goldengate克隆技术

浅谈克隆技术

摘要:1997年2月22日,英国罗斯林研究所的科学家维尔穆特等人宣布用体细胞克隆绵羊获得成功，在世界上引起巨大震动。一时间，克隆绵羊“多利”成为动物界最耀眼的“明星”，其“咩咩”的叫声迅速响遍全球。克隆技术的诞生无不令人拍案叫绝。

*克隆与克隆技术的概念

克隆是英文Clone一词的单译，意为无性繁殖系，即通过无性繁殖（如细胞丝分裂） 可连续传代并形成的群体，常用于细胞水平的描述。克隆技术（Cloning）则指由众多 的基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择获得目的基因或细胞的技术操作。如基因克隆是指某种目的基因的分离过程，通常是将生物材料的遗传物质如DNA以酶切成片断， 插入到载体中，通过无性繁殖（细菌或细胞的倍增）使其扩增，然后再以某种探针选择钓、取目的基因。

一、克隆

“克隆”在生物学领域有3个不同层次的含义：

1.在分子水平，克隆一般指DNA克隆(也叫分子克隆)。含义是将某一特定DNA片断通过重组DNA技术插入到一个载体(如质粒和病毒等)中，然后在宿主细胞中进行自我复制所得到的大量完全相同的该DNA片断的“群体”。

2.在细胞水平，克隆实质由一个单一的共同祖先细胞分裂所形成

拟南芥基因的图位克隆技术

拟南芥基因的图位克隆技术

浙江大学生命科学学院 徐冰

浙江杭州 310029

1 国内外研究现状

拟南芥（Arabidopsis thaliana）是一种模式植物，具有基因组小（125 Mbp）、生长周期短等特点，而且基因组测序已经完成（The Arabidopsis Genomic Initiative, 2000）。同时，拟南芥属十字花科（Cruciferae），具有高等植物的一般特点，拟南芥研究中所取得成果很容易用于其它高等植物包括农作物的研究，产生重大的经济效益，特别是十字花科中还有许多重要的经济作物，与人类的生产生活密切相关，因此目前拟南芥的研究越来越多地受到国际植物学及各国政府的重视。

从遗传学的观点来看，基因克隆的途径可概括为正向遗传学和反向遗传学两种。正向遗传学途径指的是通过被克隆基因的产物或表现型突变去进行；反向遗传学途径则指的是依据被克隆基因在染色体上的位置来实现。虽然一些模式生物（如拟南芥）的基因组测序已经完成，但还有40%的基因（在拟南芥中）的功能还是未知的。

图1 图位克隆所需努力的比较（1995年和2002年）（Jander等， 2002）

图位克隆（map-based cloning）又称定位克隆（po

原型模式(Prototype)与Delphi对象克隆技术

概述：

在这篇文件中，讲述原型模式定义、结构、应用、实现。深入讨论了Delphi中原型模式的实现方法。特别研究了原型模式的核心技术——对象克隆技术在Delphi中的实现途径。本文还探讨了对象引用复制和对象克隆的区别，以及VCL的持久对象机制、对象流化技术。

1、原型模式解说

原型模式通过给出一个原型对象来指明所要创建对象的类型，然后克隆该原型对象以便创建出更多同类型的新对象。 例如：在Delphi的IDE中，我们为设计窗体拖放了一个按钮对象。为了快速创建更多的同样字体和尺寸的按钮对象，我们可以复制该按钮（使用菜单Copy菜单或快捷键Ctrl+C），并在设计窗体多次粘贴（使用菜单Paste菜单或快捷键Ctrl+V。

设计窗体中的按钮对象是用于我们应用程序的，而IDE中提供的按钮对象创建方法（复制和粘贴）则是属于Delphi架构的。我们通过复制创建一个按钮对象时，不需要知道Delphi是如何实现的。

所要说明的是，虽然我们使用的是类似文字处理中的复制和粘贴，但复制的决不是一个按钮对象的外观（字体和尺寸等），而是整个按钮对象，包括它的属性和方法。所以，更严格讲，我们是克隆了这个对象，即得到

专题22 克隆技术

考点六十五 植物细胞工程

高考试题

1.(2013年重庆理综,T5,6分,★★☆)某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉,其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述,错误的是( ) A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害 B.在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂,可获得染色体加倍的细胞 C.出芽是细胞再分化的结果,受基因选择性表达的调控 D.生根时,培养基通常应含α萘乙酸等生长素类调节剂

点睛:本题考查植物组织培养相关知识,涉及外植体的消毒、植物体细胞杂交、细胞分化及植物生长调节剂对组织培养的影响等内容,意在考查考生的理解能力以及运用所学的知识分析问题和解决问题的能力。

