体外抗氧化活性测定方法

叶绿体的提取

一、试剂配置

1、PBS提取液：每L水依次加入MES(195.2×0.05=9.76g)、山梨糖醇(0.33×182.2=60.126g)、NaCl（0.010×58.5=0.585g）、MgCl（0.002×95=0.19g）、EDTA（292.25×0.002=0.5845g）、KH2PO（0.0005=0.1g）；4200×使用时加入ASA-Na（198.1×0.002=0.3962g）; 2、悬浮液：将PBS提取液中的MES换为238.3×0.05=11.915g的HEPES（238.3×0.05=11.915g）； 3、80%Percol：80ml原液+20ml水；40%Percol：40ml原液+60ml水；

实际配制：

PBS提取液2000ml(3个处理*2个品种*3个重复*20ml*3次=1080ml),

悬浮液100ml（3个处理*2个品种*3个重复*1ml*3次=54ml）;

80%Percol 200ml; 40%Percol 200ml.（3个处理*2个品种*3个重复*3ml*3次=162ml）

二、提取步骤

1、10g鲜样加20ml提取PBS（50mM MES PH6.1，含0.33M山梨糖醇，10

抗氧化酶（SOD、POD、CAT）活性测定方法

一、 超氧化物歧化酶（SOD）活性测定（氮蓝四唑光化还原法） 1、试剂的配制

（1）0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS，pH7.8)：

A母液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HPO4·12H2O（分子量358.14）71.7g； B母液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液：取NaH2PO4·2H2O（分子量156.01）31.2g。 分别用蒸馏水定容到1000ml。

0.05mol/L PBS（pH7.8）的配制：分别取A母液(Na2HPO4) 228.75ml，B母液(NaH2PO4) 21.25ml，用蒸馏水定容至1000ml。加入10gPVP（聚乙烯吡咯烷酮）

参考文献：李合生主编：植物生理生化实验原理和技术.高等教育出版社，2000：267～268。

（2）130mmol/L甲硫氨酸溶液：取1.399g Met用磷酸缓冲液（pH7.8）定容至100ml。网上说定容到100ML我也不懂。拜托

（3）100μmol/L EDTA-Na2溶液：取0.03721g EDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至1000ml； （4）100μM核黄素溶液：取0.0075g核黄素用蒸馏水定容至100m

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抗氧化酶（SOD、POD、CAT）活性测定方法

一、超氧化物歧化酶（SOD）活性测定（氮蓝四唑光化还原法）

1、试剂的配制

（1）0.05mol/L磷酸缓冲液(PBS，pH7.8)：

A母液：0.2mol/L磷酸氢二钠溶液: 取Na2HPO4·12H2O（分子量358.14）71.7g；

B母液：0.2mol/L磷酸二氢钠溶液：取NaH2PO4·2H2O（分子量156.01）31.2g。

分别用蒸馏水定容到1000ml。

0.05mol/L PBS（pH7.8）的配制：分别取A母液(Na2HPO4) 228.75ml，B母液(NaH2PO4) 21.25ml，用蒸馏水定容至1000ml。加入10gPVP（聚乙烯吡咯烷酮）

参考文献：李合生主编：植物生理生化实验原理和技术.高等教育出版社，2000：267～268。

（2）130mmol/L甲硫氨酸溶液：取1.399g Met用磷酸缓冲液（pH7.8）定容至100ml。网上说定容到100ML我也不懂。拜托

（3）100μmol/L EDTA-Na2溶液：取0.03721g EDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至1000ml；

