生物工程本科实验有哪些

生 物 工 程 实 验 指 导

（试用版）

（适用于生物科学和生物技术专业） 主编 高国辉 副主编 李劲松 周晓辉

温州医学院生命科学院

2010年1月

1

目录

基因工程学实验

实验一 重组原核表达载体的构建与克隆鉴定???????????? 1 实验二 重组蛋白的诱导表达??????????????????? 9 实验三 重组蛋白的聚丙烯凝胶电泳（PAGE）????????????? 12 实验四 重组蛋白纯化：可溶性His Tag-蛋白的抽提?????????? 16 实验五 蛋白质免疫印迹分析（Western Blot）???????????? 19

微生物工程学实验

实验一 种子、发酵培养基制备及培养基实消????????????? 22 实验二 发酵种子扩大培养、一级种子制备?????????????? 24 实验三 接种与发酵过程控制管理???????????????????25 实验四 发酵液SOD活性检测???????????????????? 27

生化工程学实验

实验一 超氧化物歧化酶粗酶液的分离纯化???????????????28 实验二 超氧化物歧化酶蛋白浓度和酶活性的测定

生 物 工 程 实 验 指 导

（试用版）

（适用于生物科学和生物技术专业） 主编 高国辉 副主编 李劲松 周晓辉

温州医学院生命科学院

2010年1月

1

目录

基因工程学实验

实验一 重组原核表达载体的构建与克隆鉴定???????????? 1 实验二 重组蛋白的诱导表达??????????????????? 9 实验三 重组蛋白的聚丙烯凝胶电泳（PAGE）????????????? 12 实验四 重组蛋白纯化：可溶性His Tag-蛋白的抽提?????????? 16 实验五 蛋白质免疫印迹分析（Western Blot）???????????? 19

微生物工程学实验

实验一 种子、发酵培养基制备及培养基实消????????????? 22 实验二 发酵种子扩大培养、一级种子制备?????????????? 24 实验三 接种与发酵过程控制管理???????????????????25 实验四 发酵液SOD活性检测???????????????????? 27

生化工程学实验

实验一 超氧化物歧化酶粗酶液的分离纯化???????????????28 实验二 超氧化物歧化酶蛋白浓度和酶活性的测定

篇一：生物工程专业个人简历

个人简历

个人概况

姓名：*** 性别：女

身高：161厘米

出生年月：1989年5月 民族：汉 籍贯：甘肃

健康状况及心理素质：良好 政治面貌：预备党员 毕业院校：******** 专业：生物工程 学历：本科

电子邮件： 联系电话：*********** 通信地址：******** 邮编：*******

教育背景

2002年8月— 2008年6月 ******

2008年8月— 2012年6月******学院

★获奖及成绩情况 综合测评名列本班第三

获得2010-2011学年国家励志奖学金 获得“三好生”荣誉称号

获得2008-2009学年二等奖学金 获得2009-2010学年二等奖学金 获得学习优胜奖

获得第六届学科技能大赛化学实验技能竞赛三等奖 获得第七届学科技能竞赛数学建模竞赛优秀奖 获得2012届“优秀大学毕业生”称号 通过教师资格证考试

获得全国普通话水平测试二级乙等证书

★外语与计算机水平

通过全国大学英语四级考试

通过全国计算机国家职业资格三级考试，熟练掌握Office系列软件操作系统

★主修课程

生物化学、物理化学、发酵工程、生物分离工程、细胞工程，分子生物学、无机分析化学、有机化学、微生物理论、细胞生物学、基因工程、普通生物学、高等

实验1 培养基的配制和灭菌

一、目的要求

1.了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。

2.了解几种灭菌方法，掌握高压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 3.熟悉菌种分离筛选的前期准备工作及操作方法。 4.每2人一组，每人一份实验报告。 二、实验材料

1.药品：酵母粉、蛋白胨、氯化钠、琼脂、葡萄糖、KNO3、MgSO4?7H2O、FeSO4?7H2O、1N HCl、1N NaOH

2.设备：高压蒸汽灭菌锅、紫外线灭菌灯、75%酒精棉。

3.材料：天平、药匙、电炉、pH 试纸、烧杯、量筒、5mL、10mL 注射器、玻璃棒、试管、培养基、吸管、移液器（1mL 0.2mL）、牛皮纸、线绳、标签等。 三、实验内容 (一) 培养基的配制 1．培养基的配制方法和步骤

1)称量：按照配方正确称取所需药品放于烧杯中。 2)溶化：在烧杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。 3)调pH 值：用1N NaOH 或1N HCl 调pH，用pH 试纸对照。 4)加琼脂溶化：加热过程要不断搅拌，可适当补水。 5)分装：注意不要污染试管塞或纱布。 6)包扎成捆：用记号笔注明何种培养基。

7)灭菌：在高压锅中， 115 °C 高温灭菌30min。 2．培养基的配制 A.

