碱性磷酸酶在临床上的应用

碱性磷酸酶特性及其应用的研究进展

王秋颖

(河北旅游职业学院,河北承德 067000)

摘要:碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)是一种非特异性磷酸单酯酶,能催化磷酸单酯的水解反应,产生无机磷酸和相应的醇、酚或糖,也能催化磷酸基团的转移反应。A P广泛存在于微生物和动物体内,在磷生物地球化学循环过程中有重要作用,并广泛应用于诊断学、生物化学及分子生物学等领域。作者对碱性磷酸酶的研究历史、催化作用机制及其应用进行了综述。

关键词:碱性磷酸酶;非特异性磷酸单酯酶;催化作用机制

中图分类号:Q50 文献标识码:A 文章编号:1671 7236(2011)01 0157 04

碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,EC3.1.3. 1,AP)是非特异性磷酸单酯酶,可以催化几乎所有的磷酸单酯的水解反应,生成无机磷酸和相应的醇、酚、糖等,还可以催化磷酸基团的转移反应,且大肠杆菌A P还是一种依赖亚磷酸盐的氢化酶(Yang 等,2004)。AP存在于除高等植物外几乎所有的生物体内,可直接参加磷代谢,在钙、磷的消化、吸收、分泌及骨化过程中发挥了重要的作用。1911年Levene等、1912年Grosser等分离到(

妊娠晚期孕妇血清碱性磷酸酶岩藻糖苷酶含量变化

及意义

［摘nbsp;nbsp;要］nbsp;目的：测定妊娠晚期孕妇血清中碱性磷酸酶(ALP)、岩藻糖苷酶(AFU)的含量，以探讨其含量变化在妊娠晚期中的意义。方法：实验组190

［摘要］目的：测定妊娠晚期孕妇血清中碱性磷酸酶(ALP)、岩藻糖苷酶(AFU)的含量，以探讨其含量变化在妊娠晚期中的意义。方法：实验组190例为孕期32周～40周待产孕妇，对照组80例为健康查体者，分别检测血清ALP、AFU的含量。结果：实验组血清ALP、AFU的含量较对照组差异有显著性(P<0.01)，并随孕周的增加ALP、AFU的含量也有所增加。结论：血清ALP、AFU的活性检测，可以作为孕妇在妊娠晚期胎盘、胎儿动态观察的指标。

［关键词］碱性磷酸酶；αL岩藻糖苷酶；妊娠晚期

血清碱性磷酸酶(ALP)在临床上主要用于骨骼、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断，而αL岩藻糖苷酶(AFU)作为原发性肝癌(PHC)的特异性及诊断性血清标志物［1］也愈来愈多的被临床所接受和应用。在临床工作中我们又发现在孕妇的妊娠晚期，血清ALP、AFU含量均有所增高，对此我们做了一些相关实验，来探讨一下妊娠晚期血清ALP、AFU的含量变化以及临床意义。

1 对象与方法

1.1 对象实验组均为我院待产的妊娠32周～40周的孕妇，共190例，平均年龄25岁～30岁，经B超、肝功能化验排除肝胆疾患及女性肿瘤，

4.磷酸酶测定(磷酸苯二钠比色法)： 1、试剂配制 （1）甲苯

（2）磷酸笨二钠：称取6.75g磷酸笨二钠（C6H5PO4Na2.2H2O）溶于水，并稀释至1L（1毫升含25mg酚） （3）缓冲液

（4）pＨ9.0硼酸盐缓冲液： 硼酸盐缓冲液（pH9.0）

A：0.05M硼砂溶液：19.07g硼砂（Na2B4O710H2O）溶于1000mL蒸馏水中 B：0.2M硼酸溶液：12.37g硼酸（H3BO3）溶于1000mL蒸馏水中 硼酸盐缓冲液（pH9.0）：80mLA+20mLB混匀即得

缓冲溶液配制：

(1)酸性磷酸酶:醋酸盐缓冲液(pH=5.0)

A：0.2M醋酸钠溶液：16.4g 无水醋酸钠（C2H3O2Na）溶于1000mL蒸馏水中，或是27.2g三水醋酸钠（C2H3O2Na.3H2O）溶于1000mL水中。 B：0.2M醋酸溶液：11.55mL醋酸定容于1000mL 醋酸盐缓冲液(pH=5.0)：7mLA＋3mLB混合即得 （2）碱性磷酸酶：硼酸盐缓冲液（pH10.0） 硼砂－氢氧化钠缓冲液（pH10.0）：