（4）100μM核黄素溶液：取0.0075g核黄素用蒸馏水定容至100ml，避光保存，随用随配

β-胡萝卜素漂白法测定莲子心粗多糖抗脂质

过氧化的活性 30 mL 试管中加入0. 5 mLβ-胡萝卜素(β2caro2

毛头牛蒡子醇提物抗氧化活性研究

目的", 研究毛头牛蒡子提取物的抗氧化活性。方法",将毛头牛蒡子乙醇提取物采用溶剂萃取法, 分成极性不同的

4 个部分, 并采用DPPH 法和邻苯三酚自氧化法测定各部分的清除DPPH 自由基和超氧阴离子自由基的能力, 以测定其抗氧化活性, 并与抗坏血酸进行比较

DPPH 法抗氧化活性分析", DPPH 自由基是一种很稳定的以氮为中心的自由基, 在517 nm 处有强吸收, 其乙醇水溶液呈很深的蓝紫色, 加入受试物后,517 nm 处可以动态监测DPPH 自由基被清除的效果, 这种效果通常用对DPPH 的清除率来表示。清除率越大, DPPH 自由基清除越彻底, 受试物的抗氧化活性越强[ 6",7] 。计算清除率的公式为:

其中, A0 为未加样DPPH 溶液的原始吸

光度; A为加样后DPPH 液的吸光度; A 样为样品溶液自身的吸光度。公式中引入A0 是为了消除样品溶液本身颜色对实验结果的影响。A 0 的测定: 用移液器取2. 0 mL95% 乙醇, 再取2. 0 mL 已配制好的DPPH

研究黑蒜的抗氧化活性。对144只老龄小鼠随机分为空白组、模型组、阳性对照组(Vc组)、黑蒜低剂量组(65mg/kg)、黑蒜中剂量组(260mg／kg)、黑蒜高剂量组(650mg／kg)、白蒜低剂量组(65mg/kg)、白蒜中剂量组(260mg／kg)、白蒜高剂量(650mg／kg)组等9组,干预30d后,以溴化苯油灌喂小鼠,制造氧化损伤模型后,分别测定小鼠血液、肝脏组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物

5 8

2 0第9第期卷1 0

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科研学究

黑蒜抗氧化活性研究祝炳俏’吴海歌。刘媛媛。囤景鑫姚子昂 。,。。

(. 1上海小林制药商贸有限公司，上海 2 0 3;. 00 1 2大连大学生物工程学院，辽宁大连 16 2 ) 16 2

摘

要：究黑蒜的抗氧化活性。对 14只老龄小鼠随机分为空白组、型组、研 4模阳性对照组( )黑蒜低剂量 V组、

m(5m#g、 6 e )黑蒜中剂量. 2 0/s、￣ 6 mg )黑蒜高剂量￣ ( 5 g s、 g( k g 6 0m/ )白蒜低剂量￣ ( 5 s s、 k g 6 m/ )白蒜中剂量组 (6 s k 2 om/ k )白蒜高剂量 (5/ g .. 9组， g、 6 0ms )

278

华东理工大学学报(自然科学版)

JournalofEastChinaUniversityofScienceandTechnology(NaturalScienceEdition)

Vol.32No.32006203

　　文章编号:100623080(2006)0320278204

食用菇多糖提取物体外抗氧化性能研究

林桂兰1,　许学书1,　连文思2

(1.华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237;

2.雀巢公司上海研发中心,上海201812)

　　摘要:香菇和鸡腿菇分别经热水浸提,反复醇提、洗涤、真空干燥后得到两种多糖提取物。通过多糖抗食用油脂的氧化作用、利用Fenton反应检测对羟基自由基(?OH)的清除作用、对邻苯三酚自氧化系统产生的超氧阴离子自由基(O2-?)的清除作用以及在模拟胃液条件下清除NO2-的作用,对这两种不同来源的食用真菌多糖的体外抗氧化活性进行了研究。结果表明:两种多糖提取物都具有体外抗氧化性能,香菇多糖提取物的抗活性氧自由基能力和清除NO2-的能力优于鸡腿菇多糖提取物。

关键词:食用菇;多糖提取物;抗氧化作用;自由基;NO2-清除作用中图分类号:Q593

文献标识码:AAntioxidantActivit

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华东理工大学学报(自然科学版)

JournalofEastChinaUniversityofScienceandTechnology(NaturalScienceEdition)

Vol.32No.32006203

　　文章编号:100623080(2006)0320278204

食用菇多糖提取物体外抗氧化性能研究

林桂兰1,　许学书1,　连文思2

(1.华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237;

2.雀巢公司上海研发中心,上海201812)

