色素C(CytC)基因序列,并对其编码的蛋白质产物从同源性、氨基酸组成、理化性质、亚细胞位点、结构和功能等进行生物信息学分析和预测。结果表明,该cDNA序列具有完整的开放阅读框(ORF,104~442bp),推测编码蛋白为112个氨基酸,与向日葵、荞麦、玉米等CytC存在着较高的保守性(相似性分别为84%、85%和84%),同属于细胞色素C超家族;蛇苔CytC蛋白的分子量为11998.7Da,不含信号肽,成熟的CytC起始于Ala2,其活性位点为Cys23、Cys26、His27和Met89;对蛋白质的翻译后修饰预测表明Ala2存在乙酰化修饰,Lys81和Lys95分别进行三甲基赖氨酸修饰。这些特点与其他植

绿叶中色素的提取和分离试验

实验：叶绿体中色素的提取和分离教学设计

一、设计思想

新课标提出学生学习方式的变革，倡导自主、合作与探究的学习方式。本实验设计通过让学生预习教材→提出质疑（问题）→作出假设→设计实验→合作实验→分析结果→得出结论→表达和交流→进一步探究来学习叶绿体中色素的提取和分离，激发学生的学习需要，带给学生理智的挑战，促使学生分工合作，丰富学生的经验系统。 二、教材分析

《叶绿体重色素的提取和分离》是人教版高中生物必修一《分子与细胞》第4章第2节《光合作用》第1节课的教学内容，主要学习色素的种类和功能、叶绿体的结构和功能，掌握提取、分离色素的实验方法。本节内容是对第3章细胞结构知识的提升，又是后面学习光合作用原理和应用的基础。

普通高中生物课程标准对本部分知识的要求是能分析科学家对光合作用的认识过程，形成光合作用的基本概念；提取和分离叶绿体中的色素，简述叶绿体中色素的吸收光谱；要求教师能直到学生做好提取和分离叶绿体中色素的探究性实验，有条件的学校教师应该组织部分学生参与叶绿素吸收光谱的实验。 三、教学目标 １、知识目标：

（１）说出叶绿体中色素的种类和作用； （２）说出叶绿体的结构和功能 ２、能力目标：

（１）通过“叶绿体中色