A：硼砂液：19.072g硼砂溶于1000mL蒸馏水中

B：氢氧化钠溶液：4g氢氧化钠溶于1000mL蒸馏水中

50mLA＋4

钙调磷酸酶抑制剂

（一）器官移植排斥反应

1、移植排斥反应

人体的免疫系统对各种致病因子有着非常完善的防御机制，能够对细菌、病毒、异物、异体组织、人造材料等“异己成分”进行攻击、破坏、清除，这种复杂的免疫学反应是人体非常重要的一种保护机制。受者进行同种异体组织或器官移植后，外来的组织或器官等移植物作为一种“异己成分”被受者免疫系统识别，后者发起针对移植物的攻击、破坏和清除，这种免疫学反应就是移植排斥反应（transplant rejection）。移植排斥反应是影响移植物存活的主要因素之一。

移植排斥反应是非常复杂的免疫学现象，涉及细胞和抗体介导的多种免疫损伤机制，发生原因主要是受体和移植物的人类白细胞抗原HLA（human leucocyte antigen）不同。因此，供者与受者HLA的差异程度决定了排异反应的轻或重。除同卵双生外，二个个体具有完全相同的HLA 系统的组织配型几乎是不存在的，因此在供受者进行配型时，选择HLA配型尽可能地接近的供者，是减少异体组织、器官移植后移植排斥反应的关键

2、发病机制

排斥反应的发生机制主要包括细胞免疫和体液免疫两个方面。临床最常见的急性排斥反应主要由细胞免疫介导，而超急性排斥反应和慢性排斥反应主要由

阿维菌素在兽医临床上的应用

阿维菌素（Arermectin）是由阿佛曼链霉菌发酵产生的一种大环内脂类抗生素。该药对多种家畜及家禽等动物的线虫、蜘蛛昆虫类等体内、外寄生虫均有很强的驱除作用。该药具有广谱、高效、安全、使用方便等优点，是目前兽医临床上最佳的抗寄生虫新药之一，其剂型有片剂、针剂、粉剂、口服乳剂、阿维菌素与其它驱虫药合剂，并有缓释剂用于临床的报道。 一 阿维菌素抗寄生虫机理

其机理与触杀型和内吸型作用机理不同。线虫、蜘蛛昆虫类寄生虫的神经传递介质为γ—氨基丁酸（GABA），该传递介质在生物体内的功能是传递抑制性神经信号，阿维菌素抗寄生虫机制主要表现为对GABA 的激动剂作用，促进GABA的释放，并在神经交接处促进GABA与特殊感受器结合，从而阻断了线虫神经元之间和节肢动物神经末梢与肌细胞间的神经冲动传导，使寄生虫麻痹致死。虽然哺乳动物中枢神经系统传导递质也为GABA，但由于血脑屏障的作用，阻断了阿维菌素的进入，因而对哺乳动物并不产生生理影响。

吸虫、绦虫不具有GABA神经传导介质，因此阿维菌素对吸虫、绦虫无驱除作用。

二 兽医临床应用

1988年12月新疆首次将阿维菌素应用于兽医临床，其产品为美国默沙东药厂生产的害获灭（Ivome

酸性磷酸酶Km及Vmax值测定 酸性磷酸酶Km及Vmax值测定 Km 清洗试管24支 清洗试管24支 24

一、概述 酸性磷酸酶： 酸性磷酸酶：催化磷酸单酯的水解反应 存在于人的肝脏， 存在于人的肝脏，前列腺等处 植物中以发芽的种子中含量最为丰富。 植物中以发芽的种子中含量最为丰富。

是生物体中重要的一种酶类， 是生物体中重要的一种酶类，为某些疾病的检测 指标。 指标。

二、实验原理酶液 磷酸苯二钠 苯酚 + 磷酸氢二钠

folin-酚测定酚的浓度 酚测定酚的浓度计算出反应速度(用产物生成量/min来表示) 计算出反应速度(用产物生成量 来表示) 来表示

根据双倒数法计算出Km及Vmax 及 根据双倒数法计算出

V=

Vmax [S] Km + [S]