　　摘要:香菇和鸡腿菇分别经热水浸提,反复醇提、洗涤、真空干燥后得到两种多糖提取物。通过多糖抗食用油脂的氧化作用、利用Fenton反应检测对羟基自由基(?OH)的清除作用、对邻苯三酚自氧化系统产生的超氧阴离子自由基(O2-?)的清除作用以及在模拟胃液条件下清除NO2-的作用,对这两种不同来源的食用真菌多糖的体外抗氧化活性进行了研究。结果表明:两种多糖提取物都具有体外抗氧化性能,香菇多糖提取物的抗活性氧自由基能力和清除NO2-的能力优于鸡腿菇多糖提取物。

关键词:食用菇;多糖提取物;抗氧化作用;自由基;NO2-清除作用中图分类号:Q593

文献标识码:AAntioxidantActivit

DPPH法测定胡萝卜素的抗氧化活性 毕业设计（论文）原创性声明和使用授权说明

原创性声明

本人郑重承诺：所呈交的毕业设计（论文），是我个人在指导教师的指导下进行的研究工作及取得的成果。尽我所知，除文中特别加以标注和致谢的地方外，不包含其他人或组织已经发表或公布过的研究成果，也不包含我为获得 及其它教育机构的学位或学历而使用过的材料。对本研究提供过帮助和做出过贡献的个人或集体，均已在文中作了明确的说明并表示了谢意。

作 者 签 名： 日 期： 指导教师签名： 日 期：

使用授权说明

本人完全了解 大学关于收集、保存、使用毕业设计（论文）的规定，即：按照学校要求提交毕业设计（论文）的印刷本和电子版本；学校有权保存毕业设计（论文）的印刷本和电子版，并提供目录检索与阅览服务；学校可以采用影印、缩印、数字化或其它复制手段保存论文；在不以赢利为目的前提下，学校可以公布论文的部分或全部内容。

作者签名： 日 期：

学位论文原创性声明

本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成

海 南 师 范 大 学

本 科 生 毕 业 论 文

题目：海南热带兰花的抗氧化活性研究

系 别： 化学系 学 院： 化学与化工学院

本科生毕业论文（设计）独创性声明

本人声明所呈交的毕业论文（设计）是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，本论文（设计）中没有抄袭他人研究成果和伪造数据等行为 。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文（设计）中作了明确的说明并表示谢意。

论文（设计）作者签名： 日期：

本科生毕业论文（设计）使用授权声明

海南师范大学有权保留并向国家有关部门或机构送交毕业论文（设计）的复印件和磁盘，允许毕业论文（设计）被查阅和借阅。本人授权海南师范大学可以将本毕业论文（设计）的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存、汇编毕业论文。

论文（设计）作者签名： 日期：

指 导 教 师 签 名： 日期：

- i -

目 录

1 引言

PTIO自由基清除：一个新颖而简单的体外抗氧化分析法

李熙灿（广州中医药大学，2017.10）

目前的体外抗氧化分析方法有数个局限性，经常导致不一致的结果。本研究通过使用PTIO自由基，建立了一种新的抗氧化实验。

经各种因素的调查后，实验方案的简述如下：在PTIO·和样品溶液中分别加入磷酸盐缓冲液（pH 7.4，50mM），分别在37°C 温育2小时，然后用分光光度法在557 nm处测定。基于20个纯化合物和30个冻干水提物的结果表明，PTIO·清除有良好的线性关系，稳定性和重现性。UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS分析提示，PTIO·遇到L-抗坏血酸时给出m/z 234。因此, 作为一种抗氧化分析法，PTIO·清除具有四种优点:（1）以氧为中心的自由基为自由基模型；（2）以生理缓冲液为溶液；（3）测量简单且直接；（4）干扰小。

它不仅可以用于评价氧化活性，还可以用于构效关系的分析。PTIO·清除过程，没有立体选择性，并且至少只涉及H +转移。

[参考文献]

Xican Li. 2-Phenyl-4,4,5,5-tetramethylimidazoline-1-oxyl 3?Oxide (PTIO?) Radical Scavengin