微生物工程实验指导

河北农业大学

生命科学学院制药工程系

2007年10月

实验一 细菌生长曲线的测定

一、实验目的

了解细菌生长曲线特点及测定原理； 学习用比浊法测定细菌的生长曲线。

二、原理

将少量细菌接种到一定体积的、适合的新鲜培养基中，在适宜的条件下进行培养，定时测定培养液中的菌量，以菌量的对数作纵坐标，生长时间作横坐标，绘制的曲线叫生长曲线。它反映了单细胞微生物在一定环境条件下于液体培养时所表现出的群体生长规律。依据其生长速率的不同，一般可把生长曲线分为延缓期、对数期、稳定期和衰亡期。这四个时期的长短因菌种的遗传性、接种量和培养条件的不同而有所改变。因此通过测定微生物的生长曲线，可了解各菌的生长规律，对于科研和生产都具有重要的指导意义。

测定微生物的数量有多种不同的方法，可根据要求和实验室条件选用。本实验采用比浊法测定，由于细菌悬液的浓度与光密度（OD值）成正比，因此可利用分光光度计测定菌悬液的光密度来推知菌液的浓度，并将所测的OD值与其对应的培养时间作图，即可绘出该菌在一定条件下的生长曲线，此法快捷、简便。

三、实验材料

1. 菌种

大肠杆菌（E.coli） 2. 培养基

肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏 3g，蛋白胨 10g，N

1. 根据工艺操作，发酵生产设备类型分为 发酵设备和 发酵设备。

2．小型发酵罐罐顶和罐身采用 连接，材料一般为不锈钢。

3．罐体各部分的尺寸有一定的比例，罐的高度与直径之比一般为 左右。 4．挡板的作用是防止液面中央形成 流动，增强其湍动和溶氧传质。 5．消泡器的作用是 。

6．大型发酵罐搅拌轴较长，常分为二至三段，用 使上下搅拌轴成牢固的刚性联接。

7．为了防止发酵液泄漏和杂菌污染，搅拌器轴与罐顶或罐底连接处需要密封，即 。

8．一个发酵罐的圆柱部分体积为80 L，上下封头的体积分别为10 L，如果装料系数为80%，则罐的总容积为 L，罐的有效容积为 L，公称容积为 L。

9．CIP清洗系统整个清洗程序分7个步骤：预冲洗、 、中间清洗、清水喷冲、碱喷冲、清水冲洗、 。

10．细胞培养的操作方式有 、流加式操作、半连续式操作、 连续操作

和 。

11．笼式通气搅拌反应器由

低聚壳聚糖的功能及制备

生物工程 方安然 13849913

摘要：本文综述了低聚壳聚糖的性质和功能以及制备方法。 关键字：低聚壳聚糖，功能，制备方法

甲壳素(Chitin)，又名几丁质、甲壳质、壳多糖等，壳聚糖(Chitosan)是甲壳素脱乙酰化的产物，结构式如图1。甲壳素广泛存在于生物界，如海蟹、海洋贝壳类、软体动物软骨、昆虫外壳以及蘑菇类的细胞膜中，是仅次于纤维素的第二大多糖，素有“人体第六要素”的美誉[1]。由于具有良好的生物相容性和可降解性

[2]

，因而具有广泛的用途。但由于其分子量大、水溶性差、在人体内不易被吸收

而使其应用受到限制[3]。低聚壳聚糖(Chitooligosaccharide)是壳聚糖经降解生成的一类低聚物，是一种可生物降解的聚阳离子高分子材料。低聚壳聚糖也叫做壳寡糖、壳聚寡糖或几丁寡糖，学名叫β-1,4-寡糖-葡萄糖胺[4]，其相对分子量一般在1000-10000之间。低聚壳聚糖的水溶性显著提高，其不仅保留了高分子量壳聚糖原有的功能特性，而且还有许多独特的生理活性和功能性质，具有更有魅力的新用途。

