磷脂酶a2催化的反应与信号转导的关系

火腿中肌肉磷脂酶的纯化其性质研究

国外一些研究者认为，在干腌火腿生产过程中，中性脂肪变化很小，而磷脂是脂肪水解的主要底物。我们对发酵干火腿加工过程中的脂肪水解状况进行了分析，也证实了这一观点，因此磷脂水解酶成为了研究干腌火腿脂肪水解机理的关键。

本研究利用阴、阳离子交换、亲和层析等多种纯化手段相结合获得了2种电泳纯的磷脂水解酶。由于某些脂酶也具有水解磷脂的能力，我们首先需要弄清楚本研究中以磷脂为底物获得的磷脂水解酶是属于脂酶还是磷脂酶？如果是磷脂酶，和已从其它组织中纯化出来的磷脂酶有什么关系？另外，腌制剂、加工工艺条件等对该酶活有什么影响？为此，本研究对已纯化的磷脂水解酶的基本性质进行了鉴定，旨在为发酵干火腿生产过程中与脂肪水解氧化等有关的风味化合物的产生机理及其控制提供技术参考。

1 材料与方法

1.1 磷脂水解酶的分离

按汪家政等（2002）方法进行。 1.2 磷脂水解酶活性的测定

用同位素标记底物法对纯化的酶活进行测定 具体操作流程：

0.2 ml 粗酶液 + 5 μl磷脂底物

反应（37℃, 20分钟）

冰浴并向反应体系中加入2 ml甲苯、三氯甲烷和甲醇的混合物

（1:0.5:1.2

植物经历干旱胁迫时,ABA被普遍认为是一种干旱信号而传递干旱信息。在干旱信号ABA的转导过程中,从ABA的被感知到保卫细胞发生变化引起气孔关闭以及ABA诱导的基因表达都经历了复杂的变化。本文对ABA的信号转导过程进行了综述。

植物学通报　　2004, 21 (2): 228￣234Chinese Bulletin of Botany

干旱胁迫与ABA的信号转导①

１，２刘子会　　２郭秀林　　１王　刚　　２李广敏

1

2②(河北师范大学生命科学学院 石家庄 050016)（河北省农林科学院遗传生理研究所 石家庄 050051）

摘要 植物经历干旱胁迫时，ABA被普遍认为是一种干旱信号而传递干旱信息。在干旱信号ABA的转导过程中，从ABA的被感知到保卫细胞发生变化引起气孔关闭以及ABA诱导的基因表达都经历了复杂的变化。本文对ABA的信号转导过程进行了综述。

关键词 干旱胁迫， ABA， 信号转导

Drought Stress and Signal Transduction of ABA

1,2

1LIU Zi-Hui 2GUO Xiu-Lin 1WANG-Gang 2Li Guang-Min② ( Colleg

细胞信号转导及与相关疾病

摘要：多细胞生物体中的每一个细胞都在一定的条件下执行各自的功能，而这些功能大多具有某种关联，为了使细胞的各种功能活动能够有序的完成，则完善的细胞间的信号传导是必不可少的。 关键词：信号转导，受体 一． 信号转导的概念：

细胞外的信号物质（激素，递质和细胞因子等）作用于细胞表面或细胞内受体，将细胞外信号分子所携带的信号转到细胞内的过程。信号分子作用于细胞时，不进入细胞，也不影响细胞内的过程，而是作用于细胞（核）膜的特殊蛋白分子（受体），将外界环境变化信息以新的信号形式（第二信使）传到细胞内，再引发一系列反应，调控细胞功能活动。

二．与信号转导作用有关物质的概念与性质

（1）配体：与受体发生特异性结合的活性物质。如：A.体外刺激信号(物理性：光、声、电、温度;化学性：空气、环境中的各种化学物质)B. 体内刺激信号(激素、神经递质、细胞因子、生长因子、气体分子（NO、CO、H2S）等)

(2)受体：存在于细胞表面或亚细胞组分中的天然分子，具有特异性，饱和性，高亲和力等特征，在细胞内放大，传递信号，启动一系列生化反应，最终导致特定的细胞反应。

1）G蛋白藕联受体：G蛋白的结合部位在胞浆侧，与配体结合后激活G蛋白，其本身不

信号转导通路在细胞代谢、生长、增殖、应激、发育和凋亡等生命活动中具有极为重要的作用。干扰这些通路将可能影响细胞的正常发育, 甚至导致肿瘤。MicroRNA(miRNA)是近年来在真核生物中发现的、在转录后水平负调节基因表达的一类长度约22个核苷酸的非编码小RNA, 其靶基因数目众

