土壤有效磷的测定方法

土壤中有效磷的测定 -NY/T 1121.7-2014

A 碳酸氢钠提取——钼锑抗比色法 适用于石灰性、中性土壤 PH≥6.5

方法提要

由于浸提液(0.5MNaHCO3)提高了CO32-离子的活性，使其与Ca2+形成CaCO3沉淀，从而降低了Ca2+的活性, 使一定量活性较大的Ca-P被浸出，同时也可使比较活性的Fe—P 和AI-P通过水解作用而浸出(由于碳酸盐的碱溶液，也降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。此外，NaHCO3碱溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子均能置换吸附态的磷酸盐H2PO4-。) ，从而增加了碳酸氢钠提取中性和石灰性土壤速效磷的能力。由于浸出液中Ca、Fe、Al浓度较低，不会产生磷的再沉淀；浸出液中的磷可用钼锑抗比色法定量测定。 主要仪器设备

1 千分之一电子天平； 2 恒温水浴振荡器；

3 150ml塑料瓶和50ml塑料小烧杯； 4 锥形瓶(或比色管)：50mL或25mL比色管； 5 紫外 分光光度计； 试剂

1 氢氧化钠：10%(m/V)溶液；(调节浸提剂pH至8.5)

2 碳酸氢钠浸提剂［c(NaHCO3)=0.50mol·L-1，pH

土壤全磷测定方法HClO4—H2SO4法

待测液制备：

1. 准确称取通过100目筛子的风干土样0.2500—0.500g，置于50ml凯

式瓶（或者50ml消化管）中

2. 以少量水湿润后，加入浓硫酸4ml,摇匀后，再加70-72%高氯酸1ml,

摇匀，瓶口上加一个小漏斗，通风厨静置24小时

3.

4. 置于消化炉中进行3小时消煮，待溶液澄清透明即可。 将冷却后的消化液转移入100ml容量瓶中（容量瓶中预先盛水

20-30ml），按少量多次的原则用水冲洗消化管，轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，加水定容，静置过夜

5.

6. 次日小心吸取上层澄清液进行磷的测定。 样品空白溶液制备：在样品分解的同时做一个空白实验，即不加土样

而加同样量的浓硫酸和高氯酸，与样品进行相同处理

土壤速效磷测定方法M3浸提法

M3溶液配置(1L)：

乙酸：11.5 ml

浓硝酸：0.82 ml

硝酸铵：20 g

氟化铵：0.5556g

EDTA：0.2922g

基本步骤：

1. 称取3g过2mm筛子风干土样于50ml聚已烯离心管中

2. 加入30mlM3浸提液，置于振荡机中振荡5min，振荡速度为200转，温度25℃

3. 置于离心机中离心，离心速度为8000转/min,温度为25℃，如溶液颜色很深，在离心前加入

土壤速效钾的测定

? 试剂 ：

乙酸铵溶液，[c(CH3COONH4)=1 mol2L-1]：称取77.08g乙酸铵溶于近1L水中，用稀乙酸(CH3COOH)或氨水(1：1)(NH32H2O)调节PH值为7.0，用水稀释至1L。该溶液不宜久放；

钾标准溶液[ρ(K)=100μg2mL-1]：称取在110℃烘2h的氯化钾(优级纯)0.1907g，用水溶解后定容至1L，贮于塑料瓶中保存。（乙酸铵的钾标准溶液不能久放，以免长霉影响测定结果）

? 分析步骤 ：

称取通过2mm孔径筛的风干试样5.00g于200mL塑料瓶中，加入50.00mL乙酸铵溶液(土液比为1：10)，盖紧瓶塞，摇匀，在15℃~25℃下，

150r/min~180r/min振荡30min，干过滤。滤液直接在火焰光度计上测定或经适当稀释后用原子吸收分光光度计测定。同时做空白试验。 （若样品含量过高需要稀释时，应采用乙酸铵浸提剂稀释定容，以消除基体效应）

标准曲线的绘制：分别吸取100μg2mL-1的钾标准溶液0.00、3.00、6.00、9.00、12.00、15.00mL于50mL容量瓶中，用乙酸铵溶液定容，即为浓度0、6、12、18、24、30μg2mL-1的钾标准系列溶液。以钾

有效磷的测定方法

方法1、钼锑抗比色法

解磷菌发酵菌液（用什么培养基？？）经离心处理后，取上清液，用2，4．二硝基酚作为指示剂加入1．2滴，上清液中可溶性磷酸盐可与钼锑抗显色剂反应，生成磷钼蓝，于适宜波长处进行比色测定，根据标准曲线计算出有效磷的含量，通过有效磷的浓度大小表示微生物溶磷能力的高低。

