黑曲霉产什么酶

新疆农业大学

《酶与酶工程》

目:

名: 院: 级: 号: 绩 专题讨论综述

黑曲霉纤维素酶酶学性质的研究及其分离纯化

2013 年4月

题姓学 班学成

黑曲霉纤维素酶酶学性质的研究及其分离纯化

摘要：

从我院保藏菌株中，分离纯化出一株较纯的产酶相对较高的菌株。通过在单因素实验基础上进行正交实验，对其液态产酶的发酵条件进行研究，结果显示：氮源为1%的NH4NO3，无机盐为1%的NaCl,表面活性剂为0.05%的tween-80，接种量为3.6%，水量为1:1.5，pH6.0,发酵温度28℃，复合碳源为麸皮：酵母粉：蛋白胨=4:1:1，装料量为75g(250ml三

万方资料

第27卷第3期2005年6月江西农业大学学报

ActaAgriculturaeUniversitatisJiangxiensis

Vol.27,No.3June,2005

文章编号:1000-2286(2005)03-0466-03

黑曲霉LH2446产纤维素酶液体

发酵条件的研究

汪世华

1,2

,胡开辉,黄碧芳,余文英,彭利民

2223

　　(1.福建农林大学生物农药与化学生物学教育部重点实验室,福建福州350002;2.福建农林大学生命科学院开放实验室,福建福州350002;3.武汉隆华生物股份有限公司技术中心,湖北武汉430000)

摘要:采用诱变后的黑曲霉LH2446液体发酵生产纤维素酶。确立了产酶最佳条件:5%稻草粉为碳源,1%的黄豆粉为氮源,培养基起始pH值为pH6.5,250mL三角瓶中装培养基75mL,培养时间为h,温度为30℃。在最适条件下产纤维素酶的最高产量为23600U/g。关键词:纤维素酶;液态发酵;产酶条件中图分类号:Q55　　文献标识码:A

StudiesonsforSubmergedFermentation

ofnigerLH2446toProduceCellulase

WANGShi-hua

2

1,2

,HUKai-hui

2

2

3

HU

实验四 黑曲霉发酵生产柠檬酸

【目的要求】

1. 掌握实验室菌种种子生产方法。

2. 掌握柠檬酸发酵原理及过程，掌握柠檬酸液体发酵及中间分析方法。 3. 熟悉并记录黑曲霉培养过程中培养基中基质的变化与产物的形成情况； 4. 掌握钙盐法提取柠檬酸的原理与方法。

【基本原理】

黑曲霉发酵生产柠檬酸实验中需要大量活化的孢子，其制备是采用麸皮培养基中保藏的黑曲霉孢子，在新的麸皮培养基上于适当的温度下活化并大量繁殖，从而产生大量活化孢子。

黑曲霉发酵法生产柠檬酸的代谢途径被认为是：黑曲霉生长繁殖时产生的淀粉酶、糖化酶首先将薯干粉或玉米粉中的淀粉转变为葡萄糖；葡萄糖经过酵解途径（EMP）转变为丙酮酸；丙酮酸氧化脱羧形成乙酰辅酶 A，然后在柠檬合成酶的作用下生成柠檬酸。黑曲霉在限制氮源和锰等金属离子条件下，同时在高浓度葡萄糖和充分供氧的条件下，TCA 循环中的酮戊二酸脱氢酶受阻遏，TCA 循环不能充分进行，使柠檬酸大量积累并排出菌体外。其理论反应式为： C6H12O6+1.5O2 → C6H8O7+2H2O

