基因功能分析的三大策略

第七章 基因功能分析的基本策略基因功能是在细胞组成的多层次的复杂生命体中 实现的，因此对基因功能的研究将极大程度上依赖于

对模式生物的研究。基因敲除技术、转基因动物模型、基因转染细胞 模型、RNA干涉技术的发展，成为基因功能分析的有 力工具。

第一节 利用转基因模型研究基因的功能

利用动物模型研究未知基因的功能，就是将某 一基因从动物基因组中剔除或将外源基因引入动物

基因组，产生在遗传上经过基因工程修饰(改造)的动物，实现在整体动物、细胞或分子水平上认识 基因的功能或人类疾病发生的分子机制。

转基因技术概念 转基因技术是指将外源基因导入受精卵细胞或胚胎 干细胞中，通过外源基因与细胞染色体DNA之间随机重 组的发生而将外源基因插入到受体细胞染色体DNA上的 过程。 利用转基因技术可以制备转基因生物或稳定转染细 胞。通常所指的转基因生物是指将外源基因导入受精卵 细胞或胚胎干细胞中，使外源基因通过随机重组插入到 受体细胞的染色体上，并随细胞的分裂而将外源基因遗

传给后代。

一、转基因动物转基因动物是指应用转基因技术培育出的携带外源基因的动物。 转基因过程： 1、转基因载体的构建； 2、将转基因载体导入受精卵细胞或胚胎干细胞； 3、将转基因受精卵或胚胎干细胞植入假

第七章 基因功能分析的基本策略基因功能是在细胞组成的多层次的复杂生命体中 实现的，因此对基因功能的研究将极大程度上依赖于

对模式生物的研究。基因敲除技术、转基因动物模型、基因转染细胞 模型、RNA干涉技术的发展，成为基因功能分析的有 力工具。

第一节 利用转基因模型研究基因的功能

利用动物模型研究未知基因的功能，就是将某 一基因从动物基因组中剔除或将外源基因引入动物

基因组，产生在遗传上经过基因工程修饰(改造)的动物，实现在整体动物、细胞或分子水平上认识 基因的功能或人类疾病发生的分子机制。

转基因技术概念 转基因技术是指将外源基因导入受精卵细胞或胚胎 干细胞中，通过外源基因与细胞染色体DNA之间随机重 组的发生而将外源基因插入到受体细胞染色体DNA上的 过程。 利用转基因技术可以制备转基因生物或稳定转染细 胞。通常所指的转基因生物是指将外源基因导入受精卵 细胞或胚胎干细胞中，使外源基因通过随机重组插入到 受体细胞的染色体上，并随细胞的分裂而将外源基因遗

传给后代。

一、转基因动物转基因动物是指应用转基因技术培育出的携带外源基因的动物。 转基因过程： 1、转基因载体的构建； 2、将转基因载体导入受精卵细胞或胚胎干细胞； 3、将转基因受精卵或胚胎干细胞植入假

显微注射斑马鱼胚胎分析基因功能

数以百万计的斑马鱼雌鱼是从饲养箱中繁殖出来的，受精卵产在箱的底部并得以收集。收集的鱼卵排列在位于培养皿中的载玻片的一侧，然后用气体推动注射针中的样品，并对显微注射设备进行调节使注射量的多少符合要求。最后，当卵发育至合适的时间时进行显微注射。

1. 简介（略） 2. 鱼卵的收集

在注射之前(前一天)将鱼放在饲养箱中分开的区域。为使取得卵较多，可按一只雄鱼对两只雌鱼的比例分配。第二天清晨开灯后，取出饲养箱中的隔板，使鱼不受干扰地交配大约20分钟。用滤网收集饲养箱中的鱼卵，孵化液（egg water，注1）冲洗，转移到含孵化液的培养皿中。鱼可重新分组入大缸以便再次取卵注射。注意取卵的时间以便获得最大数量的分裂不超过一细胞期的卵。最后，把一片载玻片放在倒扣的10cm培养皿盖上，用移液管将鱼卵在载玻片的一侧排成一列，然后用Kimwipe（注2）放在载玻片的另一侧吸去多余的水，然后准备显微注射针。

3. 拉针，加入注射液及相关准备

用拉制显微注射针的机器将外径1mm的毛细玻璃管拉成两根针，用15cm培养皿存放注射针。针可提前拉制好。拉针用以下设置: heat 645, pull 60, velocity 80。用微量加样枪

基因工程中常用的酶及其功能分析

[摘 要] 酶是活细胞所产生的一种具有特殊催化功能的蛋白质,在生物工程中应用非常广泛,如食品、医药、废水处理等方面.基因工程中常用的酶主要包括核酸酶、连接酶、聚合酶和修饰酶,分别发挥着不同的功能.