1、实验所用溶液

(1)钼锑抗贮存液的制备

首先量取硫酸153ml(p=约1.84g/ml)缓缓地倾入约400ml蒸馏水中，搅拌、冷却。然后称取lO.0g钼酸铵溶于约60℃的300m1水中，冷却。然后将上述硫酸溶液缓缓加入此钼酸铵溶液中，再加入5g/L酒石酸锑钾溶液100ml，最后用水稀释至l L，盛于棕色瓶中，放于阴暗处保存。 (2)钼锑抗显色剂

准确称量抗坏血酸1.5g，溶于lOOml钼锑抗贮存液中。此溶液必须现配现用，有效期为1d. (3)磷标准溶液(5 mg/L)

准备称取0.439g磷酸二氢钾在105℃烘箱中烘干2 h后冷却，溶于200 ml水中，加人5 m1硫酸(p约1．84g/ml)，转入l L容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线，即为磷标准液100mg/L。 取此溶液准确稀释20倍即为5 mg/L磷标准溶液，此溶液不宜久放。 2、工作曲线

土壤全磷的测定 1、测定意义：

磷的贮量及供给状况反映土壤肥力，指导施肥；为磷在土壤中的 吸附、固定、转化提供定量数据；磷作为生态环境重要因素，其迁移、富集过程是以土壤为介质，可以为研究磷的面源污染提供基础。 全磷大部分呈无机矿物态，而有机磷在短时间内是相对无效的，只有少量无机矿物态磷对作物有效 不同地区全磷含量

我国土壤中一般含量为： 0.3-1.0g.kg-1

南方酸性低于： 0.56g.kg-1 黄土母质： 0.57-0.7g.kg-1 新疆栗钙土高于： 2.0g.kg-1 酸性黄、红壤： 0.4g.kg-1 2、方法及原理

方法：硫酸、高氯酸酸溶-钼锑抗比色法

原理：在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与H2SO4 、 HClO4 强氧化剂作用下，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。

高氯酸作用，氧化有机质，分解矿物质，有助于胶状硅脱水，络合三价铁离子，抑

土壤中磷含量的测定（比色法）

一、现阶段测定土壤中磷含量主要方法有如下几种： （一）中性和石灰性土壤速效磷的测定 (0.5mol/L NaHCO3法)

石灰性土壤由于大量游离碳酸钙存在，不能用酸溶液来提取有效磷。一般用碳酸盐的碱溶液。由于碳酸根的同离子效应，碳酸盐的碱溶液降低碳酸钙的溶解度，也就降低了溶液中钙的浓度，这样就有利于磷酸钙盐的提取。同时由于碳酸盐的碱溶液，也降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。此外，碳酸氢钠碱溶液中存在着OH-、HCO3-、 CO32-等阴离子，有利于吸附态磷的置换，因此NaHCO3不仅适用石灰性土壤，也适应于中性和酸性土壤中速效磷的提取。待测液中的磷用钼锑抗试剂显色，进行比色测定。 （二）酸性土壤速效磷的测定方法A(0.03mol/L NH4F-0.025mol/L HCl法) NH4F--HCI法主要提取酸溶性磷和吸附磷，包括大部分磷酸钙和一部分磷酸铝和磷酸铁。因为在酸性溶液中氟离子能与三价铝离子和铁离子形成络合物，促使磷酸铝和磷酸铁的溶解：

3NH4F+3HF+AlPO4一H3PO4+(NH4)3AlF6 3NH4F+3HF+FePO4一H3

土壤中磷含量的测定（比色法）

一、现阶段测定土壤中磷含量主要方法有如下几种：

（一）中性和石灰性土壤速效磷的测定 (0.5mol/L NaHCO3法)

石灰性土壤由于大量游离碳酸钙存在，不能用酸溶液来提取有效磷。一般用碳酸盐的碱溶液。由于碳酸根的同离子效应，碳酸盐的碱溶液降低碳酸钙的溶解度，也就降低了溶液中钙的浓度，这样就有利于磷酸钙盐的提取。同时由于碳酸盐的碱溶液，也降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。此外，碳酸氢钠碱溶液中存在着OH-、HCO3-、 CO32-等阴离子，有利于吸附态磷的置换，因此NaHCO3不仅适用石灰性土壤，也适应于中性和酸性土壤中速效磷的提取。待测液中的磷用钼锑抗试剂显色，进行比色测定。

（二）酸性土壤速效磷的测定方法A(0.03mol/L NH4F-0.025mol/L HCl法)

