血清生化指标检测方法

植物组织中可溶性糖含量的测定

在作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。它们在营养中的作用主要有：合成纤维素组成细胞壁；转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等；分解产物是其他许多有机物合成的原料，如糖在呼吸过程中形成的有机酸，可作为 NH 3 的受体而转化为氨基酸；糖类作为呼吸基质，为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。由于碳水化合物具有这些重要的作用，所以是营养中最基本的物质，也是需要量最多的一类。

Ⅰ蒽酮法测定可溶性糖

一、原理

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量测定。

该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖含量，而且可以测所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值。但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，不然会因

植物组织中可溶性糖含量的测定

在作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。它们在营养中的作用主要有：合成纤维素组成细胞壁；转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等；分解产物是其他许多有机物合成的原料，如糖在呼吸过程中形成的有机酸，可作为 NH 3 的受体而转化为氨基酸；糖类作为呼吸基质，为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。由于碳水化合物具有这些重要的作用，所以是营养中最基本的物质，也是需要量最多的一类。

Ⅰ蒽酮法测定可溶性糖

一、原理

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量测定。

该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖含量，而且可以测所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值。但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，不然会因

植物组织中可溶性糖含量的测定

在作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。它们在营养中的作用主要有：合成纤维素组成细胞壁；转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等；分解产物是其他许多有机物合成的原料，如糖在呼吸过程中形成的有机酸，可作为 NH 3 的受体而转化为氨基酸；糖类作为呼吸基质，为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。由于碳水化合物具有这些重要的作用，所以是营养中最基本的物质，也是需要量最多的一类。

Ⅰ蒽酮法测定可溶性糖

一、原理

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量测定。

该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖含量，而且可以测所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值。但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，不然会因

粗 蛋 白 含 量 检 测

(GB/T6432)

一、原理：

凯氏法测定样中的含氮量、即在催化剂作用下，用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结果乘以换算系数6.25，计算出粗蛋白含量。

二、仪器设备：

1. 高速粉碎机，粉碎时间1分钟。 2. 分样筛； 0.45mm、40目 3. 分析天平；感量0.0001g 4. 消化炉

5. 滴定管；酸式50mL 6. 锥形瓶；250mL

7. 定氮仪；以凯氏原理制造的半自动蛋白测定仪

三、试剂

1. 硫酸：含量98%

2. 氢氧化钠：40%水溶液（m/V） 3. 硼酸：2%水溶液（m/V）

4. 混合催化剂：0.4g硫酸铜(5个结晶水)，6g硫酸钾或硫酸钠，磨碎混匀。

5. 混合指示剂：甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。

6. 0.1mol/L盐酸标准溶液：8.3 mL盐酸注入1000 mL蒸馏水中。

标定：减量法称取0.8g左右在270-300℃灼烧2h的无水NaCO3，加水50mL溶解，加10滴混合指示剂，用配好的盐酸滴定成暗红色，煮沸2min，冷却(水中)后再滴至暗红

全血是血细胞和液体的混合物。全血计数（CBC）检查血液细胞 部分，并给出各种不同类型红细胞和白细胞、血小板以及血红蛋白的数量。生化检测对象是血液移除细胞后的液体部分。为了获取血液中的液体，血样需要先在管内凝集，然后经离心机离心，使血凝块下沉至管的底部，而析出的液体留在管的上部。血液凝集后析

出的液体被称为“血清”，通常用于生化检测。动物生化检测包括在一份样品内检查 查多种化学成分，这些化学成分的浓度可揭示体内各种器官许多方面的信息。

检测项目

兽医临床生化指标通常包括以下项目： T-Pro 总蛋白 Alb

白蛋白 谷丙转氨酶

GPT

丙氨酸氨基转移酶(ALT) 谷草转氨酶

GOT

天门冬氨酸氨基转移酶(AST)

ALP

碱性磷酸酶

T-Cho 总胆固醇 FRA Ca IP Mg UA

果糖胺 钙 无机磷 镁 尿酸

TG

甘油三酯

CRE

肌酸酐

T-Bil 总胆红素 BUN

血尿素氮

CPK 肌酸磷酸激酶 LDH 乳酸脱氢酶 Amy 淀粉酶

GGT γ-谷酰氨基转移酶 Glu

葡萄糖

主要项目的判读 总蛋白（T-Pro）：

一般说来，总蛋白浓度检测的是两种血液蛋白分子，白蛋白

全血是血细胞和液体的混合物。全血计数（CBC）检查血液细胞 部分，并给出各种不同类型红细胞和白细胞、血小板以及血红蛋白的数量。生化检测对象是血液移除细胞后的液体部分。为了获取血液中的液体，血样需要先在管内凝集，然后经离心机离心，使血凝块下沉至管的底部，而析出的液体留在管的上部。血液凝集后析

出的液体被称为“血清”，通常用于生化检测。动物生化检测包括在一份样品内检查 查多种化学成分，这些化学成分的浓度可揭示体内各种器官许多方面的信息。

检测项目

兽医临床生化指标通常包括以下项目： T-Pro 总蛋白 Alb

白蛋白 谷丙转氨酶

GPT

丙氨酸氨基转移酶(ALT) 谷草转氨酶

GOT

天门冬氨酸氨基转移酶(AST)