HEREDITAS (Beijing)

2007年12月, 29(12) : 1419―1428 ISSN 0253-9772 http://www.77cn.com.cn

综 述

DOI: 10.1360/yc-007-1419

MicroRNA与肿瘤相关的信号转导通路

吴易阳, 李岭

中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室, 沈阳 110001

摘要: 信号转导通路在细胞代谢、生长、增殖、应激、发育和凋亡等生命活动中具有极为重要的作用。干扰这些通路将可能影响细胞的正常发育, 甚至导致肿瘤。MicroRNA(miRNA)是近年来在真核生物中发现的、在转录后水平负调节基因表达的一类长度约22个核苷酸的非编码小RNA, 其靶基因数目众多, 生物学功能广泛。在多种肿瘤中发现了miRNA的异常表达, 提示后者与肿瘤发生有关, 可能机制为调控癌基因或肿瘤抑制基因的表达。此外亦

具有抗炎、抗过敏活性磷脂酶

抑制剂的研究进展*

王 寅 朱再明

(辽宁师范大学化学系 大连 116029)

刘 彦

(大连医科大学生化教研室 大连 116027)

摘 要 磷脂酶参与细胞跨膜信息传递，磷脂酶A2还是机体炎症、过敏介质产生的关键酶。因此，磷脂酶抑制剂的合成研究对研究细胞表达某种功能的信息传递机制及与磷脂酶A2激活相关的疾病治疗机制和药物研究具有重要意义。本文主要综述了近期有关磷脂酶A2抑制剂的合成、结构、抑效性能、构效关系及应用前景等,对磷脂酶C和磷脂酶D的抑制剂作了简要介绍。

关键词 磷脂酶A2 磷脂酶C 磷脂酶D 磷脂酶抑制剂

Recent Advances in Phospholipase Inhibitors

Wang Yin Zhu Zaiming

(Department of Chemistry, Liaoning Normal University, Dalian 116029,

China) Liu Yan

（Department of Biochemistry， Dalian Medical University, Dalian 116027,

China) Abstract Phospholipase A2,

细胞信号转导研究方法

信号转导的研究方法

细胞信号转导研究方法

生物样品的处理

组织样品

采集：新鲜、未污染，剥去脂肪和筋皮等结缔组织若保存，液氮速冻，-80℃冻存

蛋白质成分的保护通常在生物样品中加入适量的蛋白酶抑制剂：PMSF(苯甲

磺酰氟)、EDTA、胰蛋白酶抑制剂、胃蛋白酶抑制剂和亮抑蛋白酶肽。

细胞信号转导研究方法

低温保存：根据蛋白质的用途决定保存温度：4、

-20还是-80,特殊要液氮

冻溶： -20或-80→4(一天) →室温

均匀摇晃，勿产生气泡，减少沉淀

组织提取物的制备：提取可溶蛋白(尽可能选

择含目标蛋白高的组织)

细胞信号转导研究方法

步骤及注意事项：1、切成小块，放入预冷匀浆器，加入预冷缓冲液(2倍体积)

2、匀浆1-3min,若较长时间，则间隔1min3、匀浆方法选择：有的组织在匀浆前先冷冻后有利于破碎；

人工匀浆

4、缓冲液的选择：使用中性PH、离子强度适当 5、抑制蛋白酶的加入：根据蛋白质的可能降解情况加入(酶 抑制剂价格昂贵)

6、低温高速或超速离心 7、超声的方法

细胞信号转导研究方法

细胞破碎与分离

破碎方法：

机械法： 非机械法：溶胞作用：酶溶法、化学法、物理法

酶溶法：用生物酶将细胞壁和细胞膜消化溶解 常用：溶菌酶、β -1,3葡

高级植物生理学，植物细胞信号转导

植物在整个生长过程中，受到来自外部内部的各种生物的或非生物的刺激。如温度、光、重力、植物激素、病原生物，这些刺激都能影响植物的生长和发育过程。

在长期的进化过程中，植物体本身形成了许多应答(response)这些刺激的机制，其中信号转导(signal transduction)就是应答这些刺激最为重要的环节。细胞通过感受这些物理的、化学的或生物的信息，并作出适当的生理反应以维持其生命活动的进行。