解析:消毒主要是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害,A项正确;植物细胞融合是指经纤维素酶和果胶酶处理后得到的原生质体的融合,带有细胞壁的愈伤组织细胞不能诱导融合形成染色体加倍的细胞,B项错误;出芽和生根都是细胞再分化的结果,其实质是基因的选择性表达,C项正确;α萘乙酸为生长素类似物,可诱导愈伤组织生根,D项正确。 答案:B

2.(2011年江苏单科,T14,2分,★☆☆)关于现代生

检测（十九） “基因工程与克隆技术”课后强训卷

1．(2018·南充模拟)镰刀型细胞贫血症是一种单基因遗传病，患者的血红蛋白分子β-肽链第6位氨基酸谷氨酸被缬氨酸代替，导致功能异常。回答下列问题：

(1)异常血红蛋白的氨基酸序列改变的根本原因是编码血红蛋白基因的________序列发生改变。

(2)将正常的血红蛋白基因导入患者的骨髓造血干细胞中，可以合成正常的血红蛋白达到治疗的目的。此操作________(填“属于”或“不属于”)蛋白质工程，理由是该操作____________________________________。

(3)用基因工程方法制备血红蛋白时，可先提取早期红细胞中的________，以其作为模板，在________酶的作用下逆转录合成cDNA。cDNA与载体需在限制酶和________酶的作用下，拼接构建基因表达载体，导入受体菌后进行表达。

(4)检测受体菌是否已合成血红蛋白，可从受体菌中提取________，用相应的抗体进行________杂交，若出现杂交带，则表明该受体菌已合成血红蛋白。

解析：(1)患者的血红蛋白分子β-肽链第6位的谷氨酸变成了缬氨酸，此氨基酸的变化是由于控制合成血红蛋白分子的DNA的碱基序列发生了

GoldenGate安装部署及解决方案

目录

GoldenGate安装部署及解决方案 .................................................................................................. 1

1、GoldenGate 简介 ............................................................................................................... 2 2、文档约定和说明 ................................................................................................................. 5 3、GoldenGate软件安装 ........................................................................................................ 5

3.1 G

create table DATA_CHANGE_HIS (

OID NUMBER(38),

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GGSCI>目标端复制进程参数

MAP sgs_chj.*, targ

食品生物技术导论

单克隆抗体技术的应用

魏婷婷

（生命科学学院 食品科学与工程 发酵方向）

摘要：本综述包括以下内容：简要叙述了单克隆抗体发现历史；系统地阐述单克隆抗体技术的优点和生产单克隆抗体的杂交瘤技术；介绍单克隆抗体技术在食品卫生检验中的应用。 关键词：单克隆抗体 杂交瘤技术 应用领域 1 引言

单克隆抗体技术(monoclonal antibody technique)， 1975年英国科学家Milstein和Kohler所发明，并获得1984年诺贝尔医学奖。 1984 德国人G. J. F.Kohler、阿根廷人C. Milstein[3]和丹麦科学家N. K. Jerne由于发展了单克隆抗体技术，完善了极微量蛋白质的检测技术而分享了诺贝尔生理医学奖。 它是将产生抗体的单个B淋巴细胞同肿瘤细胞杂交， 获得既能产生抗体， 又能无限增殖的杂种细胞，并以此生产抗体的技术。其原理是: B淋巴细胞能够产生抗体， 但在体外不能进行无限分裂; 而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代， 但不能产生抗体。将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性。免疫反应是人类对疾病具有抵抗力的重要因素。当动物体受抗原刺激后可产生抗体。抗体的特异性取决于

GoldenGate安装部署及解决方案

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3.1 G

OGG同构(ORACLE-ORACLE)、异构(ORACLE-MYSQL)同步配置及错误解析

环境：11.2.0.3(已安装数据库实例)+OEL5.7 192.168.1.55 zlm sid:zlm11g 192.168.1.60 zlm2 sid:zlm11g

一、安装软件，配置环境，创建相关用户 1.1 下载介质并安装OGG软件

从官方网址下载最新版OGG FOR ORACLE 11g ON LINUX X86-64软件：

http://www.oracle.com/technetwork/middleware/goldengate/downloads/index.html?ssSourceSiteId=ocomen

Oracle GoldenGate V11.2.1.0.1 for Oracle 11g on Linux x86-64 (86 MB) 介质名称：ogg112101_fbo_ggs_Linux_x64_ora11g_64bit.zip

1.2 把OGG软件包复制到源端oracle主目录，创建安装目录gg11后2次解压到gg11 [oracle@zlm ~]$ ls

ogg112101_fbo_ggs_Linux_x64