基因扩增实验室污染类型包括

****医院临床检验中心SOP文件 实验室操作规程文件编号：版本：生效日期： 临床基因扩增实验室室内质量控制标准操作程序第1页共8页

室内质量控制标准操作程序(SOP-22)

1目的：了解并控制实验室检测的精密度的变化

2适用范围：核酸扩增荧光定量检测，使用Line-Gene基因扩增仪实验室 3操作人：** ** 4操作：

4.1自制室内质控品：

a) 自制室内质控品来自临床收集的已知HBV阳性血清大约（1×10拷贝），

每收到一份冻存于-20℃。收集到约35ml时，取出样品，置室温复融。将各管倒入无菌带盖的小三角烧瓶中充分混匀。

b) 将以上的混合血清，以每管120ul，分装于0.5ml离心管内，分装若干

管。剩余血清根据废物处理及生物防护操作程序处理。

c) 将上述取约23管装一小袋，其余20管装一小袋。共分成若干小代。23

管一小袋置于-20℃冰箱，其余置于-70℃超低温冰箱保存，用完一小袋，就从-70℃转移1小袋到-20℃冰箱备用。

4.2基线测定及计算RCV：

在准备开展质控工作当月的第一天取上述23管中的三管复溶，随病人标本一起测定，第二天取两管复溶，随病人标本一起测定，以后每天随病人标本测定一管，20

_

天后计算各项目的测定结果的x

附件

医疗机构临床基因扩增检验

实验室工作导则

一、临床基因扩增检验实验室的设计

（一）临床基因扩增检验实验室区域设计原则。原则上临床基因扩增检验实验室应当设臵以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。这4个区域在物理空间上必须是完全相互独立的，各区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态，不能有空气的直接相通。根据使用仪器的功能，区域可适当合并。例如使用实时荧光PCR仪，扩增区、扩增产物分析区可合并；采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。各区的功能是：

1.试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。

2.标本制备区：核酸（RNA、DNA）提取、贮存及其加入至扩增反应管。对于涉及临床样本的操作，应符合生物安全二级实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求。

3.扩增区：cDNA合成、DNA扩增及检测。

4.扩增产物分析区：扩增片段的进一步分析测定，如杂交、酶切电泳、变性高效液相分析、测序等。

（二）临床基因扩增检验实验室的空气流向。临床基因扩增检验实验室的空气流向可按照试剂储存和准备区

附件

医疗机构临床基因扩增检验

实验室工作导则

一、临床基因扩增检验实验室的设计

（一）临床基因扩增检验实验室区域设计原则。原则上临床基因扩增检验实验室应当设臵以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。这4个区域在物理空间上必须是完全相互独立的，各区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态，不能有空气的直接相通。根据使用仪器的功能，区域可适当合并。例如使用实时荧光PCR仪，扩增区、扩增产物分析区可合并；采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。各区的功能是：

1.试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。

2.标本制备区：核酸（RNA、DNA）提取、贮存及其加入至扩增反应管。对于涉及临床样本的操作，应符合生物安全二级实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求。

3.扩增区：cDNA合成、DNA扩增及检测。

4.扩增产物分析区：扩增片段的进一步分析测定，如杂交、酶切电泳、变性高效液相分析、测序等。

（二）临床基因扩增检验实验室的空气流向。临床基因扩增检验实验室的空气流向可按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增

附件

医疗机构临床基因扩增检验

实验室工作导则

一、临床基因扩增检验实验室的设计

（一）临床基因扩增检验实验室区域设计原则。原则上临床基因扩增检验实验室应当设臵以下区域：试剂储存和准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。这4个区域在物理空间上必须是完全相互独立的，各区域无论是在空间上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态，不能有空气的直接相通。根据使用仪器的功能，区域可适当合并。例如使用实时荧光PCR仪，扩增区、扩增产物分析区可合并；采用样本处理、核酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、扩增产物分析区可合并。各区的功能是：

1.试剂储存和准备区：贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备，以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。