ALP

碱性磷酸酶

T-Cho 总胆固醇 FRA Ca IP Mg UA

果糖胺 钙 无机磷 镁 尿酸

TG

甘油三酯

CRE

肌酸酐

T-Bil 总胆红素 BUN

血尿素氮

CPK 肌酸磷酸激酶 LDH 乳酸脱氢酶 Amy 淀粉酶

GGT γ-谷酰氨基转移酶 Glu

葡萄糖

主要项目的判读 总蛋白（T-Pro）：

一般说来，总蛋白浓度检测的是两种血液蛋白分子，白蛋白

应用ＥＬＩＳＡ方法检测犬狂犬病血清抗体试验

摘要 运用ELISA方法检测狂犬病抗体水平，试验结果表明：检测狂犬病抗体阳性率达92.5％，免疫效果基本满意。运用此方法较简单、操作方便、灵敏度高、特意性强，值得推广运用。同时，分析了免疫失效的原因。

关键词 ELISA方法；狂犬病；血清抗体；检测

狂犬病是由狂犬病病毒引起的人兽共患疾病，人和所有温血动物对狂犬病毒都易感，该病广泛分布于全世界，是一种自然疫源性疾病。目前检测狂犬病血清抗体的方法有快速荧光灶抑制试验（RFFIT）和小鼠中和试验（NIH）、间接免疫荧光试验、间接血凝试验等。其中快速荧光灶抑制试验（RFFIT）和小鼠中和试验（NIH）是OIE推荐的方法，但是这2种方法检测时间长，检测条件要求高，不适用于大规模的血清检测。本试验运用ELISA方法检测了犬狂犬病抗体水平，现报告如下。

1材料与方法

1.1 被检血清

共40份，采自东莞市望牛墩镇免疫狂犬病疫苗至少30d以上的犬只。

1.2 试剂

①狂犬病ELISA试剂盒，购自法国SYNBIOTICS公司，批号为6SRAB304，6SRAB305。②狂犬病OIE标准血清，法国狂犬病OIE参考实验室提供。

1.3 方法

梅毒治疗

２００８年８月现代临床医学

ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＭＯＤＥＲＮＣＬＩＮＩＣＡＬＭＥＤＩＣＩＮＥ

Ａｕｇ．２００８Ｖ０１．３４

Ｎｏ．４

箩３４卷第４期

２．２两组疗效比较。两组有效率比较有显著性差异（Ｐ＜Ｏ．０５），见表２。

表２两组疗效比较（例）

发症的发生。方中柴胡能促进内源性。肾上腺皮质激素分泌而抑制炎症；黄芩能抑制纤维蛋白原转化为纤维蛋白，防止内毒素所致的ＤＩＣ。生大黄有松弛胆管口括约肌作用，可使胰胆管内小结石和胆固醇引流人肠道【２Ｊ。枳实可促胃排空，厚朴能改善内毒素对胃肠电抑制，促进胃肠蠕动（玄明粉有刺激小肠蠕动作用）。本治疗组

注：（１）与对照组比较Ｐ＜０．０５。

与对照组疗效比较，有显著性差异（Ｐ＜Ｏ．０５）。因此，我们认为该方辅助治疗急性胰腺炎简便易行、疗效可靠且无毒副作用，值得临床推广应用。

［参考文献］

［１］于皆平，沈志祥，罗和生．实用消化病学［Ｍ］．第２版．北京：

科学出版社，２００７，９３５．

［２］巫协宁．重症急性胰腺炎治疗指南［Ｊ］．胃肠病学，２００２，７

（４）：２３２—２３４．

（２００８—０２—２５收稿；２００８—０３—１０修回）

本文编辑：刘国芳

３讨论

中医认为急性胰腺炎因过饮酒浆、过食油腻、暴怒伤肝或食积蛔虫妄动，以致肝胆湿热或脾胃

一种新的肾损伤标志物—中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的临床意义

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白( neutrophil gelatinaseassociated lipocalin，NGAL) ，又称人脂质运载蛋白2( lipocalin 2，Ln2) 或噬铁蛋白( siderocalin) ，是人脂质运载蛋白家族中的一个新成员。近年来，NGAL 作为一种新的肾损伤标志物倍受关注。 1、NGAL 的生物学特性

NGAL 是1993 年Kjeldsen 等［1］研究中性粒细胞时发现的一种特殊颗粒组分，与明胶酶

B 即基质金属蛋白酶

9( matrixmetalloproteinase-9，MMP-9) 密切相关。人类NGAL 基因定位于第9 号染色体长臂( 9q34) ，全长5 869 bp，包括1 695bp 的5'端非转录区、178 bp 的3'端非转录区及由7 个外显子与6 个内含子构成的3 696 bp 的原初转录区; 其相对分子质量为25 000 bp。血小板活化因子( PAF) 、白三烯-B4( LT-B4)与N-甲酸基-甲硫氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸( N-formyl-Met-Leu-Phe) 等是NGAL 的配体［2］

间接ELISA检测抗血清效价

姓名：王贤臣 学号：1125400080 （成都医学院 医学检验 成都610500）

【摘要】目的：通过实验掌握间接酶联免疫吸附测定技术（ELISA）的原理及

操作过程及间接ELISA检测抗血清效价的实验条件优化及效价的确定。方法：间接ELISA双抗体夹心法对包被抗原及酶标抗体工作浓度进行探索。结果：经过预实验初步确定抗人白蛋白血清包被浓度和一二抗的浓度，然后在正式实验确定其浓度，从而再进行研究。讨论：间接ELISA检测抗血清效价的影响因素。并将预实验方法的结果与确定实验的结果进行对比，和分析在实验过程中的注意事项。

【关键词】抗人白蛋白ABL ELISA

前言：1971年Engvall和Perlmann 发表了酶联免疫吸附测定用于IgG 定量测 定的文章，使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展为体液标本中微量物质的测定方法。之一方法的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持器免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原后抗体即保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不