[关键词] 基因工程;基因克隆;DNA.

外源基因通过体外重组后需要导入受体细胞内,在受体细胞内复制、转录、翻译并表达的操作过程称为基因工程(Gene Engineering)[1].其中基因克隆是不可缺少的步骤.在基因克隆过程中,当目的DNA样品制备好之后,需要对DNA分子进行进一步的处理,包括对目的基因片段的取得、连接、转化等操作.而这些操作过程必须借助酶(enzyme)的重要作用才可完成.由于研究方向及目的不同,现在对酶的分类方法也各不相同.结合实验,从基因工程的角度可将酶分为如下几类:①核酸酶,②连接酶,③聚合酶,④修饰酶. 1 核酸酶

核酸酶(nuclease)是一类以核酸为底物的水解酶,它可以打断核酸链中的磷酸二酯键,因而在基因工程中应用非常广泛.按底物专一性可以将核酸酶分为核糖核酸酶(RNase)与脱氧核糖核酸酶(DNase),非专一性核酸酶等.其中RNase降解RNA分子,DNase降解DNA分子.但

龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn

民事能动司法的功能分析

作者：高颖佳 沈雨竹 刘骁一 来源：《时代金融》2013年第08期

【摘要】在我国目前的“能动司法”的大环境下，“调解之风盛行”作为“能动司法”的主要表现形式之一，引起了理论界和实务界的热烈探讨和争议。而最新颁行的民诉法修正案中“先行调解”入法也标志着我国立法对能动司法的肯定。结合我国司法的实际情况，借鉴德国和我国台湾地区的诉讼和解制度，切实贯彻自愿原则、合理界定调解的适用范围、细化瑕疵调解的救济情形，为法院调解活动设定必要的限度，才能建立民主、公正和富有效率的合意解决纠纷机制，这也是实现真正意义上的“能动司法”的必经之路。 【关键词】能动司法 法院调解 诉讼和解 完善模式

中国现在所谓的“能动司法”其实是一个概念上的“舶来品”和内涵上的“中国制造”。所谓概念上的“舶来品”是指“能动司法”这一概念的提出，其实是借鉴美国的“司法能动主义”。“司法能动”是美国司法语汇，英文为judicial activism，可以理解为司法积极主义、司法主动主义，亦即司法表现出积极、主动、有活力的性质。美国司法能动主义有其特定含义，

可用于基因功能研究的基因组学工具——诱变

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 8．可用于基因功能研究的基因组学工具——诱变 Alex和er S. Beliaev亚历山大 柏利耶夫 朱晨光译；魏华初校, 张晓君校对 8.1 引言 随着原核生物研究进入了后测序时代，人们需要用更多的实验方法来促进对细菌基因组的功能研究。时下，许多医学、环境和生物技术领域中重要的微生物研究由于缺乏足够的遗传学方法而受到了限制。尽管DNA芯片技术、用质谱法鉴定蛋白质等研究方法已经或正在被开发以满足此类研究，但这当中诱变法无疑是揭示基因功能的最有效手段之一。 了解一个复杂生物系统中的某个特殊基因的功能，是一个需要系统研究的多步骤的过程。最初，关于一个开放阅读框产物功能的信息可以根据生物信息学工具比较分析核苷酸序列来得到(详细讨论请看第三章)。然而并不是一个基因组中所有基因都可以用序列同源性预测其功能，而且，序列同源性并不自动对应相应的功能。不同基因之间存在复杂的进化和结构功能的关系，所以通过序列相似性推知基因功能这一方法会被误导甚至有时是错误的（

可用于基因功能研究的基因组学工具——诱变

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 8．可用于基因功能研究的基因组学工具——诱变 Alex和er S. Beliaev亚历山大 柏利耶夫 朱晨光译；魏华初校, 张晓君校对 8.1 引言 随着原核生物研究进入了后测序时代，人们需要用更多的实验方法来促进对细菌基因组的功能研究。时下，许多医学、环境和生物技术领域中重要的微生物研究由于缺乏足够的遗传学方法而受到了限制。尽管DNA芯片技术、用质谱法鉴定蛋白质等研究方法已经或正在被开发以满足此类研究，但这当中诱变法无疑是揭示基因功能的最有效手段之一。 了解一个复杂生物系统中的某个特殊基因的功能，是一个需要系统研究的多步骤的过程。最初，关于一个开放阅读框产物功能的信息可以根据生物信息学工具比较分析核苷酸序列来得到(详细讨论请看第三章)。然而并不是一个基因组中所有基因都可以用序列同源性预测其功能，而且，序列同源性并不自动对应相应的功能。不同基因之间存在复杂的进化和结构功能的关系，所以通过序列相似性推知基因功能这一方法会被误导甚至有时是错误的（

