dna的pcr扩增与电泳实验报告

题目：水稻DNA提取，扩增与电泳实验 组别：第三组

一、1掌握DNA的提取技术2掌握PCR的相关操作3掌握了解电泳操作方法和步骤

二、实验原理：1、提取DNA一般用水稻幼叶，先用机械方法液氮研磨植物组织使组织细胞破碎，然后加TPS抽提液水浴提取DNA，最后用无水乙醇沉淀DNA即可。（DNA提取原理）2、DNA在高温时可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。（PCR原理）3、琼脂糖凝胶电泳：借助琼脂糖凝胶的分子筛作用，核酸片段因其分子量或分子形状不同，电泳移动速度有差异而分离。 三、实验仪器和药品

液氮、镊子、手套、移液枪、枪头2ML和1.5ML离心管、水稻幼叶、研磨棒、琼脂糖、天平、PCR仪、Loading Buffer染色剂、灭菌双蒸水、摇床、离心仪、Taq酶、Mg2+Buffer、dNTP溶液、引物、TPS抽提液、无水乙醇、电泳槽、GoldView、TBE溶液、微波炉、锥形瓶、量筒、PCR板、PCR盖、水浴箱、Marker 四、实验步骤 1、DNA提取

（1）取水稻叶子少量置于2ML离心管内，加入液氮研磨，带磨成粉状后，加1MLTPS抽提液，然后将离心管放入75℃恒温水浴箱中至少半小时。同时将无水乙醇放入-40℃下冷冻 （2）水

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pcr扩增实验报告

篇一：DNA提取及PCR扩增实验报告

PCR扩增及DNA琼脂糖凝胶电泳 刘琳 1131428 环境科学 一、实验目的

1．学习并掌握PCR扩增的基本原理与实验技术。

2．对扩增后的DNA进行琼脂糖凝胶电泳试验，并分析相应结果。 二、实验原理 1. PCR扩增

多聚酶链反应（PCR）技术的原理类似于DNA的天然复制过程。在微量离心管中加入适量缓冲液，加入微量模板DNA、四种脱氧核苷酸（dNTP）、耐热Taq聚合酶及两个合成DNA的引物，而后加热使模板DNA在高温下（94℃）变性，双链解链，这是所谓变性阶段。降低溶液温度，使合成引物在低温（55℃）----------------精选公文范文----------------

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与模板DNA互补退火形成部分双链，这是所谓退火阶段。溶液反应温度升至中温（72℃），在T

质粒DNA的提取、定量、酶切与PCR鉴定

一、实验目的

1.学习并掌握用碱裂解法提取质粒DNA的方法； 2.学习并掌握了解质粒酶切鉴定的方法；

3.学习并掌握紫外吸收检测DNA浓度和纯度的原理和方法； 4.学习并掌握PCR基因扩增的实验原理和操作方法； 5.学习并掌握水平式琼脂糖凝胶电泳的原理和使用方法。

二、实验原理

1.PCR(多聚酶链式反应)

在DNA聚合酶催化下，可以DNA为模板，以特定引物为延伸起点，以dNTP为原料，通过变性、退火、延伸等步骤， 在体外（缓冲液中）复制DNA，使目的DNA按2n方式呈指数形式扩增。

PCR一次循环的具体反应步骤为：

A.变性：加热反应系统至95℃，使模板DNA在高温下完全变性，双链解链 。 B.退火：逐渐降低溶液温度，使合成引物在低温（35－70℃,一般低于模板Tm值的5℃左右），与模板DNA互补退火形成部分双链。

C.延伸：溶液反应温度升至中温72℃，在 Taq酶作用下，以dNTP为原料，引物为复制起点，模板DNA的一条单链在解链和退火之后延伸为一条双链。

2.质粒DNA的提取与制备 (1).碱裂解法：

染色体DNA与质粒DNA的变性与复性存在差异： A.高碱性条件下，染色体DN

质粒DNA的提取、定量、酶切与PCR鉴定

一、实验目的

1.学习并掌握用碱裂解法提取质粒DNA的方法； 2.学习并掌握了解质粒酶切鉴定的方法；

3.学习并掌握紫外吸收检测DNA浓度和纯度的原理和方法； 4.学习并掌握PCR基因扩增的实验原理和操作方法； 5.学习并掌握水平式琼脂糖凝胶电泳的原理和使用方法。

二、实验原理

1.PCR(多聚酶链式反应)

在DNA聚合酶催化下，可以DNA为模板，以特定引物为延伸起点，以dNTP为原料，通过变性、退火、延伸等步骤， 在体外（缓冲液中）复制DNA，使目的DNA按2n方式呈指数形式扩增。

PCR一次循环的具体反应步骤为：

A.变性：加热反应系统至95℃，使模板DNA在高温下完全变性，双链解链 。 B.退火：逐渐降低溶液温度，使合成引物在低温（35－70℃,一般低于模板Tm值的5℃左右），与模板DNA互补退火形成部分双链。

