硝化细菌怎么培养

硝化细菌 -生态系统中的生产者

基本简介

硝化细菌（Nitrifying bacteria）是化能生物，自养需氧型细菌，以二氧化碳为碳源，通过代谢将氨或铵盐氧化成硝酸盐。可以用不含有机碳的培养基培养。

硝化细菌属于自养性细菌，可以看做生产者，它包括两种完全不同的代谢群：亚硝酸菌属( nitrosomonas ) 及硝酸菌属( nitrobacter )，它们包括形态互异的杆菌、球菌和螺旋菌。亚硝酸菌包括亚硝化单胞菌属、亚硝化球菌属、亚硝化螺菌属和亚硝化叶菌属中的细菌。硝酸菌包括硝化杆菌属、硝化球菌属和硝化囊菌属中的细菌。两类菌均为专性好气菌，在氧化过程中均以氧作为最终电子受体。大多数为专性化能自养型，不能在有机培养基上生长，例如亚硝化单胞菌（Nitrosomonas）、亚硝化螺菌（Ni-trosospira）、亚硝化球菌（Nitrosococcus）、亚硝化叶菌（Ni-trosolobus）、硝化刺菌（Nitrospina）、硝化球菌（Nitrococcus）等。只有少数为兼性自养型，也能在某些有机培养基上生长，例如维氏硝化杆菌（Nitrobacterwinogradskyi）的一些品系。

从形态上看，也有多样，如球形、杆状、螺旋形等，但均为无

反硝化细菌产品详细简介

反硝化细菌产品详细介绍

主要成分：反硝化细菌≥100亿/克，载体等。性状：本品为黄褐色粉末，有特殊的发酵味。

特点：采用优良反硝化菌株经特殊工艺发酵而成。菌株反硝化能力强，能够以亚硝态氮和硝态氮作氮源，活化简单，繁殖迅速，作用效果显著，24小时可见效。针对养殖水体亚硝酸盐偏高的情况有特效；针对藻类过度繁殖的水体能够大量消耗氮素营养，切断藻类氮素营养，维护良好水色；菌株在溶氧充足及厌氧条件下均可生存并进行反硝化反应，优化底质的物理、化学环境。

主要作用：

1、还原水体中的亚硝酸盐，使之生成无害的氮气，解除亚硝酸盐的危害。

2、消耗氮素营养，抑制藻类过度繁殖，净化水体。

3、抑制致病菌。

4、改良底质。

推荐用法：

1、用30倍重量水浸泡本品200-500克/亩·米水深3小时后，全池泼洒。 适用范围：

①各种海、淡水养殖水体亚硝态氮含量超标。

②藻类过度繁殖，水体透明度太低，水色太浓。

③底质恶化，长泥皮、青苔。

④老化塘。

2、养殖期间定期（7-15天200-500克/亩·米水深）使用能够有效预防和控制亚硝酸盐危害。

3、针对养殖水体亚硝酸盐比较高时，用500克红糖配合1包反硝化细菌加水浸泡12小时以上，每包可用1.5亩，上午10点

硝化细菌分子生态学研究进展硝化细菌分子生态学研究进展

第14卷第5期

2007年9月

　　　　　中国水产科学

Vol.14No.5

JournalofFisherySciencesofChina

September2007

硝化细菌分子生态学研究进展马英1,钱鲁闽2,王永胜2,吴成业1

(11集美大学水产学院,福建厦门361021;21国家海洋局第三海洋研究所,福建厦门361021)

摘要:硝化细菌在促进水域生态系统的氮循环、生态学研究的意义,,,并对中国的研究现状进行了分析。结合作者的工作实践,,为养殖环境的[(5-879]关键词:硝化细菌;中图分类号:X17:A　　　文章编号:1005-8737-(2007)05-0872-08

