鲍曼不动杆菌痰培养检测不到

鲍曼不动杆菌检测分析手册

一、 分类和基因组特征

鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）属于莫拉氏菌科（Moraxellaceae），不动杆菌属，不动杆菌属命名于1986年，基于DNA-DNA杂交试验，已有21个基因种（genomospecies）被确定 (4,32) ，其中只有7种有正式的命名。鲍曼不动杆菌属于基因种2，是不动杆菌属中临床最常见的一种。

目前为止完成全基因组测序的鲍曼不动杆菌共有3株，多重耐药株AYE、全敏感株SDF、ATCC17978 (10,31) ，其基因组信息见表1-1。多重耐药株AYE携带3个质粒，但是令人惊讶的是这3个质粒没有携带任何已知的耐药相关基因。在AYE染色体中共有52个基因被预测与抗性相关（其中只有7个在SDF中也有分布），其中有45个抗性基因紧密地集合在一个86kb的抗性岛中，是目前发现的最大的抗性岛 (10) 。该抗性岛打断了一个“putative ATPase”读码框，该插入位点在SDF也发现伴有插入（19.6kb—25ORFs），都伴随着“ACCGC”的同向重复。目前为止AYE和SDF的基因组序列还没有在网上公布，关于这两个基因组的其他信息还有待进一步公布。

表1

中国鲍曼不动杆菌感染诊治与防控专家共识

一、概述：共识目的和意义（俞云松教授，300字左右）

鲍曼不动杆菌具有强大的获得耐药性和克隆传播的能力，多重耐药、广泛耐药、全耐药鲍曼不动杆菌呈世界性流行，已成为我国院内感染最重要的“超级细菌”。多重耐药鲍曼不动杆菌(Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii, MDRAB)是指对下列三种及以上类别抗菌药物耐药的菌株，包括：抗假单胞菌头孢菌素、抗假单胞菌碳青霉烯类抗生素、含有β内酰胺酶抑制剂的复合制剂（哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦）、氟喹诺酮类、氨基糖苷类抗生素；广泛耐药鲍曼不动杆菌（Extensive Drug Resistant A. baumannii，XDRAB）是指鲍曼不动杆菌仅对1～2种有效抗菌药物敏感的菌株；全耐药鲍曼不动杆菌（Pan Drug Resistant A. baumannii， PDRAB）则指对当地目前所能获得的潜在有抗不动杆菌活性的抗菌药物（包括多粘菌素E、替加环素）均耐药的菌株。目前，鲍曼不动杆菌感染的诊断、治疗和预防控制上存在诸多困惑。制定针对鲍曼不动杆菌的权威共识将能够规范并提升我国鲍曼不动杆菌感染诊治及防控水平。

1108临床肺科杂志　2009年8月　第14卷第8

期

65株鲍曼不动杆菌的分布和耐药性的分析

戢文利　周敏　史莉　张骅

　　鲍曼不动杆菌是目前医院获得性感染的重要条件致病

菌,对抗生素多重耐药,耐药率高,为提高抗生素的合理应用,分析有关资料。

材料与方法

一、65株鲍曼不动杆菌的标本来源为痰液53例,血标本6例,伤口分泌物4例胸水1例,尿标本1例。

二、细菌鉴定和药敏实验　血培养采用BATEC9120全自动血培养仪及配套血培养瓶进行检测;细菌培养genuine《国临床检验操作规程》进行,细菌鉴定采用VI微生物分析系统(法国生物-;验采用扩散法(K员会/(NCCLS/CLST)2004年规则操作并判断结果三、质量控制　以标准菌株金黄色葡萄球菌ATCC2592、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿单胞菌ATCC27853进行室内质量控制,分析统计软件为WHONET513。

结　　果

一、科室分布:鲍曼不动杆菌在ICU检出率最高23例,

其次为神经内科18例;感染发生部位的构成比以呼吸道为最高,其次在血标本。

二、鲍曼不动杆菌的耐药分析　删除敏感在40%以上的,见表1。

表1　2007～2008年鲍曼不动杆菌对19种抗生素的药敏分析构成比(%)药物

氨苄西林/舒巴坦亚胺培南

鲍曼对曼昆经济学原理真实世界新解

哈佛教授N. 格利高里 曼昆撰写的经济学入门教材《经济学原理》把经济学思想总结为10个经济学原理。略略细读这些原理，读者可能就会产生疑问，觉得把经济学思想综合成10个经济学原理不是件容易的事，有时甚至会让读者对N. 格利高里 曼昆巧妙而简洁的总结产生怀疑。 对于以上的疑问本人已做出一些修补。第二个列表是本人把曼昆的十大经济学原理总结翻译成通俗易懂的英语，这样可以让那些不懂经济的人很快就能了解经济思想。解释和具体说明在以下几页会提到，但建议每个读者把表格减下来，随身带着它，万一对基本的《经济学原理》又迷惑时(尽管以后不大可能)，它会有帮助的。

Mankiw’s Principle 曼昆的原理 #1 People face tradeoffs 人们面临权衡取舍

#2 The cost of something is what you give up to get it 某种东西的成本是为了得到它所放弃的东西 #3 Rational people think at the margin 理性人考虑边际量

#4 People respond to incentives 人们

大肠菌群测定的操作细则

大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。 食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。 1 设备和材料 1.1 温箱：36±1℃。 1.2 冰箱:0～4℃。

1.3 恒温水浴 :44.5±0.5℃。 1.4 天平。 1.5 显微镜。 1.6 均质器或乳钵。 1.7 平皿:直径为90mm。 1.8 试管。 1.9 吸管。

1.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。 1.11 玻璃珠:直径约5mm。 1.12 载玻片。 1.13 酒精灯。 1.14 试管架。 2 培养基和试剂

