丝素蛋白水凝胶

丝素蛋白

一、丝素蛋白的结构基础 二、丝素蛋白的特点 三、丝素蛋白的获取 四、丝素蛋白的应用

文献一《丝素蛋白作为生物材料的基础研究》

蚕丝中的丝素蛋白作为纯天然生物高分子材料用于医用领域已经有很长历史, 而将其用于细胞培养的基质和组织工程, 是近年来丝素蛋白研究与应用的热点。丝素蛋白完全可以用作细胞生长的表面基质, 可替代常用的胶原蛋白。

本文尝试应用丝素薄膜作为贴壁依赖型动物细胞的生长表面基质, 以研究丝素薄膜作为生物材料在细胞培养上的特性。实验中以猪髋动脉内皮细胞(Po rcineiliac a r te ryendo the lia lce ll, 简称P IEC)为模型细胞, 同时用酸性成纤维生长因子(aF GF)对丝素薄膜进行处理, 以噻唑蓝(M T T)法的细胞计数测定方法, 通过与普通培养孔板上的对照实验, 观察此细胞株在丝素薄膜表面的粘附与生长等行为, 从而检验丝素薄膜的生物相容性, 并确定丝素薄膜经aF GF处理后对细胞吸附能力的强化。

丝素薄膜的制备: 将去蛹蚕茧放入煮沸的5g/L的N a2CO3 溶液中, 固液比为1∶15(g∶mL), 煮沸时间为40m in, 反复2次, 以脱除蚕丝中的丝胶蛋白。煮沸后的丝素蛋白

江苏科技大学 文献检索（研究生）

阳离子化丝素蛋白的制备方法及在

抗肿瘤缓释制剂中的应用

江苏科技大学（文献检索）

姓名：郭成 学号：142310001 院系：生物技术学院

专业：生物化学与分子生物学 指导教授：颜 辉 联系方式：18252580895

1

江苏科技大学 文献检索（研究生）

1. 检索课题

先进的载体材料是生物学研究的热点。使用这些载体可以将核酸、药物传递到细胞，实现调控细胞的生化过程，在分子细胞学、抗肿瘤治疗中有广泛的应用。这些载体材料通常是天然或人工高分子材料，如丝素、壳聚糖、多糖等。研究人员发明，当这些材料表面带上正电荷时，更容易被细胞摄入，可以达到更好的向细胞内传递物质目的。例如对桑叶多糖进行表面修饰上氨基，从而带正电荷，包裹TGF-β RNA后，能够很容易的转入到细胞内，并进行高到达。阳离子化多糖包裹抗肿瘤药物后，也能很好的进入肿瘤细胞内，起到更好的抗肿瘤效果。

由于天然多糖的制备繁琐，来源有限，并且有些天然多糖上带有蛋白，有免疫原性，因而限制了使用。人工合成的高分子物质，进阳离子化后，毒性增加。因此研究新型阳离子化材料本领域的研究热点。

丝素蛋白（SF）来源广泛，生物惰性，无免疫原性，被美国食品药品管理批准

江苏科技大学 文献检索（研究生）

阳离子化丝素蛋白的制备方法及在

抗肿瘤缓释制剂中的应用

江苏科技大学（文献检索）

姓名：郭成 学号：142310001 院系：生物技术学院

专业：生物化学与分子生物学 指导教授：颜 辉 联系方式：18252580895

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江苏科技大学 文献检索（研究生）

1. 检索课题

先进的载体材料是生物学研究的热点。使用这些载体可以将核酸、药物传递到细胞，实现调控细胞的生化过程，在分子细胞学、抗肿瘤治疗中有广泛的应用。这些载体材料通常是天然或人工高分子材料，如丝素、壳聚糖、多糖等。研究人员发明，当这些材料表面带上正电荷时，更容易被细胞摄入，可以达到更好的向细胞内传递物质目的。例如对桑叶多糖进行表面修饰上氨基，从而带正电荷，包裹TGF-β RNA后，能够很容易的转入到细胞内，并进行高到达。阳离子化多糖包裹抗肿瘤药物后，也能很好的进入肿瘤细胞内，起到更好的抗肿瘤效果。

由于天然多糖的制备繁琐，来源有限，并且有些天然多糖上带有蛋白，有免疫原性，因而限制了使用。人工合成的高分子物质，进阳离子化后，毒性增加。因此研究新型阳离子化材料本领域的研究热点。