C.延伸：溶液反应温度升至中温72℃，在 Taq酶作用下，以dNTP为原料，引物为复制起点，模板DNA的一条单链在解链和退火之后延伸为一条双链。

2.质粒DNA的提取与制备 (1).碱裂解法：

染色体DNA与质粒DNA的变性与复性存在差异： A.高碱性条件下，染色体DN

反转录

概念

反转录是以RNA为模板,通过反转录酶,合成DNA的过程，是DNA生物合成的一种特殊方式。

区分:反转录与逆转录不等同。反转录是进行基因工程过程中，人为地提取出所需要的目的基因的信使RNA，并以之为模板人工合成DNA的过程；逆转录是RNA类病毒自主行为，在整合到宿主细胞内以RNA为模板形成DNA的过程。二者虽同为RNA→DNA的过程，但地点不同，相对性的来说，反转录在体外，逆转录在体内。

2反转录酶与反转录过程

反转录过程由反转录酶催化，该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶（RDDP），即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA（cDNA）。反转录酶存在于一些RNA病毒中，可能与病毒的恶性转化有关。人类免疫缺陷病毒（HIV）也是一种RNA病毒，含有反转录酶。在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有反转录酶，推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。

大多数反转录酶都具有多种酶活性，主要包括以下几种活性。

①DNA聚合酶活性；以RNA为模板，催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物，多为色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性，因此没有校正功能，所以由反转

1 分子实验报告 2013030020华天瑞

Preparation of Plasmid DNA, Restriction Enzyme Digestion, and

Agarose Gel Electrophoresis

2014/10/14-21

1 Intro

1.1 Objective

To learn

? The characteristics of plasmid DNA

? The method of plasmid DNA mini-preparation by alkaline lysis and the measurement of

DNA concentration by spectrophotometer ? The characteristics of restriction endonuclease

? How to use agarose gel electrophoresis to separate DNAs To understand: The principles of pu

1 分子实验报告 2013030020华天瑞

Preparation of Plasmid DNA, Restriction Enzyme Digestion, and

Agarose Gel Electrophoresis

2014/10/14-21

1 Intro

1.1 Objective

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? The characteristics of plasmid DNA

? The method of plasmid DNA mini-preparation by alkaline lysis and the measurement of

DNA concentration by spectrophotometer ? The characteristics of restriction endonuclease

? How to use agarose gel electrophoresis to separate DNAs To understand: The principles of pu

PCA与PLS仿真报告

1.实验目的

1) 了解PCA和PLS的基本原理。

2) 利用Matlab程序语言建立真实线性和非线性数学模型，并利用PCR和PLS预估

该模型，并计算对应的校正标准误差（SEC）、交叉检验标准误差（SECV）和预测标准误差（SEP），判断预估模型的准确性。

3) 分析噪声大小和样本矩阵线性关联对模型稳健性的影响。

2.算法介绍

2.1 主成分分析（Principal Component Regression）

主成分回归法（PCR）是采用多元统计中的主成分分析方法（Principal Component Analysis），先对输入矩阵X进行分解，然后选取其中的主成分来进行多元线性回归分析，故称之为主成分回归。

2.1.1主成分分析原理

PCA将矩阵X（n×k）分解为k个向量的外积之和，即：

TTT （2-1） X?t1p1?t2p2???tkpk式中t为得分向量（Score Vector）；p为载荷向量（Loading Vector）或称为主成分。上式也可写成下列矩阵形式：

X?TPT （2-2）

式中T??t1,t2,?,tn?称

PCA与PLS仿真报告

1.实验目的

1) 了解PCA和PLS的基本原理。

2) 利用Matlab程序语言建立真实线性和非线性数学模型，并利用PCR和PLS预估

该模型，并计算对应的校正标准误差（SEC）、交叉检验标准误差（SECV）和预测标准误差（SEP），判断预估模型的准确性。

3) 分析噪声大小和样本矩阵线性关联对模型稳健性的影响。

2.算法介绍

2.1 主成分分析（Principal Component Regression）

主成分回归法（PCR）是采用多元统计中的主成分分析方法（Principal Component Analysis），先对输入矩阵X进行分解，然后选取其中的主成分来进行多元线性回归分析，故称之为主成分回归。

2.1.1主成分分析原理

PCA将矩阵X（n×k）分解为k个向量的外积之和，即：

TTT （2-1） X?t1p1?t2p2???tkpk式中t为得分向量（Score Vector）；p为载荷向量（Loading Vector）或称为主成分。上式也可写成下列矩阵形式：

X?TPT （2-2）

式中T??t1,t2,?,tn?称

PCA与PLS仿真报告

1.实验目的

1) 了解PCA和PLS的基本原理。

2) 利用Matlab程序语言建立真实线性和非线性数学模型，并利用PCR和PLS预估

该模型，并计算对应的校正标准误差（SEC）、交叉检验标准误差（SECV）和预测标准误差（SEP），判断预估模型的准确性。

3) 分析噪声大小和样本矩阵线性关联对模型稳健性的影响。

2.算法介绍

2.1 主成分分析（Principal Component Regression）

主成分回归法（PCR）是采用多元统计中的主成分分析方法（Principal Component Analysis），先对输入矩阵X进行分解，然后选取其中的主成分来进行多元线性回归分析，故称之为主成分回归。

2.1.1主成分分析原理

PCA将矩阵X（n×k）分解为k个向量的外积之和，即：

TTT （2-1） X?t1p1?t2p2???tkpk式中t为得分向量（Score Vector）；p为载荷向量（Loading Vector）或称为主成分。上式也可写成下列矩阵形式：

X?TPT （2-2）

式中T??t1,t2,?,tn?称