氨基酸测定方法国标

4.1 光度分析法[5] [6]

β-氨基丙酸和茚三酮溶液在弱酸的条件下可以生成蓝紫色物质[7]，其颜色深浅主要与β-氨基丙酸的浓度有关。因此可利用此显色反应采用比色法定量测量β-氨基丙酸。我在实验中发现很多因素如浓度、pH值、反应温度、以及反应时间等对此显色反应有很大的影响。如忽视这些因素会使实验产生很大的误差。就此显色反应的最佳条件我做了初步的探究。 4.1.1试剂的配制：

缓冲液的配制：配制pH= 6.00的NaAc－HAc缓冲溶液 β-氨基丙酸标准溶液的配制：

用电子天平准确称取1.020 gβ-氨基丙酸(生化纯)，溶于250ml pH=6.00缓冲溶液中，得到C = 4.080 g/L标准溶液。

茚三酮试剂的配制：称取0.5g茚三酮溶于100ml蒸馏水中，得到5g/L的茚三酮水溶液。

4.1.2标准曲线的确定

分别准确移取0.30ml、0.40ml、0.50ml、0.60ml、0.70ml、0.80ml、0.90ml、1.00ml标准液于8个比色管中，用pH=6.00的缓冲溶液稀释到5.00ml再加入1ml茚三酮水溶液充分摇匀，将其放在沸水浴中加热10min。冷却到室温，用7230型分光光度计在569nm下测其吸光度。以吸光

过程生化成分的变化

。

试验的初步结果看出

糖类物质中单糖是随氧化过程逐渐增加的分钟含量最高,。

,

淀粉和双糖却是不断儿茶素,、

减少

,

果胶指数是氧化

多酚类物质中,,

,

茶多酚总量。

、

黄酮类物质

都是随氧化时间延长而递减的化产物来看茶黄素氧化步结果。

与此相反,

非水溶性茶多酚却是不断增加的

从茶多酚的氧

一

分钟已达高峰

茶红素却不断增加分钟比较合适,

根据上述多种成份的变化

以及从茶黄素与茶红素的比例来看

酶性氧化

这是结合感观审评得出的初

茶叶中游离氨基酸的测定中国农科院茶叶研究所生理生化研究室近廿年来,氨基酸的分析方法有了很大的进展,

不仅操作精、

,

而且以全程自动化闻名

。

本文研究了茶叶中氨基酸的纸上层析分离法种氨基酸的关系,

,

利用单向层析

双向层析法从茶叶中分离出

,

并且进行了定性及定量工作。

,

对研究茶叶中氨基酸的组成与含量及其和茶叶品质

是一件必不可少的工作

方法如下取样品,,

一

,

用“

的帕甲酸水

肠乙醇提取

,

然后将过滤液蒸干加水以正丁醇,

进行点样肠乙醇

。

以正丁醇,冰醋酸水,

为展谱剂进行单向层析。

帕氨水。

二

酸相和正丁醇

作展谱剂进行双向层析

用苟三酮作为显色

剂

以纯品作对照确定各种氨基酸的位置进行定量

茶咖啡碱柱层分离测定法中国农科院茶叶研究所生理生化室茶样与氧化镁共热进行予热处理游离出咖

HPLC 的使用之一

氨基酸分析测定及衍生化方法

2

吕莹果1，，张　晖2，孟祥勇2，陈能飞3

（1. 河南工业大学粮油食品学院，　河南郑州　450001；2. 江南大学食品学院，　江苏无锡　214122；

3. 广州江大和风香精香料有限公司，　广东广州　510660）

摘　要：该文综述氨基酸分析方法进展和分类，并对柱前衍生化RP–HPLC分析氨基酸方法及常

用衍生化方法进行比较和探讨。关键词：氨基酸；衍生化；RP–HPLC

Methods for amino acid analysis and derivatization

2

LV Ying-guo1，，ZHANG Hui2，MENG Xiang-yong2，CHEN Neng-fei3

（1. College of Grain Oil and Food，Henan University of Technology，Zhengzhou 450001，China；2. School of Food Science and Technology，Southern Yangtze University，Wuxi 214122，China；

3. Guangzhou ADD Co.， Ltd.， Guangzhou 51

蛋白质的酶促降解及氨基酸代谢

一.选择题

1．生物体内大多数氨基酸脱去氨基生成α-酮酸是通过下面作用完成的。( ) A.氧化脱氨基 B.还原脱氨基 C.联合脱氨基 D.转氨基 2．下列氨基酸中( )可以通过转氨作用生成α－酮戊二酸。 A.Glu B.Ala C.Asp D.Ser 3．转氨酶的辅酶是( )

A.TPP B.磷酸吡哆醛 C.生物素 D.核黄素 4．以下对L－谷氨酸脱氢酶的描述( )是错误的。 A.它催化的是氧化脱氨反应 B.它的辅酶是NAD或NADP

C.它和相应的转氨酶共同催化联合脱氨基作用 D.它在生物体内活力不强

5．鸟氨酸循环中，尿素生成的氨基来源有( )

