糖基化血红蛋白检测是检查什么

糖化血红蛋白

糖化血红蛋白（GHb）是血液葡萄糖通过非酶作用，经细胞膜与红细胞内血红蛋白-链颉氨酸结合形成的产物，其合成速率与红细胞所处环境中糖的浓度成正比。糖化血红蛋白的形成是不可逆的，其浓度与红细胞寿命（平均120天）和该时期内血糖的平均浓度有关，不受每天血浆葡萄糖浓度大小波动而变化，也不受运动或食物的影响，因此糖化血红蛋白是反映过去6~8周的平均血糖浓度，这可为评估血糖的控制情况提供可靠的实验室指标。通常所说的HbAlc为Hb的色谱分离中的一个成分，并非为一个特指物质，只有与葡萄糖相结合的Hb才被称为Glyco-sylatedHemoglobin（GHb），而现在临床上把HbAlc和GHb常视为同义词。

中文名 本 质

糖化血红蛋白

血红蛋白与血糖结合的产物

反应类型 不可逆反应

英文代号 HbA1c 领 域 反 应

生物学

患者近8～12周的血糖控制情况

目 录

?

1基本简介 2研究历史 3基本内容 4区别血糖 5检测方法 6操作过程 7监测意义 8控制标准 9结果解释 10注意事项 11临床意义 12标准检测 1基本简介 编辑

人体血液中红细胞内的血红蛋白与血糖结合的产物是糖化血红蛋白，血糖和血红蛋白的结合生

糖化血红蛋白是金标准

反映血糖的指标有多种，如直接反映血糖水平的空腹血糖、餐后血糖和糖化血红蛋白、糖化血清蛋白，间接反映血糖水平的尿糖等。虽然这些指标都能反映血糖水平，但临床意义还是有所不同的。

进餐使血糖波动

通过空腹血糖，我们能了解患者血糖控制的一般状况。空腹血糖高，意味着患者基础胰岛素分泌能力差。餐后血糖高，则往往提示分泌胰岛素的储备能力差或存在胰岛素抵抗。除了接受胰岛素治疗的患者以外，餐后血糖控制满意，患者的空腹血糖大多是满意的。而空腹血糖控制满意的患者，餐后血糖却未必满意。

这是因为，进餐是一种负荷，保存有一定胰岛素分泌能力的患者，在基础状态下，由于一夜不进食，空腹血糖是正常的。但是，只要一进食，胰岛素的作用就显得不够，表现出餐后高血糖。进餐的作用就如同上楼和负重。一个人平地行走不觉得累，但上楼就不行了，负重就更吃力了。

糖化血红蛋白反映近两三个月的血糖水平

糖化血红蛋白则能更全面地反映糖尿病患者的血糖控制情况。人体血液中红细胞内的血红蛋白容易与血糖结合，结合的产物就是糖化血红蛋白。这种结合基本上是一个不可逆的过程，一旦结合就难以解离。红细胞的生命周期为120天，只有等到红细胞衰亡，这种结合才会终止。当然，红细胞不断生存，也不断死亡。所以，临床

糖化血红蛋白检测的SOP

预期用途

适用于体外定量检测人手指末梢血、静脉全血样本中的糖化血红蛋白的浓度。 检验原理

糖化血红蛋白检测试剂盒是硼酸亲和色谱层析法。试剂盒由层析器、R1试剂、R2试剂组成。R1试剂包括专门裂解红细胞和沉淀血红蛋白及一种结合糖化血红蛋白的蓝色硼酸共轭物。当血液加至R1试剂中时，红细胞裂解，并且所有的血红蛋白沉淀，硼酸共轭物与糖化血红蛋白的顺式二醇配合物相结合。

一定量的反应混合物加入到层析器，所有沉淀的血红蛋白与糖化血红蛋白结合或未结合的硼酸共轭物残留到层析器膜上。任何未结合的硼化物通过R2试剂移除。该沉淀通过使用分析仪分别检测蓝色（糖化血红蛋白）和红色（总血红蛋白）的颜色强度进行定量分析，从而测定血液样本中糖化血红蛋白的百分比。 样本要求：

加了抗凝剂（EDTA、肝素、柠檬酸钠）的样本可在2-8℃保存7天，不能用血红蛋白裂解的样本。不能冻融。 没有添加抗凝剂的手指末梢血和静脉全血样本采样后要立即检测。

