量子点法和胶体金法

量子点与胶体金的性能比较

1 量子点的概念

理论分析表明，当半导体材料从体相逐渐减小至一定临界尺寸后，材料的特征尺寸在三个维度上都可与电子的德布罗意波长或电子平均自由程相比拟或更小时，电子在材料中的运动受到了三维限制，也就是说，电子的能量在三个维度上都是量子化的，称这种在三个维度上都受到限制的材料为量子点（quantum dots，QDs）。

量子点又称为半导体纳米晶体（nanocrystals，NCs）或半导体纳米粒子（nanoparticles，NPs），是一种由Ⅱ-Ⅵ（CdSe，CdTe，CdS，ZnTe，ZnO）、Ⅲ-Ⅴ族（InAs、GaSb）和Ⅳ族（Si、Ge）元素组成的纳米颗粒。目前研究较多的主要是CdS，CdSe，CdTe等，因为他们具有宽带隙而表现出优异的荧光特性。 2 量子点的光学性质

当半导体纳米粒子的尺寸与其激子半径（exciton radius 约5-10nm）相近时，由于电子波函数的量子限域效应(quantunm confinement effect),半导体纳米粒子能带的有效带隙（hand gap）随粒子半径减小而增加，导致吸收光谱和荧光光谱蓝移。其光谱性质主要取决于其半径大小，通过改变粒子的大小可获得从UV到近红

上海师范大学

硕士学位论文

胶体金免疫层析法对AFP、CEA和FN的快速检测

姓名：韩继美

申请学位级别：硕士

专业：物理化学

指导教师：朱龙章

20090401

上海师范大学硕士学位论文摘要论文题目：胶体金免疫层析法对ＡＦＰ、ＣＥＡ和ＦＮ的快速检测

学科专业：物理化学

学位申请人：韩继美

指导老师：朱龙章

摘要

２０世纪８０年代，纳米科技在多学科交叉的基础上发展成为一门新兴学科，近年来，纳米技术不断向生命科学和医学领域渗透，利用纳米生物技术研究和解决其中的重大问题，推动纳米生物及相关技术的发展，正成为当前一个重要的前沿理论，其中纳米免疫技术在生命科学和医学领域中的应用更是倍受关注。纳米胶体金免疫层析方法（Ｇｏｌｄｉｍｍｕｎｏｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｓｓａｙ，ＧＩＣＡ）是２０世纪９０年代兴起的一种将胶体金免疫技术和色谱层析技术相结合的固相膜免疫分析方法。本文主要研究了胶体金免疫层析技术在检测甲胎蛋白、癌胚抗原和纤维连接蛋白等肿瘤标志物方面的应用。

（１）采用经典的Ｆｒｅｎｓ方法，用１％的柠檬酸三钠溶液还原氯金酸

溶液制备了２０ｎｍ、４０ｎｍ、７０ｒｉｍ－－－－种不同粒径的胶体金，实验结果表明２０ｎｍ、４０ｎｍ的胶体金比较适合做免疫层析实验。所制备的２０ｎｍ的胶体金，

包埋后免疫胶体金标记技术

1. 试剂

固定液：0.1M二钾砷酸鈉缓冲液pH7.4（4%多聚甲醛+0.1%戊二醛+4%蔗糖） 洗涤液：0.1M二钾砷酸鈉缓冲液pH7.4（4%蔗糖）

醛基灭活液：0.1M二钾砷酸鈉缓冲液pH7.4（4%蔗糖+0.1M甘氨酸） 脱水剂：甲醇（ddH2O稀释成30%，50%，70%，80%，90%，95%） 包埋剂：K4M (2.7g交联剂A+17.3单体B+0.1g引发剂C)

标记封闭液：0.01M磷酸盐缓冲液pH7.4(1%BSA+0.05%TritonX-100+0.05%Tween 20) 标记洗涤液：0.01M磷酸盐缓冲液pH7.4

抗体稀释液：0.01M磷酸盐缓冲液pH7.4(1%BSA+0.05%Tween 20)

染色液：醋酸铀（3-4g醋酸双氧铀+100ml50%甲醇）；柠檬酸铅pH12（1.33g硝酸铅+1.76g柠檬酸鈉+30mlddH2O）

2. 主要仪器：镍网（喷有方华膜和碳膜）、镊子、Parafilm、自制小环、冰箱（4℃至-35℃）、紫外聚合箱、培养皿、透射电镜、离子溅射仪、超薄切片机、恒温箱（28℃） 0.2二钾砷酸鈉缓冲液母液pH