　　硝化作用在N素循环中扮演着重要角色。生研究的突出特点是不需纯化培养,可以直接分析环

物圈中各个生态系统的氮素循环一般通过生物固境样品,灵敏度高,而且由于这种方法是从分子水平氮,以氨的形式输入氮素;经过同化、氨化、硝化、异来认识生物物种分化的内在原因和物质基础,因而化性硝酸盐还原等生物转化作用及其相伴的迁移运更具科学性。此外,由于硝化细菌中的主要类群(如动;最终借助反硝化作用,以氮气的形式输出氮素。β-变形菌亚纲的氨氧化菌)在系统进

菌落

定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。 菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性。 2、细菌在液体培养基中的生长现象 混浊

沉淀：多见于链状排列的细菌。 菌膜：多见于厌氧菌。

3、细菌在半固体培养基中的生长现象 有鞭毛细菌：

在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘模糊。 无鞭毛细菌：

只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。

生化试验鉴定：糖发酵试验、淀粉实验、油脂水解试验、吲哚实验、M.R.及V.P的原理及方法。

1.淀粉水解试验

1.将固体淀粉培养基熔化后冷却至50℃左右，无菌操作制成平板。 2.用记号笔在平板底部划成4部分。

3.将枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌分别在不同的部分点种，在平板的反面分别在4部分写上菌名。

4将平板倒置在37℃温箱中培养48h。

5观察各种细菌的生长情况，打开平板盖子，滴入少量卢氏碘液于平板中，轻轻旋转平板，使碘液均匀铺满整个平板。如菌苔周围出现无色透明圈，说明淀粉已被水解，为阳性。透明圈的大小可初步判断该菌水解淀粉能力的强弱，即产生胞外淀粉酶活力的高低。 2油脂水解试验

1将熔化的固体油脂培养基冷却至50℃左右时，充分摇荡

细菌培养实验报告

篇一：培养基的制备与灭菌实验报告

陕西师范大学远程教育学院

生物学实验报告

报告题目培养基的制备与灭菌

姓 名 刘 伟

学 号

专 业 生 物 科 学

批次/层次

指导教师

学习中心培养基的制备与灭菌

一、目的要求

1. 掌握微生物实验室常用玻璃器皿的清洗及包扎方法。

2. 掌握培养基的配置原则和方法。

3. 掌握高压蒸汽灭菌的操作方法和注意事项。

二、基本原理

牛肉膏蛋白胨培养基：

是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供细菌生长繁殖之用。 高压蒸汽灭菌：

主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。将灭菌的物品放在一个密闭和加压的灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅内水沸腾而产生蒸汽。待蒸汽将锅内冷空气从排气阀中趋尽，关闭排气阀继续加热。此时蒸汽不溢出，压力增大，沸点升高，获得高于100℃的温度导致菌体蛋白凝固变性，而达到灭菌的目的。

三、实验材料

1. 药品：牛肉膏、蛋白胨、nacl、琼脂、1mol/l的naoh和hcl溶液。

2. 仪器及玻璃器皿：天平、高压蒸汽灭菌锅、移液管、试管、烧杯、量筒、三

角瓶、培养皿、玻璃漏斗等。

3. 其他物品：药匙、称量纸、ph试纸、记号

光合细菌的培养及应用方法

光合细菌(简称PSB)是地球上最早出现具有原始光能合成体系的原核生物，是一大类在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称，广泛存在于地球生物圈的各处。光合细菌在水产养殖上的应用主要有以下五个方面：作为养殖水质净化剂；作为饲料添加剂；用于鱼 、虾、贝幼体的培育；作为动物性生物饵料的饵料；防治鱼病。 一、培养工具的消毒方法

1．加热消毒法：利用高温杀死微生物的方法。

（1）直接灼烧：此法可直接把微生物烧死，灭菌彻底，但只适用于小型金属或玻璃工具的消毒。 （2）煮沸消毒：一般煮沸5～10分钟，适用于小型容器、工具的消毒。 （3）烘干箱消毒：亦称为恒温干燥箱消毒法。

2．化学药品消毒法：适用在批量培养中，大型容器、工具、玻璃钢水槽和水泥池中。 （1）酒精：浓度为70％的酒精常用于中、小型容器的消毒。用纱布蘸酒精在容器、工具的表面涂抹，10分钟后，用消毒水冲洗两次即可。