三、实验步骤： 实验步骤：

1、豆芽中的酸性磷酸酶的粗提取 2、制作酶反应时间与产物生成量的关系曲线 3、制作酚标准曲线 [S]与 4、[S]与V0关系实验 双倒数作图法计算Vmax Vmax和 5、双倒数作图法计算Vmax和Km

blank

buffer substrate enzyme Color developed Certain Time Stop the reaction

生化实验课老

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磷酸酶项目

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关于编制磷酸酶项目可行性研究报告编制

说明

（模版型）

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核心提示：

1、本报告为模板形式，客户下载后，可根据报告内容说明，自行修改，补充上自己项目的数据内容，即可完成属于自己，高水准的一份可研报告，从此写报告不在求人。

2、客户可联系我公司，协助编写完成可研报告，可行性研究报告大纲（具体可跟据客户要求进行调整）

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目 录

第一章 总 论 ............................................... 1

1.

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目 录

第一章 总 论 ............................................... 1

1.

磷酸盐在香肠中的应用

摘要：本文介绍了磷酸盐及其在香肠中的应用。 关键字：磷酸盐 香肠

1 磷酸盐

1.1

简介

目前我国已批准使用的磷酸盐共8种，包括三聚磷酸钠、六偏磷酸钠、焦磷酸钠、磷酸三钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、酸式焦磷酸钠、焦磷酸二氢二钠等。在食品中添加这些物质有助于食品品种的多样化，改善其色、香、味、形，保持食品的新鲜度和质量，并满足加工工艺过程的需求。它们是很重要的品质改良剂。 1．2 作用及用途 1.2．1 持水作用

磷酸盐的磷酸根离子具有螯合作用，能够螯和钙、镁、铁、铜等金属离子。肉中加入磷酸盐后，可以释放出大量的阴离子基团，这些基团很快的作用于影响肉的保水性的钙、镁等阳离子，形成稳定的结合物，这样就把带负电荷的羧基释放出来，增加了负电荷的相互斥力，破坏了蛋白质结构中的主体肽链，使得结构松弛，增加了吸水力。聚酸盐是亲水性很强的水分保持剂，它能很好地使食品中所含的水分稳定下来。其持水性的好坏，与磷酸盐的种类、添加量、食品的pH值、离子强度等因素有关。对香肠及海产品而言，持水能力最好的是焦磷酸盐，其次为三聚磷酸盐，随着链长的增加，多聚磷酸盐的持水能力将减弱。 1.2.2 增加肉中的离子强度

肌球蛋白溶于水易成凝胶，在

磷酸盐在香肠中的应用

摘要：本文介绍了磷酸盐及其在香肠中的应用。 关键字：磷酸盐 香肠

1 磷酸盐

1.1

简介

目前我国已批准使用的磷酸盐共8种，包括三聚磷酸钠、六偏磷酸钠、焦磷酸钠、磷酸三钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、酸式焦磷酸钠、焦磷酸二氢二钠等。在食品中添加这些物质有助于食品品种的多样化，改善其色、香、味、形，保持食品的新鲜度和质量，并满足加工工艺过程的需求。它们是很重要的品质改良剂。 1．2 作用及用途 1.2．1 持水作用

磷酸盐的磷酸根离子具有螯合作用，能够螯和钙、镁、铁、铜等金属离子。肉中加入磷酸盐后，可以释放出大量的阴离子基团，这些基团很快的作用于影响肉的保水性的钙、镁等阳离子，形成稳定的结合物，这样就把带负电荷的羧基释放出来，增加了负电荷的相互斥力，破坏了蛋白质结构中的主体肽链，使得结构松弛，增加了吸水力。聚酸盐是亲水性很强的水分保持剂，它能很好地使食品中所含的水分稳定下来。其持水性的好坏，与磷酸盐的种类、添加量、食品的pH值、离子强度等因素有关。对香肠及海产品而言，持水能力最好的是焦磷酸盐，其次为三聚磷酸盐，随着链长的增加，多聚磷酸盐的持水能力将减弱。 1.2.2 增加肉中的离子强度

肌球蛋白溶于水易成凝胶，在