检验方法

在检测之前所有的检测试剂应平衡至室温。分析仪内置定标曲线，测试前不需要定标。

A采集5ul的全血样本至R1试管中，混合均匀，至少反应2分钟，最多不能超过3分钟。

B待全血样本与R1反应完毕后，再次摇晃该试管

糖化血红蛋白检测的SOP

预期用途

适用于体外定量检测人手指末梢血、静脉全血样本中的糖化血红蛋白的浓度。 检验原理

糖化血红蛋白检测试剂盒是硼酸亲和色谱层析法。试剂盒由层析器、R1试剂、R2试剂组成。R1试剂包括专门裂解红细胞和沉淀血红蛋白及一种结合糖化血红蛋白的蓝色硼酸共轭物。当血液加至R1试剂中时，红细胞裂解，并且所有的血红蛋白沉淀，硼酸共轭物与糖化血红蛋白的顺式二醇配合物相结合。

一定量的反应混合物加入到层析器，所有沉淀的血红蛋白与糖化血红蛋白结合或未结合的硼酸共轭物残留到层析器膜上。任何未结合的硼化物通过R2试剂移除。该沉淀通过使用分析仪分别检测蓝色（糖化血红蛋白）和红色（总血红蛋白）的颜色强度进行定量分析，从而测定血液样本中糖化血红蛋白的百分比。 样本要求：

加了抗凝剂（EDTA、肝素、柠檬酸钠）的样本可在2-8℃保存7天，不能用血红蛋白裂解的样本。不能冻融。 没有添加抗凝剂的手指末梢血和静脉全血样本采样后要立即检测。

检验方法

在检测之前所有的检测试剂应平衡至室温。分析仪内置定标曲线，测试前不需要定标。

A采集5ul的全血样本至R1试管中，混合均匀，至少反应2分钟，最多不能超过3分钟。

B待全血样本与R1反应完毕后，再次摇晃该试管

糖化血红蛋白操作程序

一、检测方法

离子交换层析法 二、方法学原理

H50采用基于离子交换的高效液相色谱检测原理，测量血红蛋白色谱图，计算相关参数。基于高效离子交换的液相色谱检测原理，测量时先将含有各种血红蛋白的血液样本载入层析柱，在选定的低离子强度缓冲液及pH条件下，血液样本中的HbA1c几乎不带正电荷，首先被洗脱；血液样本中的HbA0带正电荷，用高离子强度的洗脱液最后洗脱出来，得到相应的血红蛋白层析谱，然后算出HbA1c峰值和总Hb的比值。 三、试剂品牌、包装规格、内含物

3.1试剂品牌：迈瑞 3.2试剂成分和规格

3.2.1：离子交换层析柱： 规格：1*1 3.2.2糖化血红蛋白溶血剂：磷酸缓冲液 规格：2L*3 3.2.3糖化血红蛋白洗脱液A：琥珀酸缓冲液 规格：900ml*4 3.2.4糖化血红蛋白洗脱液B：磷酸缓冲液 规格100ml*2 3.3储存温度：2℃—30℃ 3.4开瓶有效期：100day。 四、仪器品牌、型号

品牌型号：迈瑞H-50 五、

操作程序

5.1开机程序

5.1.1按主机

　　一、红细胞和血红蛋白的检验

　　红细胞的生成起源于从造血干细胞分化来的红系祖细胞(BFU-E和CFU-E)，在红细胞生成素(erythropoietin，EPO)的作用下，继续增殖和分化为形态学上可辨认的骨髓原红细胞，并启动红细胞内血红蛋白和血型抗原的合成。 红细胞的主要生理功能是作为呼吸载体从肺部携带氧输送至全身各组织，并将组织中的二氧化碳运送到肺而呼出体外。

　　红细胞的平均生存时间约为120天，因此成人体内每天约有1/120的红细胞因衰老而被破坏，同时又有相应数量的红细胞和血红蛋白生成以维持动态平衡，使循环血液中的红细胞和血红蛋白数量能保持相对恒定。

　　【参考值】

　　红细胞数 血红蛋白

　　成年男性(4.0～5.5)×1012/ L 120～160g/L

　　成年女性(3.5～5.0)× 1012/L 110～150g/L

　　新生儿(6.0～7.0)× 1012/L 170～200g/L

　　【临床意义】

　　(-)红细胞及血红蛋白增多 是指单位容积血液中红细胞数及血红蛋白量高于参考值高限。一般经多次检查成年男性红细胞>6.0×1012/L，血红蛋白>170g/L;成年女性红细

§5.3《血红蛋白的提取和分离》导学案

班级：高二（ ）班 姓名：

【学习目标】

1.概述凝胶色谱法、电泳法分离大分子的基本原理。 2.知道缓冲溶液的作用。

3.尝试对血液中血红蛋白进行提取和分离,体验从复杂体系中提取生物大分子的基础过程和方法。 4.掌握对样品的预处理、色谱柱制作及装填等操作,进行样品的加入和洗脱并最终分离出血红蛋白。

【自主学习】 一、基础知识

1.蛋白质的分离依据:

蛋白质特性的差异,如分子的形状和_____、所带_____的性质和多少、溶解度、_________和对其他分子的亲和力等。 2.凝胶色谱法:

(1)概念:也称做___________,是根据____________________分离蛋白质的有效方法。 (2)凝胶的特点形态: 微小的_________

组成:大多数由_____________构成 结构:内部有许多___________ (3)常用凝胶:_______和琼脂糖。 (4)分离原理。

①相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道,路程_____,移动速度_____,通过凝胶的时间_____。

②相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶_____移动,路

解析糖化血红蛋白测定专家共识（2014）

2015-01-28 14:29来源：中华糖尿病杂志作者：王冬环 字体大小 -|+

为适应 HbA1c 临床应用发展的需要，提高 HbA1c 的测定质量，卫生部临床检验中心等多家机构和医院的检验学与临床专家根据我国 HbA1c 检测现状、结合国内外相关理念共识和研究进展、经广泛征求意见制定了《糖化血红蛋白测定专家共识》(以下简称“共识”)。笔者从以下几个方面进行评析、解读，供相关同仁参考。 一、糖尿病首选的诊断指标

2011 年世界卫生组织推荐：在有条件的地区采用糖化血红蛋白 (HbA1c) 诊断糖尿病。HbA1c 达标是糖尿病血糖控制目标以及评价糖尿病治疗方案有效性的标准，是 20 世纪 90 年代中期开始在国际上逐步推广应用的一个指标。目前，在相当一部分国家和地区 HbA1c 是糖尿病首选诊断指标，我国新版 2 型糖尿病防治指南 (2013 年版) 建议：“暂不推荐在我国将 HbA1c 作为糖尿病诊断切点，但对于采用标准化检测方法，并有严格质量控制，正常参考值在 4.0%~6.0% 的医院，HbA1c≥6.5% 可作为诊断糖尿病的参考。”因此，保证 HbA1c 测定质量十分重要。

传统的血浆 (清

糖化血红蛋白测定专家共识（2014）

糖尿病是 21世纪全球范围的流行病，糖化血红蛋白（haemoglobin A1c，HbA1c）达标既是糖尿病患者血糖控制目标，又是评价血糖管理治疗方案的有效指标。 HbA1c还是世界卫生组织（ WHO）和许多国家糖尿病学会推荐的糖尿病首选诊断指标。与传统的糖尿病诊断指标 ——血糖相比， HbA1c具有生物学变异性小、不易受血糖波动的影响、无需空腹或特定时间取血、分析前的不稳定性小等特点，是 20世纪 90年代中期开始在国际上逐步推广应用的一个指标。

为提高国内HbA1c测定质量，适应临床应用的需要，更科学、合理、有效地运用HbA1c并发挥其作用，有必要在充分参考和吸收国际理念、共识以及经验的基础上，根据国内HbA1c检测现状，制定符合我国国情的 HbA1c检测共识。卫生部临床检验中心、北京大学人民医院和国家食品药品监督管理总局北京医疗器械检验所牵头组织专家共同起草《糖化血红蛋白测定专家共识》。本共识在制定过程中，通过多种方式广泛征求临床糖尿病学专家、检验医学工作者以及各类、各级医疗机构相关医务工作者意见后，几经讨论、修改，在此呈现给大家以供参考。

鉴于本共识是参考目前国内、外大量相关研究并根据我国

糖基化对膜蛋白功能影响常常是很重要的，对特异的生物学功能起介导作用:1，对细胞具有保护、稳定、组织及屏障等多方面作用；

2，可作为外源性受体的特异性配体，某些糖连可作为各种病毒、细菌及寄生物的特异受体； 3，糖连也可作为内源性受体的特异性配体，参与介导清除、周转及胞内穿行作用；

4，最后要说的正是我所关心的：在受精和发育生物学中，糖连在受精过程中起着重要的作用，这方面的证据有：在小鼠卵透明带糖蛋白ZP3上的O－聚糖参与精卵结合。 活细胞中去糖基化的方法： 1，衣霉素在体内阻断N－连糖，

2，将内切神经氨酸酶注入发育中的视网膜提示了多唾液酸的特异性作用－－将高纯度酶注入细胞内＋恰当的对照

3，将糖基修饰酶的cDNA在活细胞或动物中表达 4，在培养环境中加入凝集素或抗体把特异的聚糖封闭掉

定点突变。一般蛋白质的突糖基化位点是一定的，各个物种相对比较保守，这个很容易就能分析出来，克隆到这个基因之后就可以使用引物突变等方法使糖基化位点发生定点突变，然后转入载体进行表达就可以得到去糖基化的蛋白。

蛋白质的修饰与加工包括糖基化、羟基化、酰基化、二硫键形成等，其中最主要的是糖基化，几乎所有内质网上合成的蛋白质最终被糖基化。

糖基化的作用是：①使蛋白质