以薯干粉或玉米粉为原料的黑曲霉柠檬酸发酵液，除了含有大量柠檬酸外，还有大量的菌体，少量没有被黑曲霉利用的残糖、蛋白质、脂肪、胶体化合物以及无机盐

北京huagong大学

生命科学与技术学院生物工程系

课程设计

题目： 黑曲霉深层发酵法生产2000t/a食品工业用

糖化酶车间工艺设计

说明书 30 页 图纸 5 张

教研室主任

指导教师 lnc老师 学生 xxx

20xx年 6月 11日于北京

0

目录

目录……………………………………………………………………………………1 设计任务书……………………………………………………………………………5 1 工艺条件的确定和工艺流程说明…………………………………………………6 1.1概述 ……………………………………………………………………………6 1.1.1糖化酶 …………………………………………………………………… 6 1.1.2黑曲霉 …………………………………………………………………… 6 1.2 工艺原理……………………………………………………………………… 7 1.2.1 生化分离工程 ……………………………………………………………7 1.2.2 发酵原理 ………………………………………………………

目录

1前言 ................................................................................................................................ 2

1.1 葡萄糖酸钠概述 .............................................................................................. 2 1.2 葡萄糖酸钠的制备工艺 .................................................................................. 4 1.3 制备方法的比较 .............................................................................................. 6 1.4 葡萄糖酸钠的发展史 .......................................................

生物工程学报Chin J Biotech2009, March 25; 25(3): 381-387 7c2f7c7101f69e314332942c Chinese Journal of Biotechnology ISSN 1000-3061

cjb@7c2f7c7101f69e314332942c? 2009 Institute of Microbiology, CAS & CSM, All rights reserved

二步法黑曲霉脂肪酶基因lip A的全基因合成及其在毕赤酵母中的高效表达

杨江科, 严翔翔, 张正平, 江雪青, 闫云君

华中科技大学生命科学与技术学院分子生物物理教育部重点实验室, 武汉 430074

摘要:黑曲霉脂肪酶是重要的工业用酶, 在食品、制药等领域具有广泛的用途。获得黑曲霉脂肪酶高效表达的基因工

程菌是该脂肪酶规模化应用的前提。通过全基因合成对目的基因进行分子改造和人工组建是实现基因高效表达和体外

分子进化的有效手段。本研究主要针对一步法长片段基因合成中复杂结构的非特异性配对和过多的PCR引入碱基错配

等问题, 采用二步法(组装PCR和酶切-酶连)合成了黑曲霉脂肪酶基因lip A。首先在DNA2.0和Gene2Oli

微生物与转基因技术

摘 要 微生物目前已是生物技术领域主要的模式生物之一，微生物可以为转基因

技术提供工具酶、基因载体；微生物本身也常作为目的基因的受体细胞。通过转基因的方式，可以将人类所需要的基因转移到特定物种上，从而表达出人类想要的性状。本文综述了转基因微生物在食品、农业、医药以及环境保护、传统工业改造等领域研究与应用的国内外现状。在食品生产领域，转基目微生物主要用于食品用群制剂的生产，如凝乳酶．淀粉酶，蛋白酶等，转基因酵母也应用于啤酒的生产．在农业生产领域，转基因微生物主要用于微生物农药、微生物肥料和饲料酶制剂的生产．在医药生产领域，转基因微生物主要用于兽用和人用疫苗的生产，以及利用转基因镟生物生产某些药物。此外，转基因微生物在环境保护，传统工业的改造、印染业，以及新能薄开发等方面也有应用，本文也同样大致介绍了一些目前国内外关于微生物转基因方面的前沿研究。

关键词 微生物转基因，DNA重组技术，目的基因，基因载体

1 引 言

转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段[1]的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因，也可以是人工合成指定序列的基因片段。基因片段被转入特定生物中，与其本身的基因组进行重组，再

产а-淀粉酶的枯草杆菌的筛选

与产酶条件的研究

1 引 言

枯草芽孢杆菌（B.S）属于芽孢杆菌属，革兰氏阳性菌，无荚膜，需氧菌，可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚，是a-淀粉酶和中性蛋白酶的重要生产菌。