1 低聚壳聚糖糖具有性质和功能 1.1 水溶性

当壳聚糖降解时，其相对分子质量降低，壳聚糖分子中的氢键作用随之

中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告

实验一 培养基的配制和灭菌

一、目的要求

1.了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。

2.了解几种灭菌方法，掌握高压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 3.熟悉菌种分离筛选的前期准备工作及操作方法。 4.每2人一组，每人一份实验报告。

二、实验材料

1、药品：酵母粉、蛋白胨、氯化钠、琼脂、葡萄糖、KNO3、MgSO4?7H2O、FeSO4?7H2O、1N HCl、1N NaOH。

2、设备：高压蒸汽灭菌锅、紫外线灭菌灯、75%酒精棉。

3、材料：天平、药匙、电炉、pH试纸、烧杯、量筒、5mL、10mL注射器、玻璃棒、试管、培养基、吸管、牛皮纸、线绳、标签等。 移液器（1mL 0.2mL）。

三、实验内容

(一) 培养基的配制 1、培养基的配制方法和步骤

1)称量：按照配方正确称取所需药品放于烧杯中。 2)溶化：在烧杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。 3)调pH值：用1N NaOH或1N HCl调pH，用pH试纸对照。 4)加琼脂溶化：加热过程要不断搅拌，可适当补水。 5)分装：注意不要污染试管塞或纱布。 6)包扎成捆：用记号笔注明何种培养基。 7)灭菌：在高压锅中， 115 ?C高温

线 名 姓 号 学 订 业 专 级装年

卷号：（A） （ 年 月 日） 机密

济宁学院2016-2017学年第二学期

6、

级专业有机化学（工科）期末考试练习3

7、BrCH2CH2CH==CHBr

(

)

题号 一 二 三 四 五 六 七 八 总得分 8、

题分 核分人 9、

得分 10、

复查人 阅卷人 11、

一、命名（6小题，每小题2分，共12分） 12、

(

) 1、写出2，7，8-三甲基癸烷的构造式。 2、写出烯丙基的构造式。 3、写出

的系统名称。

13、

4、写出异丙醇的构造式。 5、写出1, 4-萘醌的构造式。 6、写出

的系统名称。

14、

二、完成反应（15小题，每小题2分，共30分）

15、

1、

三、理化性质比较（5小题，每小题2分，共10分） 2、 1、将下列自由基按稳定性大小排列成序：

3、

2、将下列烯烃

生物工程设备复习题,谁用谁知道

1.菌体得率YX/S

对基质的细胞得率Yx/s

2. 装料系数

发酵罐存在持气与起泡问题，必须在充入培养液后留有一定的空间。

式中 V—发酵罐的代表容积（m3）；V0—进入发酵罐的发酵液量（m3）

ψ —装液系数

3.实罐灭菌

将培养基置于发酵罐中用蒸汽加热，达到预定灭菌温度后，维持一定时间，再冷却到发酵温度，然后

接种发酵，又称分批灭菌。

4.升膜式蒸发器

真空蒸发设备，主要由加热室和汽液分离器组成，在真空状态下溶液在蒸发器的加热表面形成液膜，

很快受热升温、汽化、浓缩。液膜与蒸发的二次气流方向相同称为升膜式蒸发器。

5．带式输送机

利用一根封闭的环形皮带，绕在相距一定距离的2个鼓轮上，皮带由主动轮带动运行，物料在带上靠摩

擦力随带前进，到另一端卸料。由皮带、托辊、鼓轮、传动装置、张紧装置、加料装置和卸料装置组成。

适用于松散干湿物料、谷物颗粒及成件制品。

二.填空

1.某机械搅拌发酵罐内发酵液中的溶氧浓度为0.025mol/m3,此罐压下饱和溶氧浓度为0.275 mol/m3,此罐的

KLa值为1000(1/h),根据传质理论,计算此类发酵罐的供氧能力为 250 mol (O2)/(m3 h)

2.某酒精工厂,每发酵罐的进料量为24t/h,