标准化操作规程 临检室 鄱阳湖第二医院检验科

结核分枝杆菌抗体检测 (胶体金法) 规程操作

1、检验目的

本试剂盒可定性检测人血清中结构分枝杆菌抗体，用于临床结构病的辅助诊断。 2、检验原理

本试剂盒利用斑点免疫胶体金渗滤技术（DIGFA），将结核分枝杆菌特异性膜蛋白抗原分离纯化，点样并固化在硝酸纤维素膜上，膜上TB抗原捕获人血清样品中结核分枝杆菌抗体，被捕获的结核IgG抗体可用葡萄球菌A蛋白（SPA）胶体金缀合物标呈色（SPA能与IgG特异性结合），形成红色斑点，根据是否出现红色斑点即可判断阴、阳结果从而判断是否存在结核分枝杆菌抗体。 3、样本要求

必须使用新鲜血清标本，血浆标本必须用玻璃棒剥离纤维蛋白，保证血清无混浊沉淀。 4、试剂

4.1试剂名称：结核分枝杆菌抗体诊断试剂盒（胶体金法） 4.2生产厂家：上海奥普生物医药有限公司 4.3包装规格： 20人份/盒

4.4贮存条件及有效期：2-8℃干燥处保存，有效期12个月。 5、检验方法：

5.1在反应板的反应孔中间，加入2滴封闭液，等待薄膜吸入； 5.2 取40μl新鲜的血清标本，加入反应孔中间，等待薄膜吸入； 5.3 在反应孔中间加

免疫胶体金技术常见影响因素分析

自胶体金作为特殊标记物进行研究以来,建立的各种免疫胶体金技术以其特异性强、灵敏度高、操作简捷等特点,在医学、农牧业、环境及食品检测等领域被广泛应用。免疫胶体金技术的反应过程是一个由金颗粒、抗原与抗体动态结合的反应过程,在这个过程中每个环节的好坏都直接影响试验的成败。而试验过程中每个环节又受到很多因素的影响和制约,下面将影响免疫胶体金技术的因素作一分析,为成功制备胶体金检测产品提供参考。 1耗材的选择

1.1不同型号膜的筛选。硝酸纤维素膜的型号在试验中至关重要,作为反应载体影响到整个试验的成败。不同的生产厂家生产硝酸纤维素膜时使用的聚合物和表面活性剂的来源、类型和数量均大不相同,对生产出的膜的性能产生较大影响——膜的孔径和分布结构不同。膜孔径减小,膜的实际可用表面积递增,膜结合蛋白的量也递增;膜孔径越小,层析速度也越慢,金标复合物通过T线的时间就越长,反应也就越充分;因此膜孔径越小灵敏度越高,但是同时也减慢了跑板速度,增加了非特异性结合的机会,也就是假阳性越高。用于金标免疫快速试验的膜多为硝酸纤维素膜或硝酸纤维素/醋酸纤维素混合膜,不同的包被蛋白对膜有特定要求,试验者应根据蛋白质的性质选择适合孔径大小和分布结

丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒（胶体金法）

【实验原理】

本样品采用胶体金色免疫层析技术，应用间接法原理定性检测人血清（浆）中HCV抗体。在玻璃纤维膜上预包被金标小鼠抗人lgG抗体（anti-lgG Ab），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被重组丙肝混合抗原（Core、NS3、NS4、NS5，源自大肠杆菌）和人lgG抗体（丙种球蛋白）。检测阳性样本时，血清样本中HCV-Ab与胶体金标记鼠抗人lgG抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的抗原结合形成“Au-anti-lgG Ab-HCV Ab-HCV Ag”夹心物而凝聚显色，游离金标鼠抗人lgG抗体则在对照线处与人lgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色，15分钟内观察结果即可。

【主要组成成分】

1、 HCV胶体金试纸条/试卡 2、 说明书 3、 样本稀释液 4、 塑料滴管

【样本要求】

1、 采集静脉血样本必须在无菌条件下操作，并避免样品溶血。

2、 如果血清和血浆样品收集后7天内检测,样品须放在0-4℃保存；大于7天必须-20℃一下 冷冻保存。

3、 临床常用抗凝剂（EDTA、肝素、枸橼酸钠）不影响实验结果。

4、 溶血、粘稠及高指标本不适于本试剂。含特殊

标准操作程序 文件编号：BALAB-MYSG-065 编制人: 发放范围：临检实验室 日期: 生效日期: 审核者： 批准人： 文件年度审核 审核者： 日期： 审核者： 日期： 审核者： 日期： 审核者： 日期： 审核者： 日期： 审核者： 日期： 审核者： 日期： 审核者： 日期： 版本:2.0 版 页码： 1 of 1 胶体金法检测抗环瓜氨酸肽（CCP）抗体标准操作程序