丝素蛋白（SF）来源广泛，生物惰性，无免疫原性，被美国食品药品管理批准

血清超灵敏C反应蛋白水平

了探讨2型糖尿病患者血清超灵敏C反应蛋白(bs-CRP)水平与机体胰岛素敏感性的关系，南方医科大学检测了68例2型糖尿病患者和20名健康对照者的血清hs-CRP水平,同时检测血糖、血清胰岛素、糖基化血红蛋白(HbA1c)、尿白蛋白排泌率和血脂,并计算稳态模型胰岛素抵抗指(HOMA-IR指数)和胰岛B细胞分泌指数(HOMA-IS)以分别反映机体的胰岛素敏感性和胰岛素分泌功能发现2型糖尿病患者的血清hs-CRP水平显著高于对照,HOMA-IR指数和HOM-IS指数均低于正常对照。进一步将患者按HbA1c分为血糖控制良好组(n=42)和血糖控制欠佳组(n=23)后发现,控制欠佳组的血清hs-CRP水平显著高于控制良好组。线性相关分析显示,糖尿病患者的血清hs-CRP水平均与HbA1c、空腹血糖、体质量指数、舒张压和HOMA-IS指数呈显著正相关。可见2型糖尿病患者血清hs-CRP水平高于正常人,而且与糖尿病的发生、发展有密切的关系。

2型糖尿病患者血清碱性磷酸酶的临床意义 (pdf) 近年来随着糖尿病发病率的不断增高，人们对糖尿病的各方面研究报道也很，其中有很多是关于糖尿病患者血清酶的变化，笔者从临床实践中发

血清超灵敏C反应蛋白水平

了探讨2型糖尿病患者血清超灵敏C反应蛋白(bs-CRP)水平与机体胰岛素敏感性的关系，南方医科大学检测了68例2型糖尿病患者和20名健康对照者的血清hs-CRP水平,同时检测血糖、血清胰岛素、糖基化血红蛋白(HbA1c)、尿白蛋白排泌率和血脂,并计算稳态模型胰岛素抵抗指(HOMA-IR指数)和胰岛B细胞分泌指数(HOMA-IS)以分别反映机体的胰岛素敏感性和胰岛素分泌功能发现2型糖尿病患者的血清hs-CRP水平显著高于对照,HOMA-IR指数和HOM-IS指数均低于正常对照。进一步将患者按HbA1c分为血糖控制良好组(n=42)和血糖控制欠佳组(n=23)后发现,控制欠佳组的血清hs-CRP水平显著高于控制良好组。线性相关分析显示,糖尿病患者的血清hs-CRP水平均与HbA1c、空腹血糖、体质量指数、舒张压和HOMA-IS指数呈显著正相关。可见2型糖尿病患者血清hs-CRP水平高于正常人,而且与糖尿病的发生、发展有密切的关系。

2型糖尿病患者血清碱性磷酸酶的临床意义 (pdf) 近年来随着糖尿病发病率的不断增高，人们对糖尿病的各方面研究报道也很，其中有很多是关于糖尿病患者血清酶的变化，笔者从临床实践中发

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

凝胶层析法分离纯化蛋白质

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

【目的】掌握凝胶层析的基本原理 学习利用凝胶层析法分离纯化蛋白质的实验 技能

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

【原理】 凝胶层析也称分子筛层析、排阻层析。 是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用， 根据被分离物质的分子大小不同来进行分 离的技术。

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

凝胶过滤层析凝胶层析是按照蛋

白质分子量大小进行分离的技术，又称之凝胶 过滤、分子筛层析或排 阻层析。

单个凝胶珠本身象“筛子”。不同类型凝 胶的筛孔的大小不同。

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

带网孔的 葡聚糖珠小分子进入 葡聚糖珠内

大分子不 能进入珠 内，经珠 之间缝隙 流出

凝胶过滤层析过程示意图

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

凝胶 珠

凝胶基质

小分子 大分子

凝胶过滤层析过程示意图

凝胶层析法分离纯化蛋白质实验

总结：相对分子质量较大的物质由于直径大于凝胶网孔被完全排 阻在孔外，只能在凝胶颗粒外的空间向下流动，因此流程 较短，移动速度快；所以首先流出。 相对分子质量较小的物质由于直径小于凝胶网孔，可完全 渗透进入凝胶颗粒的网孔，在向下移动过程中，因此流程 较长，移动速率慢；所以最后流出。 中等大小的分子，它们在凝胶颗粒