NH4F--HCI法主要提取酸溶性磷和吸附磷，包括大部分磷酸钙和一部分磷酸铝和磷酸铁。因为在酸性溶液中氟离子能与三价铝离子和铁离子形成络合物，促使磷酸铝和磷酸铁的溶解： 3NH4F+3HF+AlPO4一H3PO4+(NH4)3AlF6 3NH4F+3HF+FePO4一H3

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土壤铵态氮的测定方法

氨氮（NH3-N）以游离氨（NH3）或铵盐（NH4+）形式存在于土壤中，两者的组成比取决于水的pH值。当pH值偏高时，游离氨的比例较高。反之，则铵盐的比例为高。

土壤中氨氮的来源主要为土壤中含氮有机物受微生物作用的分解产物，某此外，在无氧环境中，水中存在的亚硝酸盐亦可受微生物作用，还原为氨。在有氧环境中，水中氨亦可转变为亚硝酸盐、甚至继续转变为硝酸盐。 1． 方法的选择

氨氮的测定方法，通常有纳氏比色法、苯酚-次氯酸盐（或水杨酸-次氯酸盐）比色法和电极法等。纳氏试剂比色法具操作简便、灵敏等特点，水中钙、镁和铁等金属离子、硫化物、醛和酮类、颜色，以及浑浊等干扰测定，需做相应的预处理，苯酚-次氯酸盐比色法具灵敏、稳定等优点，干扰情况和消除方法同纳氏试剂比色法。电极法通常不需要对水样进行预处理和具测量范围宽等优点。氨氮含量较高时，尚可采用蒸馏﹣酸滴定法。 2．水样（土壤溶液）的保存

水样采集在聚乙烯瓶或玻璃瓶内，并应尽快分析，必要时可加硫酸将水样酸化至pH<2，于2—5℃下存放。酸化样品应注意防止吸收空气中的氮而遭致污染。

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预 处 理

水样带色或浑浊以及含其它一些干扰物质，影响氨氮的测定。为此，在分析时需做适当的预

关于有机磷和有机氯的检测方法!!!

水和土壤质量 有机磷农药的测定

气相色谱法 GB/T 14552-93

Water and soil quality—Determination of organophosphorus pesticides—Gas chromatography

1 适用范围

1.1 本方法适用于地面水、地下水、土壤中速灭磷(Mevinphos)、甲拌磷(Phorate)、二嗪磷(Diazinon)、异稻瘟净(IBP)、甲基对硫磷

(Parathion-methyl)、杀螟硫磷(Fenitrothion)、溴硫磷(Bromophos)、水胺硫磷(Isocarbophos)、稻丰散(Phenthoate)、杀扑磷(Methidathion)多组分残留量的测定。

1.2 本方法采用丙酮加水提取、二氯甲烷萃取、凝结法净化、气相色谱氮磷检测器测定。

1.3 本法的最低检测浓度为0.0001～0.0029mg／kg。 2 试剂和材料 2.1 载气和辅助气体

2.1.1 载气：氮气，纯度99.9％，经去氧管过滤，氧的含量小于5ppm。 2.1.2 燃烧气：氢气。 2.1.3 助燃气：空气。

2.2 配制标准样品和试样预处理的试剂和材料

使用的试剂一般系分析纯

土壤酶测定方法

芳基酰胺酶 Arylamidase （EC 3.4.11.2）

试剂：

1、THAM缓冲液（0.1 M，pH 8.0）：2.44 g 三羟甲基氨基甲烷溶于50 mL水中，用0.05 M H2SO4滴定调节pH，加水稀释溶液至200 mL。

2、L-leucine β-naphthylamide solution L-亮氨酸β-萘胺（8.0 mM）(2 mM)：称取0.2342 g L-亮氨酸β-萘胺盐酸盐溶于水，定容至100 mL。 3、Ethanol 乙醇：（95%）

4、Acidified ethanol 酸化乙醇（0.26 M HCl）：4.32 mL浓HCl加入乙醇中，用乙醇定容至200 mL。

5、p-Dimethylaminocinnamaldehyde solution 对二甲氨基肉桂醛溶液 (0.6 mg/mL)：0.12 g 对二甲氨基肉桂醛溶于乙醇，用乙醇定容至200 mL。 6、标准液β-萘胺溶液（β-naphthylamine）（125 ug/mL）：称取12.5 mg β-萘胺，75 mL蒸馏水，5 mL乙醇，用蒸馏水定容至100 mL。

7、β-萘胺标准曲线：分别吸取1，2，3，4，5，6 mL标