2.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。 2.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25规定。

2.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。 2.4 EC 肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。

2.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。 2.6 生理盐水。

大肠杆菌培养

一、菌种冻存液的制备

含有足量细菌的液体培养基离心后在沉淀中加入等量40%甘油，-80oC冻存。 二、培养基制备

LB培养基配方（胰化蛋白胨（Trypton）：10 g/L；酵母提取物（Yeast Extract）：5 g/L；NaCl：10 g/L；pH 7.4）

液体培养基

胰化蛋白胨 10.0g 酵母粉 5.0g 氯化钠 10.0g 水 1000ml pH 7.4

固体培养基在液体培养基的基础上再加入1.5％－2.0％的琼脂 三、平板的制备

1）称取胰化蛋白胨10.0g，酵母粉5.0g，NaCl 10.0g，加入800mL二次水溶解，并用玻璃棒搅拌均匀，用1mol/L的NaOH调pH至7.4左右，定容至1L，调pH 7.4（若溶液pH大于7.4，用1mol/L HCl回调）。

2）分装在锥形瓶中，每瓶量不宜太多，没过瓶底一指左右。如需固体培养基在分装后的液体培养基内加入约2%的琼脂（150mL液体培养基加入2.5g琼脂）。 3）在锥形瓶口依次覆盖带滤纸通气小孔的塑料膜和硬质纸，用皮筋捆好。所有锥形瓶如上述操作。用记号笔注明培养基名称、配制日期。 4）

大肠杆菌培养操作规程

一、 目的及适用范围

制订本规程的目的为规范大肠杆菌总RNA的制备，保证为诊断试剂产品提供质量可控的质控品及标准品基质。本规程适用于南京实验室提取大肠杆菌总RNA的操作。依照本操作规程，每次可提前大约提取基质液原液2.7ml。

二、 常规时间安排 预计安排 步骤 耗材准备 PBS储存液配置 第一天 培养基配制 灭菌 领取菌种 菌种复苏 第二天 接种 分装培养 RNA完全提取根据需求，自行安排。

三、 培养用耗材准备

1、 锥形瓶、双层铝箔、棉绳

2、 包扎一盒1ml的枪头，50ml康宁冻存管

四、 培养基配制(早上)

培养基应现配现用，每次配置350ml，一次性使用完毕。

1、 按下表称取物资配置LB培养基到500ml锥形瓶中： 例如：配制350mlLB培养基配方如下：[配置双份] 蛋白胨 成分名称 TRYPTONE 称取质量 3.5g 钠 3.5g YEAST XTRACT 1.75g 补足350ml 氯化酵母提取物 去离子水 耗时评估 20min 40min 20min 3h 10min 9h 40min 13h 2、 用双层铝箔和棉绳对锥形瓶进行封口，摇晃锥形瓶以使各物质迅速、均匀、

完全、溶解。待灭

高中生物实验

生物实验技能考核教案

题 目 《大肠杆菌的分离和培养》教案 学 院___ 化学和生命科学学院 班 级___ 生物科学102班 __ _ _ 姓 名___ 杜艳花__ ___ _ _ 学 号联系电话_ _18758912261（612261） 指导老师 张萍华

日期： 2013 年 7

月 4 日

高中生物实验

《大肠杆菌的分离与培养》教案

一、实验教材分析

本节内容选自浙科版生物选修1第1部分实验1大肠杆菌的分离和培养。本次课程主要包括了本次实验的目的、大肠杆菌的特点、无菌操作和灭菌的方法、仪器设备和实验材料、实验步骤等内容。在前一节介绍了实验室规则和生物技术概况的基础上，进行具体的实验操作。并且经过生物必修三册书本的学习，学生已经掌握了一定的细菌的相关知识，并对一些特殊细菌的筛选和鉴别有了一定的了解。故本次实验教学既是对学生前面学的理论知识的深化，同时也为学生将要学到的分离以尿素为氮源的微生物等内容奠定了比较重要的基础。因此，本节课起着承前启后的重要作用。

篇一：实验1 大肠杆菌的培养和分离实验教学提纲

实验1 大肠杆菌的培养和分离教学提纲

实验目的

1. 进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。

2. 进行大肠杆菌的分离，用固体培养基进行细菌的划线培养。

3. 说明大肠杆菌的培养条件和操作要求的原理。

实验材料

1. 配制LB液体培养基，蛋白胨0.5g，酵母提取液0.25g，氯化钠0.5g，加水50mL溶解。

2. 配制LB固体培养基，蛋白胨0.5g，酵母提取液0.25g，氯化钠0.5g，琼脂1g，加水50mL溶解（配制LB固体培养基是用来倒平板和倒试管斜面）。

实验步骤

1. 培养基灭菌。

在两个150mL的三角瓶中分别装入50mL LB液体培养基和50mL LB固体培养基（刚配好，尚未凝固），加上封口膜(一种塑料薄膜，中间有小孔的滤膜。既可以通气，又不使细菌进入。)。将培养皿用牛皮纸包好，放入高压灭菌锅中，1kg压力灭菌15min（有压力时开始计时）。 同时将需要灭菌使用的培养皿、试管、三角瓶等和所用器械（接种环、镊子等）等一块灭菌。

2. 倒平板，倒斜面。

灭菌后。待高压锅压力与大气压相同时，打开锅盖，将有培养基的三角瓶、试管、培养皿等放在灭菌后的超净工作台上。

超净工作台操作：打超净工作台的紫外

毕业论文

课 题 名 称 枯草芽孢杆菌培养基的优化研究

2014年5月18日

邵阳学院2014届毕业设计（论文）

目 录

摘要 ..................................................................................................................... Ⅰ Abstract ············································································································ Ⅱ 1 前 言 ············································································································· 1 2 材料与方法 ························································································