凝胶层析法测定蛋白质分子质量

一、 实验目的

1、了解凝胶层析的原理及其应用。

2、通过测定蛋白质分子质量的训练，初步掌握凝胶层析技术。 二、 实验原理

凝胶是一种具有立体网状结构且呈多孔的不溶性珠状的颗粒物质。用凝胶来分离物质，主要是根据多孔凝胶对不同半径的蛋白质分子（近似于球形）具有不同的排阻效应实现的。即它是根据分子大小这一物理性质进行分离纯化的。对于某种型号的凝胶，一些大分子不能进入凝胶颗粒内部而完全被排阻在外，只能沿着颗粒间的缝隙流出柱外；而一些小分子不被排阻，可自由扩散，渗透进入凝胶内部的筛孔，而后又被流出的洗脱液带走。分子越小，进入凝胶内部越深，所走的路程越多，故小分子最后流出柱外，而大分子先从柱中流出。一些中等大小的分子介于大分子和小分子之间，只能进入一部分凝胶较大的孔隙，即被部分排阻，因此这些分子从柱中流出的顺序也介于大、小分子之间。这样样品经过凝胶层析后，分子便按照从大到小的顺序依次流出，达到分离的目的。

对于任何一种被分离的化合物在凝胶层析柱中被排阻的范围均在0~100%之间，其被排阻的程度可以用有效分配系数Kav（分离化合物在内水和外水体积中的比例关系）表示，Kav值的大小和凝胶柱床的总体积（Vt）、外水体积（V0）以

蚕丝蛋白水解液中多肽得率的测定

李琳琳 曹新志* 游见明 赵迎庆

（四川理工学院 生物工程学院，四川 自贡 643000）

摘要：用茚三酮显色法测定蚕丝蛋白质水解液中游离氨基酸的含量，15%单宁酸沉淀蛋白质水解液中的大分子蛋白质，经离心过滤后，用凯氏定氮法测定上清液中总蛋白含量，继而测定蚕丝蛋白水解液中多肽的得率。本试验以期用低成本高效率的方法测得多肽的得率，进而可以应用于工业化生产。

关键词：茚三酮显色反应 凯氏定氮 单宁酸 多肽得率 中图分类号：S88 文献标识码：A 基金项目：四川省教育厅重点项目（14ZA0207）

Determination of Yield of Peptides in Silk Protein Hydrolysates Li Lin-lin Cao Xin-zhi You Jian-ming Zhao Ying-qing （College of Bioengineering, Sichuan University of Science & Engineering, Zigong,

Sichuan 643000,China）

Abstra

蚕丝蛋白水解液中多肽得率的测定

李琳琳 曹新志* 游见明 赵迎庆

（四川理工学院 生物工程学院，四川 自贡 643000）

摘要：用茚三酮显色法测定蚕丝蛋白质水解液中游离氨基酸的含量，15%单宁酸沉淀蛋白质水解液中的大分子蛋白质，经离心过滤后，用凯氏定氮法测定上清液中总蛋白含量，继而测定蚕丝蛋白水解液中多肽的得率。本试验以期用低成本高效率的方法测得多肽的得率，进而可以应用于工业化生产。

关键词：茚三酮显色反应 凯氏定氮 单宁酸 多肽得率 中图分类号：S88 文献标识码：A 基金项目：四川省教育厅重点项目（14ZA0207）

Determination of Yield of Peptides in Silk Protein Hydrolysates Li Lin-lin Cao Xin-zhi You Jian-ming Zhao Ying-qing （College of Bioengineering, Sichuan University of Science & Engineering, Zigong,

Sichuan 643000,China）

Abstra

第22卷第1期 齐 齐 哈 尔 大 学 学 报 Vol.22,No.1 2006年1月 Journal of Qiqihar University Jan.,2006

凝胶过滤法分离纯化大豆蛋白肽

邹存媛 郑永杰 卢 鹤

（齐齐哈尔大学化学与化学工程学院，齐齐哈尔大学161006）

摘 要：本文采用中性蛋白酶AS1.398水解大豆蛋白，通过正交实验确定最佳水解条件：水解温度、pH值分别为，酶用量为6%，酶解时间为4h，此时水解度（DH）达到24.57%。并对水解48℃和7.5，底物浓度为5%（W/V）

产物进行脱苦脱色，然后采用超滤以及凝胶过滤色谱法分离分子量1200以下的小肽并收集。 关 键 词：大豆肽；酶水解；超滤；凝胶过滤

中图分类号：O658.1 文献标识码：A 文章编号：1007-984X(2005)04-0027-04

本文研究的大豆肽是指大豆蛋白质