2.标本制备区：核酸（RNA、DNA）提取、贮存及其加入至扩增反应管。对于涉及临床样本的操作，应符合生物安全二级实验室防护设备、个人防护和操作规范的要求。

3.扩增区：cDNA合成、DNA扩增及检测。

4.扩增产物分析区：扩增片段的进一步分析测定，如杂交、酶切电泳、变性高效液相分析、测序等。

（二）临床基因扩增检验实验室的空气流向。临床基因扩增检验实验室的空气流向可按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增

临床基因扩增检验实验室Eppendorf可调微量加样器维护保

养程序

一、目的：

确保可调微量加样器的正常使用，规范可调微量加样器维护保养的标准操作程序。

二、适用范围：

临床实验室可调微量加样器。

三、职责：

由临床基因扩增检验实验室专业技术人员制定程序文件，实验室负责人审核，科室主任批准实施。

四、程序：

1、加样器用10%次氯酸钠溶液消毒，然后用蒸溜水或70%乙醇去除残留的次氯酸钠。

2、使用时要注意加样器的加样范围，切不可超出此范围。

3、有加锁功能的加样器，在改变容量前，一定要先开锁后调值。

4、吸取液体时应缓慢匀速吸取，不要用力过猛。

5、加样器在使用完毕后应置于加样器架上，远离潮湿及腐蚀性物质。

6、为防止液体进入加样器套筒内，压放按钮时保持平稳，

加样器不得倒转，加样器内有液体时不得平放。

5000-10000加样器一定要加过滤芯。

7、加样器应定期请专业人员进行校准、调试，不可自行拆开。

反转录

概念

反转录是以RNA为模板,通过反转录酶,合成DNA的过程，是DNA生物合成的一种特殊方式。

区分:反转录与逆转录不等同。反转录是进行基因工程过程中，人为地提取出所需要的目的基因的信使RNA，并以之为模板人工合成DNA的过程；逆转录是RNA类病毒自主行为，在整合到宿主细胞内以RNA为模板形成DNA的过程。二者虽同为RNA→DNA的过程，但地点不同，相对性的来说，反转录在体外，逆转录在体内。

2反转录酶与反转录过程

反转录过程由反转录酶催化，该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶（RDDP），即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA（cDNA）。反转录酶存在于一些RNA病毒中，可能与病毒的恶性转化有关。人类免疫缺陷病毒（HIV）也是一种RNA病毒，含有反转录酶。在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有反转录酶，推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。

大多数反转录酶都具有多种酶活性，主要包括以下几种活性。

①DNA聚合酶活性；以RNA为模板，催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物，多为色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。反转录酶中不具有3′→5′外切酶活性，因此没有校正功能，所以由反转

企业实验室实验室认可相关要点

标准 检测 认证Standards/Testing/Certification

企业实验室

如何获得国家实验室认可

中国家用电器研究院　　宫赤霄

实验室认可是对校准和检测实验室有能力进行指定类型的校准和检测所作的一种正式承认。目前，我国的实验室认可机构是中国合格评定国家认可委员会（ＣＮＡＳ），认可依据是ＣＮＡＳ－ＣＬ０１：２００６《检测和校准的实验室的认可准则》，等同采用ＩＳＯ／ＩＥＣ１７０２５：２００５，ＩＳＯ／ＩＥＣ１７０２５：２００５这个全球公认的用来评审实验室的国际标准，包含管理要求和技术要求，并对实验室日常运作中的各个关键环节提出了控制要求。

企业实验室申请成为国家实验室的主要工作流程见图１。

方针以及为保证实施该方针而采用有效的制度和措施的纲领性文件。程序文件是将质量手册中描述的体系转化成可实施的操作体系的文件。程序文件的编写应简练明

的核查是现场评审的重点，因此也应该是实验室在迎审准备工作中的重点。

具体而言，实验室最好制定一个《新增检测项目的管理程序》，实质上这个程

不论是对于初次评审还是日常技术储备确，操作性强，不宜盲目追求数量和篇幅。序

　编写质量手册时首先要确定组织机构图，明确职责划分，原则是不能遗漏也不能重复，

1、[判断题]

电离辐射（放射性）的警告标识是:

