美蓝染色法

糖原染色

高碘酸-Schiff（Periodic acid Schiff, PAS）染色法 【试剂配制】

（1）高碘酸氧化液：

高碘酸 1g 蒸馏水 100ml。 （2）Schiff液：

碱性品红 1g 1N盐酸 20ml 亚硫酸氢钠 2g 活性炭 2g 蒸馏水 200ml

将1g碱性品红热溶于200ml煮沸水中，搅拌5分钟，冷至50℃时过滤，在滤液中加20ml 1当量盐酸，冷至25℃时加1g亚硫酸氢钠（sodiumbisulfite）。将该液存放在冷暗处14～24小时，然后加入2g活性炭，摇动1分钟过滤，滤后保存在0～4℃冷暗处，在室温下使用。

注意：如碱性品红为结晶，可预先研成粉末，使易溶解。亚硫酸氢钠须有浓厚的气味，否则效

PAS染色法-概况、原理

PAS染色法概况

PAS染色法（Periodic Acid-Schiff stain）在组织学上，主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基，再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。

PAS染色法原理

PAS染色又称过碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。 原理：过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，红色，定位于胞浆上。

PAS染色法-应用、制作

PAS染色法-应用

随着医学实验技术的发展 ，近年来 ，糖原染色应用的范围更加广泛，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质 ，心肌病变及其他心血管疾病的诊断 ，糖原累积病诊断和研究 ，糖尿病的诊断和研究 ，用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外 ，还可以观察肾小球基底膜 、结肠杯状细胞 中性黏液物质 、阿米巴滋养体和霉菌的着色。临床诊断、分类和治疗提供 了重要的依据。

PAS染色法-制作

1. 固定液:用Carnoy液或75%酒精 Carnoy固定液: 纯酒精60 ml 冰醋酸10ml氯仿 30ml

2. 染色液

1) 过碘酸酒清夜配法: 过碘

糖原染色

高碘酸-Schiff（Periodic acid Schiff, PAS）染色法 【试剂配制】

（1）高碘酸氧化液：

高碘酸 1g 蒸馏水 100ml。 （2）Schiff液：

碱性品红 1g 1N盐酸 20ml 亚硫酸氢钠 2g 活性炭 2g 蒸馏水 200ml

将1g碱性品红热溶于200ml煮沸水中，搅拌5分钟，冷至50℃时过滤，在滤液中加20ml 1当量盐酸，冷至25℃时加1g亚硫酸氢钠（sodiumbisulfite）。将该液存放在冷暗处14～24小时，然后加入2g活性炭，摇动1分钟过滤，滤后保存在0～4℃冷暗处，在室温下使用。

注意：如碱性品红为结晶，可预先研成粉末，使易溶解。亚硫酸氢钠须有浓厚的气味，否则效

PAS染色法-概况、原理

PAS染色法概况

PAS染色法（Periodic Acid-Schiff stain）在组织学上，主要用来检测组织中的糖类。过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基，再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。

PAS染色法原理

PAS染色又称过碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用来显示糖元和其它多糖物质。 原理：过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，红色，定位于胞浆上。

PAS染色法-应用、制作

PAS染色法-应用

随着医学实验技术的发展 ，近年来 ，糖原染色应用的范围更加广泛，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质 ，心肌病变及其他心血管疾病的诊断 ，糖原累积病诊断和研究 ，糖尿病的诊断和研究 ，用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外 ，还可以观察肾小球基底膜 、结肠杯状细胞 中性黏液物质 、阿米巴滋养体和霉菌的着色。临床诊断、分类和治疗提供 了重要的依据。

PAS染色法-制作

1. 固定液:用Carnoy液或75%酒精 Carnoy固定液: 纯酒精60 ml 冰醋酸10ml氯仿 30ml

2. 染色液

1) 过碘酸酒清夜配法: 过碘

实验六 考马斯亮蓝染色法测定牛奶中蛋白质含量

一、目的要求

学习考马斯亮蓝染色法测定牛奶中蛋白质含量的方法和原理，标准曲线的绘制和回归方程的使用，分光光度计的使用。 二、基本原理

考马斯亮蓝所含疏水基团在酸性条件下与蛋白质的疏水微区具有亲和力。通过疏水作用与蛋白质相结合，形成的蓝色蛋白质染料复合物，在595 am处有最大吸光度，在一定的蛋白质浓度范围内，蛋白质染料复合物在595 nm处的吸光度与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质含量的测定。 分光光度法的原理：通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析。 三、器材和试剂 1．器材

可见分光光度计，玻璃比色皿，试管 2．试剂

考马斯亮蓝G一250溶液：精确称取考马斯亮蓝G一250 100 mg，溶于50 mL 95％的乙醇，再加入100 mL 85％的磷酸，稀释定容至1 000 mL备用。

标准蛋白质溶液：精确称取牛血清白蛋白10 mg，加水溶解并定容至10 ml，冰冻，用时吸取上述溶液1 ml，用蒸馏水稀释至10 ml，即为100 μg/ml的标准蛋白质溶液。

样品的制作：准确吸取2 ml牛奶(市场上现买)加水至1000 ml制作样品。

四、操

考马斯亮蓝染色的原理和方法

在蛋白质染色方法中，目前以考马斯亮蓝染色最为常用。因为它既克服了氨基黑染色灵敏度不高的限制，又比银染简便易操作。 考染的历史

考马斯亮蓝染色最早由Fazekas等在1963年用于醋酸纤维素膜电泳，并认为同样可用于纸电泳，琼脂糖电泳和淀粉凝胶电泳。1965年Meyer等将此方法应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。 考染的灵敏度