淀粉酶属于水解酶的一种，是淀粉水解的生物催化剂。按降解方式分为α-淀粉酶、β-淀粉酶、糖化酶、异淀粉酶和环糊精生成酶。α-淀粉酶以无规则的方式切断淀粉大分子内部的α-1，4糖甙键而使淀粉生成糊精、低聚糖等，因产物的末端葡萄糖残基中碳原子为α-构形，故称为α-淀粉酶。大多α-淀粉酶(个别品种除外)不能切断α-1，6糖甙键，也不能切断分支点附近的α-1，4糖甙键。目前，α-淀粉酶在我国产量较大，广泛应用于食品、酿造、制药和纺织等领域。用α-淀粉酶水解淀粉时，要注意水解条件。影响α-淀粉酶活性的主要因素有pH值、温度和金属离子[1]。

α-淀粉酶具有反应速度快、效率高、成本低等优势。对于我国来讲，一方面食品与发酵工业的发展对真菌α-淀粉酶的需求量不断增加；另一方面，由于我国目前不能自主生产真菌α-淀粉酶，每年都要大量进口，且价格昂贵。因此尽快实现国产化生产，对于满足市场需求，调整我国酶制剂工业的产业结构，节约外汇支出等都具有十分

枯草芽孢杆菌产α-淀粉酶发酵试验

化学与生命科学学院

摘要：以枯草芽孢杆菌（BacilusSubtilisBF—7658）为实验菌株，通过种子扩大培养，选出生长力旺盛的菌株进行液体摇瓶发酵。通过测定不同发酵时间生产的酶活，来初步估计发酵最佳时期和终点。

关键词：枯草芽孢杆菌，α-淀粉酶，液体摇瓶发酵，酶活

淀粉酶是能够分解淀粉糖苷键的一类酶的总称，包括α-淀粉酶、β-淀粉

酶、糖化酶和异淀粉酶。芽孢杆菌主要用来产生α-淀粉酶和异淀粉酶，其中α-淀粉酶又称淀粉1，4-糊精酶，能够切开淀粉链内部的α-1，4-糖苷键，将淀粉水解为麦芽糖、含有6 个葡萄糖单位的寡糖和带有支链的寡糖；而异淀粉酶又称淀粉α-1，6-葡萄糖苷酶、分枝酶，此酶作用于支链淀粉分子分枝点处的α-1，6-糖苷键，将支链淀粉的整个侧链切下变成直链淀粉。通过发酵实验，我们可以以酶活为依据，初步估计发酵的最佳时期和发酵终点。

实验材料和方法

一、实验材料：

（一）实验菌株：以枯草芽孢杆菌（BacilusSubtilisBF—7658） （二）培养基： 1、种子培养液

葡萄糖 1%

Tryptone(胰蛋白胨)：1%, Yeast Extract(酵母提取物)：0.5%, NaCl(

枯草芽孢杆菌产α-淀粉酶发酵试验

化学与生命科学学院

摘要：以枯草芽孢杆菌（BacilusSubtilisBF—7658）为实验菌株，通过种子扩大培养，选出生长力旺盛的菌株进行液体摇瓶发酵。通过测定不同发酵时间生产的酶活，来初步估计发酵最佳时期和终点。

关键词：枯草芽孢杆菌，α-淀粉酶，液体摇瓶发酵，酶活

淀粉酶是能够分解淀粉糖苷键的一类酶的总称，包括α-淀粉酶、β-淀粉

酶、糖化酶和异淀粉酶。芽孢杆菌主要用来产生α-淀粉酶和异淀粉酶，其中α-淀粉酶又称淀粉1，4-糊精酶，能够切开淀粉链内部的α-1，4-糖苷键，将淀粉水解为麦芽糖、含有6 个葡萄糖单位的寡糖和带有支链的寡糖；而异淀粉酶又称淀粉α-1，6-葡萄糖苷酶、分枝酶，此酶作用于支链淀粉分子分枝点处的α-1，6-糖苷键，将支链淀粉的整个侧链切下变成直链淀粉。通过发酵实验，我们可以以酶活为依据，初步估计发酵的最佳时期和发酵终点。

实验材料和方法

一、实验材料：

（一）实验菌株：以枯草芽孢杆菌（BacilusSubtilisBF—7658） （二）培养基： 1、种子培养液

葡萄糖 1%

Tryptone(胰蛋白胨)：1%, Yeast Extract(酵母提取物)：0.5%, NaCl(