CYP450酶的基因
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CYP450酶的
【细胞色素P450酶系与药物的代谢,李国昌,陈卫军,浦宇红】 【细胞色素P450的催化作用,张莉,李卫华】
【细胞色素P450 CYP2E1酶构型特征及其表达调控机制的研究进展,刘晨晖,乐江】 【中药对细胞色素P450调控作用的研究进展,钟育敏,吴文康】 【CYP450酶特性及其应用研究进展,《中国临床药理学与治疗学》2008年 第8期 | 李晓宇 刘皋林 上海交通大学附属第一人民医院临床药学室 上海200080】
【细胞色素P450与药物代谢的研究现状, 朱立勤; 娄建石】
【细胞色素P450酶系在药物代谢中的作用, 朱大岭; 韩维娜; 张荣】 【细胞色素P450酶系对药物生物转化的作用, 刘萍; 边强】
【苯巴比妥对鸡肝微粒体CYP450活性的影响, 杨海峰; 江善祥】 【恩诺沙星对小鼠肝微粒体细胞色素P450酶系的影响, 卢丽红】
【苯巴比妥和地塞米松对鸡细胞色素P450的诱导作用, 杨海峰; 张玲玲; 覃少华; 江善祥】
【细胞色素P450表达的诱导机制及其筛选方法的研究进展, 王青秀】 【细胞色素P450酶与合理用药, 吴伯镛】
【药物代谢中的肝细胞色素P450, 骆文香; 张银娣】 【细胞色素P450酶系与药物代谢的相互作用,
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【药物代谢中的肝细胞色素P450, 骆文香; 张银娣】 【细胞色素P450酶系与药物代谢的相互作用,
CYP17基因多态性等位基因特异性PCR检测方法的建立
目的 建立快速准确检测CYP17基因单核苷酸多态性的新方法 .方法 用等位基因特异PCR(AS-PCR)方法 对53例外周血标本CYP17基因单核苷酸多态性位点rs743572进行基因分型.结果 AS-PCR测定结果 与聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性方法 (PCR-RFLP)的测定结果 一致.结论 采用AS-PCR检测CYP17基因多态性准确、快速.
现代中西医结合杂志 M dr Junl f n ga dTa ioa C ieeadWet nM dc e 0 Fb 2 ( ) oen 0ra o t rt rdt nl h s n s r e in 1 e, 0 4 Ie e i n e i 2 1
.8 4 5.
C 1 YP 7基因多态性等位基因特异性 P CR检测方法的建立陈巧云,李皓,红关,加燕徐冷(苏大学附属人民医院,苏镇江 2 2 0 )江江 1 0 1[要]目的建立快速准确检测 C P 7基因单核苷酸多态性的新方法。方法用等位基因特异 P R( S—摘 Y I C A P R)法对 5 C方 3例外周血标本 C P 7基因单核苷酸多态性位点 r 4 5 2进行基因分型。结果 Y 1 s 37 7 A S—P R测定
细胞色素P450亚酶CYP2D6AMMC活性荧光定量检测试剂盒
细胞色素P450亚酶CYP2D6(AMMC)活性荧光定量检测试剂盒产品说明书
(中文版)
主要用途
细胞色素P450亚酶CYP2D6(AMMC)活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过AMMC去甲基化酶反应系统中AMMC转化为AMHC后荧光峰值的变化,即采用荧光法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞或组织裂解萃取液样品(动物、人体)或纯化微粒体样品细胞色素P450亚酶2D6的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。
技术背景
细胞色素P450酶是肝细胞微粒体复合功能单加氧化酶系统的总称。其分成五十多个亚酶:CYP1至CYP51。作用在于体内外源化合物(xenobiotics),包括药物、致癌剂、化学污染物的氧化代谢,即单加氧化作用(monooxygenation)和羟化作用(hydroxylation)。AMMC羟基化酶(AMMC 7-hydroxylase)的活性是细胞色素P450亚酶2D6的诊断标记,其基于AMMC羟基化酶选择性催化细胞色素P450亚酶2D6的活性。人体细胞色素P450亚酶2D6(CYP2D6;EC1.14.14.1),主要表达在肝、肾、胎盘、脑
翡翠贻贝肾CYP4基因表达受多氯联苯影响的研究
[目的]了解多氯联苯(PCB)对翡翠贻贝肾中细胞色素P450第4亚族(CYP4)基因表达的影响。[方法]从野生翡翠贻贝cDNA中扩增得到了翡翠贻贝CYP4基因和β-actin基因的部分cDNA序列,并根据所得序列设计定量PCR引物,以β-actin为内参基因,以SYBR Green I为荧光染料,利用荧光定量PCR对经PCB暴露处理后的翡翠贻贝肾中CYP4基因表达水平进行定量测定。[结果]PCB暴露处理对翡翠贻贝肾中CYP4
维普资讯
安徽农业科学,ora A hi Junlf nu o
.c.0 83 (2:48—92 Si20,62 )9 1 42
责任编辑
张杨林
责任校对
卢瑶
翡翠贻贝肾 C P Y 4基因表达受多氯联苯影响的研究周驰1, 2李纯 ,厚张为民,晓 贾平(. 1中国水产科学研究院南海水产研究所,广东广州 500; . 1302上海水产大学,上海 20 9; . 000 3中山大学水生经济动物研究所,广东广州 50 7 ) 1 5 2
摘要
[目的]了解多氯联苯(c ) P B对翡翠贻贝肾中细胞色素 P5 4 0第4亚族(口 )基因表达的影响。[方法]从野生翡翠贻贝e N D A中扩
增得到了翡翠贻贝 C P基因和 ̄ c n因的部分 e N
基因工程中常用的三种工具酶
一、限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)