（分值1.0）

你未作答 标准答案： 正确

2、[判断题] 体育运动中的安全防范措施多种多样：进行器材锻炼时一定要有人保护；向前摔倒时顺势作前滚翻，不要用手撑地；向后摔倒时，让身体自然倒地，不要用手撑地，顺势作后滚翻。 （分值1.0） 你未作答 标准答案： 正确

3、[判断题] 因为实验需要，可以在实验室存放大量气体钢瓶。 （分值1.0） 你未作答 标准答案： 错误

4、[判断题] 实验室钥匙的配发由实验室负责人管理，不得私自配置钥匙或借给他人使用。 （分值1.0） 你未作答 标准答案： 正确

5、[判断题] 实验过程中如发生事故，应冷静妥善地处理，尽量把事故解决在萌芽状态。如较为严重，有危及人身安全可能时，应及时撤离现场，并通知邻近实验室工作人员迅速撤离，尽快报警。 （分值1.0） 你未作答 标准答案： 正确

6、[判断题] 火灾对实验室构成的威胁最为严重，最为直接。应加强对火灾三要素（易燃物、助燃物、点火源）的控制。 （分值1.0） 你未作答 标准答案： 正确

7、[判断题] 当可燃烧液体呈流淌状燃烧时，应将灭火剂的喷流对准火焰根部由近而远并左右扫射，向前快

实验室规则

一、学生要在任课教师或实验教师带领下有秩序地进入室内，并在指定座位就坐。

二、室内要保持肃静，严禁喧闹。

三、实验仪器、试剂和设备，未经教师允许不得随意动用。 四、认真聆听教师讲解实验目的、步骤、仪器性能，实验操作方法和注意事项。

五、严格遵守实验操作规程，切实注意安全；发生意外事故要及时报告领导。

六、节约用水用电和药品，爱护仪器设备，故意和因违反操作规程而损坏仪器者，要照价赔偿。

七、废渣、废液要倒入指定容器内，不得将含酸、含碱等有害溶液倒入下水道。

八、实验完毕后必须切断电源，关闭水源、熄灭火源，将仪器摆放整齐，经教师检查验收后方可离开。

九、室内一切物品，未经教师允许，一律不得私自带出。 十、保持室内整洁卫生，实验课后，值日人员要负责清洁。

仪器室规则

一、室内要保持清洁干燥，经常通风，做好防潮保温工作，保

证仪器、药品、标本，模型等不潮、不霉、不腐、不锈、不冻。 二、仪器设备存放，要做到入柜上架、标志鲜明、科类分明，摆放科学、合理、整齐。

三、化学药品要单室存放，安装通风设施，切实防止挥发和腐蚀。易燃、易爆、剧毒药品要专库存放，并将购置日期和数量登记在案，严格管理和领用手续。

四

实验室用水知识培训

1 水的定义 2 实验室用水 3 实验室用水的制备 4 实验室用水的检验 5 实验室用水的贮存

1 水的定义：水是由氢氧2种元素组成的，水的分子 式是H2O,水中含氢量是11.17%,含氧量是88.83%。 纯净的水是无色的，无味的透明液体。在标准大 气压下，水的冰点是0摄氏度，沸点是100摄氏度，水 在4摄氏度时密度最大(1g/cm3),水在结冰时体积 膨胀，密度变小，所以冰比水轻，能浮在水面上。 一般来说，水的化学性质是比较稳定的，但在一 定条件下，水也能和多种物质发生化学反应。如：水 能和一些金属，非金属以及某些盐类等发生化学反应。

水还具有如下的化学性质： 1水的热稳定性，水对热很稳定，一般很难用加热的方法来 分解水以制取氢和氧。在200度以上加热水仅有百分之几的 水分子分解为氢和氧。 2水合作用：水分子是极性分子，当水分子遇到极性化合物 或离子化合物的正负离子时，水的偶极子将和这些化合物 的正负端或离子间产生相互吸引。于是就发生了水合作用， 形成具有一定数目配位分子的水合离子，如(Cu(H2O)4) 2+等。(Cu(H2O)4)2+从水溶液中结晶析出，即为水合结 晶的形式析出CuSO4-5H2O。

3 水的质子传递反应，