（2）高锰酸钾：按300ppm配成高锰酸钾溶液，把洗刷洁净的容器、工具放在溶液中浸泡5分钟，取出，再用消毒水冲洗2次～3次即可。 二、光合细菌的培养条件

1、 营养条件

光合细菌细胞体构成元素主要有：碳、氢、氧、氮、磷、钾、钠、镁、钙、硫和

1 空气细菌培养的采样方法

检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。此法简便，目前大部分医疗单位采用。

在消毒处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是：空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降，在室内各采样点处放好营养琼脂平板，采样高度距地面0.8～1.5m，采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。 2 细菌数的计算方法

细菌总数（cfu/m3=4500N/A×T）

式中A=平板面积（cm2） T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数（cfu）

这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表面，5min内能落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。

3 空气消毒效果和污染状况的评价

空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细

1 空气细菌培养的采样方法

检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。此法简便，目前大部分医疗单位采用。

在消毒处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是：空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降，在室内各采样点处放好营养琼脂平板，采样高度距地面0.8～1.5m，采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。 2 细菌数的计算方法

细菌总数（cfu/m3=4500N/A×T）

式中A=平板面积（cm2） T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数（cfu）

这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表面，5min内能落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。

3 空气消毒效果和污染状况的评价

空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细

一株反硝化光合细菌的生物学特性及系统发育分析

摘要:【目的】养殖水体中亚硝酸盐的过量积累会对养殖生物产生毒害作用，应用脱氮细菌去除亚硝酸盐是养殖水质调控的重要手段之一，本文意在得到一株高效去除亚硝酸盐的光合细菌。【方法】采用软琼脂稀释法分离纯化光合细菌菌株，通过电镜观察、生理生化试验研究其生物学特性、依据 16S rDNA 和光合反应中心 M 亚基基因(Gene coding for photosynthetic reaction center subunit M，pufM)序列对其做系统发育分析。【结果】从淡水养殖塘中分离筛选到一株高效还原亚硝氮的光合细菌菌株 wps。该菌株为革兰氏阴性菌，细胞杆状，大小为 0. 4 － 0. 6μm × 1. 5 － 4. 0 μm，极生丛生鞭毛，片层状光合内膜，兼性厌氧光照条件生长，单菌落及液体培养物呈红色，含细菌叶绿素 a 和类胡萝卜素。最适生长 pH 范围为 5. 5 － 8. 5，最适生长盐度范围为0 － 2% ，最适生长温度范围为 25℃ － 38℃ 。菌株 wps 与 Rhodopseudomonas palustris 的 16S rDNA 序列相似性为 98. 9% ，光合反应中心 M 亚

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我院小儿血液细菌培养及药敏分析

作者：王美烨

来源：《中国实用医药》2015年第01期

【摘要】 目的 了解本院小儿血液细菌培养的分布和生长状况以及对药物敏感的分析情况。方法 对本院血培养检出菌株进行定性分析。对阳性菌株进行鉴别检验和体外药物敏感试验。结果 小儿血液细菌培养的阳性率为37.17%。分离菌株中， G+菌占54.7%， 其中表皮葡萄球菌占43.8%， 位于第一位。易产生耐药的微球菌和肠球菌分别占17.3%、4.1%， 分别居于第三、五位。结论 小儿血液感染病原菌种类多， 耐药性差异大， 耐药率高。 【关键词】 血液细菌；耐药性；药敏分析

败血症是严重威胁少年儿童健康的三大疾病之一， 平均死亡率为28%～37%， 尤其是耐药菌株种类和数量的增加， 使得感染患儿的有效治疗变得十分困难[1， 2]。败血症的临床表现没有特异性， 目前临床上仍以血液培养阳性为诊断标准[3， 4]。为了解败血病小儿血病原菌培养分布和对抗生素的耐药情况， 文章对本院426例血液培养阳性患儿的病原菌分布及药敏情况进行研究， 以便在临床上选择最佳的治疗方案。