1.定义:凡能识别和切割双链DNA分子内特定核苷酸序列的酶,也称为限制酶(restriction enzyme,RE)。
2.类型:来自原核生物,有三种类型。
Ⅰ型:兼具甲基化修饰和ATP参与的核酸内切酶活性,随机切割。
Ⅱ型:大多能特异识别4~6个核苷酸序列(回文结构),最大识别序列为8个核苷酸,如SfiI、NotI;但有近10种Ⅱ型限制酶的识别序列为非回文结构,如SfaNI、MnlI等,Ⅱ型限制酶均可作为基因工程的工具酶。另有一些来源不同的限制酶的识别位点是相同的核苷酸序列,将这类酶特称为同工异源酶(isoschizomers)或同裂酶。同工异源酶切割产生相同的末端;有一些同工异源酶对于切割位点上的甲基化碱基的敏感性有所差别,故可用来研究DNA甲基化作用,如SmaI和XmaI;HpaII和MspI;MboI和Sau3AI是成对的同工异源酶;其中HpaII和MspI是一对同工异源酶,其识别位点是CCGG。与同工异源酶对应的一类限制酶,它们虽然来源各异,识别序列也各不相同,但都产生出相同的粘性末端,称为同尾酶(isocaudamers)。常用的限制酶Ba
基因工程中常用的酶及其功能分析
基因工程中常用的酶及其功能分析
[摘 要] 酶是活细胞所产生的一种具有特殊催化功能的蛋白质,在生物工程中应用非常广泛,如食品、医药、废水处理等方面.基因工程中常用的酶主要包括核酸酶、连接酶、聚合酶和修饰酶,分别发挥着不同的功能.
[关键词] 基因工程;基因克隆;DNA.
外源基因通过体外重组后需要导入受体细胞内,在受体细胞内复制、转录、翻译并表达的操作过程称为基因工程(Gene Engineering)[1].其中基因克隆是不可缺少的步骤.在基因克隆过程中,当目的DNA样品制备好之后,需要对DNA分子进行进一步的处理,包括对目的基因片段的取得、连接、转化等操作.而这些操作过程必须借助酶(enzyme)的重要作用才可完成.由于研究方向及目的不同,现在对酶的分类方法也各不相同.结合实验,从基因工程的角度可将酶分为如下几类:①核酸酶,②连接酶,③聚合酶,④修饰酶. 1 核酸酶
核酸酶(nuclease)是一类以核酸为底物的水解酶,它可以打断核酸链中的磷酸二酯键,因而在基因工程中应用非常广泛.按底物专一性可以将核酸酶分为核糖核酸酶(RNase)与脱氧核糖核酸酶(DNase),非专一性核酸酶等.其中RNase降解RNA分子,DNase降解DNA分子.但
双荧光素酶报告基因分析promega
双荧光素酶报告基因分析
1. 介绍
荧光素酶报告基因表达的转录调控常被用来研究培养细胞的生物学特性。荧光素酶是理想的报告基因,因为哺乳动物细胞中不含内源性荧光素酶,一旦转录完成立刻就生成功能性的荧光素酶。
Dual-Luciferase?双荧光素酶报告基因检测系统中含有在同一细胞中同时表达的两种荧光素酶。通常,报告基因实验中往往会受到各种实验条件的影响,共转染的“对照”报告基因会作为内对照,为试验提供一基准线。实验报告基因经过内参照的处理可以减小细胞活性和转染效率对实验的影响,因此双报告系统减少了外部干扰,使得实验数据更可信。实验中报告基因和对照基因的酶没有种源同源性,萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶对应不同的反应底物,反应中没有任何的交叉干扰。
萤火虫荧光素酶底物和海肾荧光素酶底物分别与检测试剂反应可以使灵敏度最大化。由于超强的光信号和超高的信噪比,本系统被广泛用于制药和生物技术产业中。双荧光素酶报告基因检测系统适配于各种培养哺乳细胞的培养基,如1640,MEM,DMEM,F12等。这些试剂与被动裂解液所附带的试剂盒,可以从Promega试剂盒中分开,单独使用。
具有超高灵敏度和超宽线性范围的Veritas?微孔板发光检测仪特别适合DLR 报告
乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆与表达
?类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶?类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性
乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA的克隆与表达
周文婷1,崔羽,王晓燕2,张永红,李世荣,李景鹏*
(东北农业大学生命科学与生物技术中心,哈尔滨 1500301;
哈尔滨医科大学附属第四医院检验科,哈尔滨 1500012)
摘 要: 类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性测定。经检测重组ADH1,ADH2和ADH3的酶活力分别为1.8± 0.3U/mg, 0.9±0.2U/mg和1.4±0.2U/mg。
关键词:乙醇脱氢酶(ADH);基因克隆,原核表达;酶活力检测1
酒是重要的
乙醇脱氢酶Ⅰ类基因全长cDNA的克隆与表达
?类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶?类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性
乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA的克隆与表达
周文婷1,崔羽,王晓燕2,张永红,李世荣,李景鹏*
(东北农业大学生命科学与生物技术中心,哈尔滨 1500301;
哈尔滨医科大学附属第四医院检验科,哈尔滨 1500012)
摘 要: 类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性测定。经检测重组ADH1,ADH2和ADH3的酶活力分别为1.8± 0.3U/mg, 0.9±0.2U/mg和1.4±0.2U/mg。
关键词:乙醇脱氢酶(ADH);基因克隆,原核表达;酶活力检测1
酒是重要的