考马斯亮蓝染色可以达到0.2~0.5 μg（200~500 ng），最低可检出0.1 μg蛋白；银染的灵敏度比考染高将近100倍，最低可以检出2 ng蛋白。

通过考染条带的深浅粗细，可以大致判断该条带有多少蛋白，如在8.6×6.8 cm（W×L）?.75 mm厚的胶上15~20 μg蛋白大约是下面这样的条带： 考马斯亮蓝染料的种类

考马斯亮蓝分为R-150、R-250、R-350、G-250等。其中R-350最为灵敏，R为红蓝色，G为绿蓝色。R-250即三苯基甲烷，每个分子含有两个SO3H基团，偏酸性，与氨基黑一样也是结合到蛋白质的碱性基团上。G-250即二甲花青亮蓝，是一种甲基取代的三苯基甲烷。 推荐一种考染的方法

⑴ 电泳后的凝胶立即浸泡在固定液（500 ml 乙醇，100 ml 冰醋酸，400 m

考马斯亮蓝染色的原理和方法

在蛋白质染色方法中，目前以考马斯亮蓝染色最为常用。因为它既克服了氨基黑染色灵敏度不高的限制，又比银染简便易操作。 考染的历史

考马斯亮蓝染色最早由Fazekas等在1963年用于醋酸纤维素膜电泳，并认为同样可用于纸电泳，琼脂糖电泳和淀粉凝胶电泳。1965年Meyer等将此方法应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。 考染的灵敏度

考马斯亮蓝染色可以达到0.2~0.5 μg（200~500 ng），最低可检出0.1 μg蛋白；银染的灵敏度比考染高将近100倍，最低可以检出2 ng蛋白。

通过考染条带的深浅粗细，可以大致判断该条带有多少蛋白，如在8.6×6.8 cm（W×L）?.75 mm厚的胶上15~20 μg蛋白大约是下面这样的条带： 考马斯亮蓝染料的种类

考马斯亮蓝分为R-150、R-250、R-350、G-250等。其中R-350最为灵敏，R为红蓝色，G为绿蓝色。R-250即三苯基甲烷，每个分子含有两个SO3H基团，偏酸性，与氨基黑一样也是结合到蛋白质的碱性基团上。G-250即二甲花青亮蓝，是一种甲基取代的三苯基甲烷。 推荐一种考染的方法

⑴ 电泳后的凝胶立即浸泡在固定液（500 ml 乙醇，100 ml 冰醋酸，400 m

道路运输从业人员 综合管理信息系统

数据同步方案

V1.0

北京美蓝科技有限责任公司

2013年5月

1 2

3

4

目录

目标........................................................................................................................................... 3 数据分类 ................................................................................................................................... 3 2.1 基础数据 ....................................................................................................................... 3

2.1.1 系统基础数据 ..................................................

何美慧老師: 訪談修藍博士 反思信願行

作者簡介：本文作者何美慧老師早年在 臺灣科技大學獲得化學工程學士，後在美國肯薩斯州大學獲得化學工程碩士及博士。1999年發願弘法利生，參加新加坡第五屆弘法人才培訓班，向淨公恩師學法。學習因果教育，在澳洲、臺灣、及香港佛陀教育協會習講《太上感應篇》、《了凡四訓》、《文昌帝君陰騭文》、《兪淨意公遇灶神記》，並主持分享懺悔班。專修淨土，習講《阿彌陀經要解》，並學習《無量壽經》，一心皈命西方極樂世界阿彌陀佛。

尊敬的師父上人、尊敬的諸位法師、諸位老師、大德、領導以及諸位護法菩薩們：大家中午好！阿彌陀佛！

感謝香港佛陀教育協會，師父上人、以及領導、胡居士，以及諸位法師、大德菩薩們的成就，讓美慧在今天有這個機緣跟大家報告“見修藍博士，反思信願行”這個題目，首先報告一下緣起：

緣起：老法師的推薦

在2011年的時候，當時末學帶懺悔班，在整理懺悔班的文稿，當時我們有一群同修們，大家一起在編懺悔班文稿，準備要出書。但是在整理過程當中，時常業障發相。當時很苦惱，就請

教師父上人應該如何來克服。師父上人就說：不是說美國有位修藍博士，人家就講四句話，第一句話“對不起”，第二句話“請原諒我”，第三句話“謝謝你”，第四

何美慧老師: 訪談修藍博士 反思信願行

作者簡介：本文作者何美慧老師早年在 臺灣科技大學獲得化學工程學士，後在美國肯薩斯州大學獲得化學工程碩士及博士。1999年發願弘法利生，參加新加坡第五屆弘法人才培訓班，向淨公恩師學法。學習因果教育，在澳洲、臺灣、及香港佛陀教育協會習講《太上感應篇》、《了凡四訓》、《文昌帝君陰騭文》、《兪淨意公遇灶神記》，並主持分享懺悔班。專修淨土，習講《阿彌陀經要解》，並學習《無量壽經》，一心皈命西方極樂世界阿彌陀佛。

尊敬的師父上人、尊敬的諸位法師、諸位老師、大德、領導以及諸位護法菩薩們：大家中午好！阿彌陀佛！

感謝香港佛陀教育協會，師父上人、以及領導、胡居士，以及諸位法師、大德菩薩們的成就，讓美慧在今天有這個機緣跟大家報告“見修藍博士，反思信願行”這個題目，首先報告一下緣起：

緣起：老法師的推薦

在2011年的時候，當時末學帶懺悔班，在整理懺悔班的文稿，當時我們有一群同修們，大家一起在編懺悔班文稿，準備要出書。但是在整理過程當中，時常業障發相。當時很苦惱，就請

教師父上人應該如何來克服。師父上人就說：不是說美國有位修藍博士，人家就講四句話，第一句話“對不起”，第二句話“請原諒我”，第三句話“謝謝你”，第四