例如植物的向光性能促使植物向光线充足的方向生长，在这个过程中，首先植物体要能感受到光线，然后把相关的信息传递到有关的靶细胞，并诱发胞内信号转化传递，调节基因的表达或改变酶的活性，从而使细胞作出反应。这种信息的胞间传递和胞内转导过程称为植物体内的信号传导。

植物体的信息系统可概括为两大类：

一类是遗传基因信息系统。在生物进化过程中形成的，以核酸蛋白质为组成的生物大分子信息系统。

高等植物细胞全能性的发现，证实了细胞中含有发育成为完整植株的全套的遗传信息。植物生长发育就是植物基因（遗传信息）受内外环境的影响，在时间和空间顺序表达的结果。

另一类是环境刺激—细胞反应偶联信息系统。植物感受到环境信号，并将其转变为植物体内的信号，从而调节植

第七章 信号转导

一、名词解释 1.类激素分子 2.整联蛋白 3.细胞通讯 4.细胞识别 5.受体

6.第二信使学说 二、填空题

1、细胞以三种方式进行通讯： 、 和 。 2、细胞的信号分子根据其溶解性通常可分为 和 。

3、亲脂性信号分子主要有 和 ,亲水性信号分子主要有 、 和 。 4、在体内发现的第一个气体信号分子是 。

5、Gi对腺苷酸环化酶的抑制的两个途径是 和 。 6、第二信使有________、_________、________、_________等。 7、受体的本质是 ，构成 。 8、受体至少有两个功能区_________和_________。

9、离子通道偶联的受体主要存在于________，G蛋白偶联的受体位于________酶偶联的受体都是 ____________蛋白。

10、根据信号转导机制和受体蛋白类型的不同,细胞表面受体可以分为：①_________②

______

细胞信号转导障碍与疾病(Dysfunction of cellular signal transduction in disease)

Clinical example男性， 6岁时因自幼皮肤黄色瘤就诊。 患儿出生时臀部即有一绿豆粒大小之疹 状黄色瘤，此后，黄色瘤渐扩展为条纹 状及片状，且颈后、肘部和膑骨等肌腱 附着处及眼内眦部先后出现斑块状、条 纹状黄色瘤。5岁后双手指、足趾伸肌 腱及跟腱先后出现大小不等的结节状黄 色瘤。

Clinical example体检： 心脏听诊主动脉瓣区可闻Ⅲ级收缩期杂音 实验室检查： 血清总胆固醇(TC) 21.3 mmol/L(2.82~5.95 mmol/L)

甘油三酯(TG)

1.2 mmol/L(0.56~1.7 mmol/L)

高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 0.8 mmol/L(1.03~2.07 mmol/L)

低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C) 19.6 mmol/L(2.7~3.2 mmol/L)

Clinical example 心电图示左室肥厚及心肌缺血 心脏多普勒检查显示主动脉壁增 厚、异常光斑、主动脉狭窄 7岁时每于剧烈运动即心绞痛发作 8岁时奔跑后突发前室间隔心肌梗死 10岁于冠

第23卷 第11期2011年11月生命科学

Chinese Bulletin of Life Sciences

Vol. 23, No. 11

Nov., 2011

文章编号：1004-0374(2011)11-1106-08

受体激 酶介导的油菜素内酯信号转导途径

卫卓赟，黎　家*

(兰州大学生命科学学院，兰州 730000)

摘　要：油菜素内酯(brassinosteroids, BRs)是一类重要的类固醇激素，参与调控植物生长发育的许多过程。结合应用遗传学、生物化学以及蛋白质组学等研究手段现已基本阐明了BR信号转导的主要过程。BRI1作为受体在细胞表面感知BR，BRI1抑制子BKI1从质膜上解离下来，使BRI1与其共受体BAK1结合。BRI1和BAK1通过顺序磷酸化将BR信号完全激活。活化的BRI1将BSK磷酸化激活，BSK活化BSU1，BSU1将BIN2去磷酸化使其失活，解除BIN2对BES1/BZR1的抑制功能。PP2A可以将BES1/BZR1去磷酸化激活，

BR信号的传递最终使去磷酸化状态的BES1/BZR1在细胞内累积，又可以将受体BRI1去磷酸化促使其降解。激活BR信号通路下游的转录调控。

BRI1；BAK1关键词：油菜素内酯；受体激酶；信号转导