1. 检测原理

采用胶体金免疫层析技术，以间接法检测血清中的自身抗体，其原理以硝酸纤维素膜作为固相载体，分别在检测区（T）和质控区（C）划线包被CCP抗原和质控物。测试时，样本滴入加样孔后，血清中的IgG与包被在聚酯膜上的胶体金标记的抗体结合，结合物随之在毛细效应下横向层析。当血清中含有特异性抗CCP抗体时，泳动到T线时被CCP抗原捕获，出现阳性条带，有利标记物继续向前移动与结合标记物自动分离，泳动至质控区被捕获形成阳性质控线（C），判为阳性结果。若样本中不含抗CCP抗体，则检测线（T）线处不发生特异性结合反应，胶体金标记物继续层析到吸水垫上，因此仅在质控线（C）上出现阳性条带，判为阴性结果。作为质控线（C），无论T线是否出现条带，若C线未出现条带，则判断试纸条无效

Part I S-1 NINATE 411 S-2 Pluorinic F68 S-3 Zonyl FSN 100 S-4 Aerosol OT 100% S-5 GEROPON T-77 S-6 BIO-TERGE AS-40 S-7 STANDAPOLES-1 S-8 Benzalkonium chloride S-9 Tetronic 1307

Part II Surfactant Toolkit Contents: (subject to change without notice-see insert with each kit) 1. Amine alkylbenzene sulfonate, Trade Name: NINATE 411, Class A, MW: 385, Function: Solvent compatible,good enulsifier.

2. Poly(oxyethylene-co-oxypropylene) block polymer: Trade Name:Pluorinic (tm) F68, Class N, MW 8400, Function: excellent solubili

货号产名称品规格

GC--UL10 伦特克罗速快测检卡5 卡0盒/ G-LCP-0 1伦克特罗速检快卡测4 0卡/盒G -LCF-0 克伦特罗快1速测卡 检04/盒卡 GC--LB0 1克伦特罗快检速卡 测10卡0/袋，0卡2/盒 -GLCU04-克 伦特罗快检速测 50卡卡/ G盒CL-U0-7克 伦特罗快速检卡 50测/卡 G-R盒ACU-01莱克 巴多快胺速检卡测(型)Ⅰ20卡 盒 /-GRA-U05C 克莱多胺巴速快检测卡2 0卡盒/G -RACU02-莱 多巴克胺快检速卡测 0卡/盒、205/盒、卡10卡/袋0G -AR-CP01莱 多巴胺快克检速测卡 0卡2/、10盒0卡袋/ -RGC-F0A 莱1克多胺快巴检速测卡 4卡0/盒 -SALG-0U5 丁沙醇快胺速测检卡50 卡盒 G-/AL-SU0 沙丁胺醇2速检快卡测5 卡/0 G-盒AL-SP04沙丁胺 醇快速测卡检40 卡/盒G- SL-F0A 沙丁胺1醇快检测卡 40卡/盒速 GS-AL-01B沙丁 胺醇速检测卡 快50/卡盒G- CR-U0 克伦1特罗莱-多巴克双联卡 胺02/卡 盒G-R-US2 莱克多0巴胺-丁沙胺醇双卡 联02卡盒/ -GSCU-1 0伦特克罗沙-胺丁

胶体金快速诊断技术在兽医临床诊断中的应用

胶体金快速诊断技术在兽医临床诊断中的应用

杨雪林*1 张福官1 杨卫华2 周海南3 沈政会1

23

（1江苏省吴江市震泽动物防疫站，江苏吴江215231；江苏省吴江市平望动物防疫站；江苏省吴江市横扇动物防疫站）

摘 要：胶体金快速诊断技术不需要特殊设备，结果判断直观，越来越受到人们的重视，在生物医学领域特别是检验中得到广泛的应用。关键词：胶体金；快速诊断；免疫层析

中图分类号S851.32 文献标识码B 文章编号1007-7731（2010）02-036-002以膜为固相载体的胶体金快速诊断技术是20世纪80年代在酶联免疫吸附试验、乳胶凝集试验、单克隆抗体技术、胶体金免疫技术和新材料技术基础上发展起来的一项新型体外诊断技术。由于其快速、便捷、不需特殊设备、结果判断直观，近年来越来越受到人们的重视，其技术发展迅速，在生物医学领域特别是医学检验中得到了广泛应用。目前在兽医临床诊断中也研制了许多种检测试剂盒，其基本原理是：以微孔膜为固相载体，包被已知抗原或抗体，加入待测样本后，经微孔膜的渗滤作用或毛细管虹吸作用使标本中的抗体或抗原与膜上包被的抗原或抗体结合，再通过胶体金标记物与