龙源期刊网 http://www.qikan.com.cn

民事能动司法的功能分析

作者：高颖佳 沈雨竹 刘骁一 来源：《时代金融》2013年第08期

【摘要】在我国目前的“能动司法”的大环境下，“调解之风盛行”作为“能动司法”的主要表现形式之一，引起了理论界和实务界的热烈探讨和争议。而最新颁行的民诉法修正案中“先行调解”入法也标志着我国立法对能动司法的肯定。结合我国司法的实际情况，借鉴德国和我国台湾地区的诉讼和解制度，切实贯彻自愿原则、合理界定调解的适用范围、细化瑕疵调解的救济情形，为法院调解活动设定必要的限度，才能建立民主、公正和富有效率的合意解决纠纷机制，这也是实现真正意义上的“能动司法”的必经之路。 【关键词】能动司法 法院调解 诉讼和解 完善模式

中国现在所谓的“能动司法”其实是一个概念上的“舶来品”和内涵上的“中国制造”。所谓概念上的“舶来品”是指“能动司法”这一概念的提出，其实是借鉴美国的“司法能动主义”。“司法能动”是美国司法语汇，英文为judicial activism，可以理解为司法积极主义、司法主动主义，亦即司法表现出积极、主动、有活力的性质。美国司法能动主义有其特定含义，

棉花SUPERMAN类锌指蛋白基因GZFP的启动子及功能分析

棉花学报CottonScience2011，23（6）：483~489

研究与进展

棉花SUPERMAN类锌指蛋白基因GZFP的

启动子及功能分析

杨郁文1，周建武2，张保龙1*，范晓慧1，任永哲1，陈天子1

（1.江苏省农业科学院农业生物技术研究所/江苏省农业生物学重点实验室,江苏南京210014；2.扬州大学生物科学与技术学院，江苏扬州225009）

摘要：GZFP是来源于陆地棉的一个SUPERMAN类锌指蛋白基因。为了进一步了解该基因功能，本研究通过染色体步移（Genomewalking）获得其启动子区域，并构建该片段与GUS连接的重组载体pBI-pGZFP-5::GUS，通过花浸染法转化拟南芥。转基因植株的GUS染色结果表明GUS基因主要在根部以及花器官表达，而叶片中的表达量很低，并且根部的表达量在整个生育期都很强。通过半定量RT-PCR分析不同诱导下GZFP基因的表达变化，发现ABA、干旱、盐胁迫诱导可以提高其表达量。构建GZFP过量表达载体并通过叶盘法转化烟草，烟草转化株的表型无明显变化，但是转化株中NtOPBP1和NtERD10的表达量较未转化株明显增强，而这两个基因都参与了植物的

对比功能分析与翻译

摘要：本文首先简要讨论了对比功能分析与翻译之间的密切联系。然后以一个实例指出，实际翻译过程是一个决策过程，对比功能分析可以为分析在翻译中可供选择的各种语言选项及其形式、语义特征和篇章、语用使用条件提供一个总体描述框架，因而对指导具体翻译和分析译文所作选择的得失具有很大的实用价值。

1. 引言

对比语言学的核心问题是研究方法问题。虽然从事语言对比的研究者很多，但是思考和提出系统的、专门用于语言对比的理论模式和框架的研究者却屈指可数。波兰格但斯克大学的 Krzeszowski教授是其中的一位，而芬兰赫尔辛基大学的Chesterman教授是另一位这样的学者。如果说前者(1979, 1980)提出的“对比生成语法”模式(简介见许余龙 1992: 180 -181; 2002: 163 -164)主要适用于句法结构对比的话，那么后者(1998)提出的“对比功能分析”模式的适用范围则要广泛得多，不仅可以用于词汇、形态、句法、语义、语用对比，也可以用于话语分析、文体、修辞和社会语言学对比(关于其研究方法以及在英汉对比中的应用，见许余龙 2005)。而且，由于 Chesterman是一位多语交际和翻译研究专家，出版过多部语言学和翻译