A.鸟氨酸 B.精氨酸 C.天冬氨酸 D.瓜氨酸 6．磷酸吡哆醛可参与下面氨基酸的( )反应？

A.脱羧反应 B.消旋反应 C.氧化

烟叶中游离氨基酸总量的测定

一、原理 游氨基酸可与水合茚三酮反应，产生蓝紫色化合物。在一定范围内，颜色的深浅游离氨基酸含

量成正比，可用分光光度计，在570nm下测得蓝紫色溶液的消光值，根据标准曲线计算未知样品中游离氨基酸的含量。 二、实验材料、仪器和试剂

1. 材料 新鲜烟叶 2. 仪器

（1）研钵、漏斗、三角瓶、滤纸 （2）具塞刻度试管20ml

（3）刻度吸管（5ml、1ml、移液枪0.1ml） （4）沸水浴电炉 （5）分光光度计 3. 试剂

（1）10％乙酸

（2）水合茚三酮试剂：称取0.6g茚三酮加入15ml正丙醇溶解，再加入30ml正丁醇及60ml乙二醇，最后加入9mlpH4.5乙酸—乙酸钠缓冲液，混匀，贮于棕色瓶于冰箱内保存，10日内有效。 （3）乙酸—乙酸钠缓冲液（PH4.5）：称取54g乙酸钠(NaAc·3H2O)，加入蒸馏水加热至沸，冷却后加30ml冰乙酸，用蒸馏水定容至100ml。

（4）氨基酸标准液：称取80℃烘干的亮氨酸46.8mg，以10％异丙醇溶解，并定容至100ml，取此液5ml用蒸馏水稀释至50ml，即为每毫升含氮5ug的标准液。 （5）0.1％的抗坏血酸：50mg溶于50ml水中，现用现

蛋白质分解代谢

A型题：

1．生物体内氨基酸脱氨基的主要方式为： A．氧化脱氨基

B．还原脱氨基 C．直接脱氨基 D．转氨基 E．联合脱氨基

2．人体内氨的最主要代谢去路为： A．合成非必需氨基酸 B．合成必需氨基酸 C．合成NH4+随尿排出

D．合成尿素随尿排出 E．合成嘌呤、嘧啶、核苷酸等

3．转氨酶的辅酶组分含有：

A．泛酸 B．吡哆醛 C．尼克酸 D．核黄素 E．硫胺素

4．可经脱氨基作用直接生成α-酮戊二酸的氨基酸是：

A

非极性R基

Glycine Alanine Gly(G)

Ala(A)

Leucine Leu(L)

Methionine Met(M)

极性不带电荷R基

Serine Threonine Ser（S)

Thr(T)

Proline Asparagine Pro(P)

Asn(N)

Valine Val(V)

Isoleucine Ile(I)

Cysteine Cys(C)

Glutamine Gln(Q)

芳香R基

Phenylalanine Tyrosine Phe(F) Tyr(Y)

Tryptophan Trp(W)

带正电荷R基

Lysine

Arginine Lys (K)

Arg (R)

带负电荷R基

Histidine His (H)

Aspartic acid Asp (D)

Glutamic acid Glu (E)

蛋白质分解代谢

A型题：

1．生物体内氨基酸脱氨基的主要方式为： A．氧化脱氨基 B．还原脱氨基 C．直接脱氨基 D．转氨基 E．联合脱氨基

2．人体内氨的最主要代谢去路为： A．合成非必需氨基酸 B．合成必需氨基酸

+

C．合成NH4随尿排出 D．合成尿素随尿排出 E．合成嘌呤、嘧啶、核苷酸等

3．转氨酶的辅酶组分含有：

A．泛酸 B．吡哆醛 C．尼克酸 D．核黄素 E．硫胺素

4．可经脱氨基作用直接生成α-酮戊二酸的氨基酸是： A．谷氨酸

蛋白质分解代谢

A型题：

1．生物体内氨基酸脱氨基的主要方式为： A．氧化脱氨基

B．还原脱氨基 C．直接脱氨基 D．转氨基 E．联合脱氨基

2．人体内氨的最主要代谢去路为： A．合成非必需氨基酸 B．合成必需氨基酸 C．合成NH4+随尿排出

D．合成尿素随尿排出 E．合成嘌呤、嘧啶、核苷酸等

3．转氨酶的辅酶组分含有：

A．泛酸 B．吡哆醛 C．尼克酸 D．核黄素 E．硫胺素

4．可经脱氨基作用直接生成α-酮戊二酸的氨基酸是：

A

家禽营养

家禽理想蛋白质氨基酸模式

不同饲料蛋白质的营养价值变化很大，要使家禽有效地利用饲料，必须按照其营养生理需要供给蛋白质。国内外已有不少关于家禽的氨基酸模式，但各个氨基酸模式之间有很大的差异。本文综述了家禽理想蛋白质氨基酸模式研究方法和应用。

蛋白质是家禽日粮中最主要的营养物质之一，人们对家禽蛋白质、氨基酸需要的认识已经从经典的粗蛋白质和总氨基酸需要向可利用氨基酸需要、小肽营养及理想蛋白模式方向发展。

1 理想蛋白质及氨基酸模式

理想蛋白质体系完全是按照动物的维持和生产需要提供适量的各种必需氨基酸。尽管不同家禽对单个氨基酸绝对需要量的差异较大，但就某一阶段而言，各种氨基酸需要量相对于某一氨基酸（赖氨酸）的比例具有一定规律性。人们对理想氨基酸模式（ＩＡＡＰ）的研究是基于如下假设：对家禽而言，其ＩＡＡＰ相对恒定，受品种、性别、年龄等因素的 影响很小；随家禽的生长，改变的只是各种ＡＡ的绝对需要量，而相互比例基本保持不变。这种假设基本上是成立的。尹清强等（１９９５）对２３周龄罗曼蛋鸡的试验研究表明，试验前、后鸡活体组织的ＡＡ组成及模式几乎没有变化（见表１），这是理想蛋白质的最大优点。Baker（1993）认为，理想氨基酸模式与氨基酸需要量不同，它不受