淋巴细胞组织细胞生活的环境

第九章 B淋巴细胞新乡医学院免疫学教研室E-mail: myx939@

本章要点1. B细胞表面的主要分子 2. B细胞的亚群分类

3. B细胞的功能

B淋巴细胞简称B细胞，是由哺乳动物骨髓 ( bone marrow )或鸟类法氏囊(bursa of Fabricius)中的淋巴样干细胞分化成熟而来， 能产生和分泌抗体的一类细胞。 B细胞 浆细胞

第一节 B细胞的分化发育抗原非依赖阶段：在骨髓

成熟B细胞

未成熟细胞

前B细胞

祖B细胞 淋巴干细胞

抗原依赖阶段：外周淋巴器官 抗原 成熟B细胞 活化B细胞 记忆B细胞

浆细胞 胞浆Ig

一、BCR基因重排(VDJ重排)

二、B细胞在中枢免疫器官中的发育IL-7RIL-7 Late pro-B

Early pro-B

Pre-B

Stromal cell

分期(骨髓内)祖B细胞(pro-B)(重链基因重排)

重链μ胞质

轻链

表面标 志

前B细胞(pre-B)(轻链基因重排)

μ μ μ+δ

替代轻链 Vpre-B,λ5 κ或λ κ或λ

类Ig mIgM mIgM mIgD

未成熟B细胞(immature-B)(轻链基因重排、阴性选择)

成熟B细胞(mature-B)

三、B细胞中枢耐受的形成BImmature B cell

克隆清除

YImmat

T 淋巴细胞

徐琦

新疆医科大学免疫学教研室T淋巴细胞

掌握：熟悉：了解：胸腺、骨髓的微环境；

TCR复合物复合物的组成和功能；

T细胞亚群和功能以及Th细胞亚群的转换和意义；T 细胞的发育；

T 细胞表面分子及其功能；?

?

?

本章主要内容

T细胞的发育

T细胞表面分子及其作用

T细胞分类和功能

T细胞的发育

PHSC （多能造血干细胞）cell

DN（双阴细胞）CD4-CD8-T细胞

Pro-T

骨髓

胸腺

DP（双阳细胞）CD4+CD8+T细胞

SP（单阳细胞）CD4+CD8-T细胞

或CD4-CD8+T细胞T细胞库特性

MHC限制性

对自身抗原的耐受性

外周淋巴器官

T细胞在胸腺发育的三个阶段

骨髓：pro-T

第一阶段：DN

CD4-CD8-

第二阶段：DP

CD4+CD8+

第三阶段：SP

CD4+CD8-或CD4-CD8+

T细胞在胸腺中获得的三个特性

?

功能性TCR的表达(包括CD3的表达)：pro-T→pre-T(DN)→DP→SP自身的MHC限制性：阳性选择DP→SP

自身耐受性：阴性选择DP→SP→外周T细胞

?

?

阳性选择阴性选择(positive selection)(negative selection)发生场所胸腺皮质胸腺皮质→髓质参与的基质细胞胸腺上皮细胞与自身MHC分子过高/

T 淋巴细胞

徐琦

新疆医科大学免疫学教研室T淋巴细胞

掌握：熟悉：了解：胸腺、骨髓的微环境；

TCR复合物复合物的组成和功能；

T细胞亚群和功能以及Th细胞亚群的转换和意义；T 细胞的发育；

T 细胞表面分子及其功能；?

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本章主要内容

T细胞的发育

T细胞表面分子及其作用

T细胞分类和功能

T细胞的发育

PHSC （多能造血干细胞）cell

DN（双阴细胞）CD4-CD8-T细胞

Pro-T

骨髓

胸腺

DP（双阳细胞）CD4+CD8+T细胞

SP（单阳细胞）CD4+CD8-T细胞

或CD4-CD8+T细胞T细胞库特性

MHC限制性

对自身抗原的耐受性

外周淋巴器官

T细胞在胸腺发育的三个阶段

骨髓：pro-T

第一阶段：DN

CD4-CD8-

第二阶段：DP

CD4+CD8+

第三阶段：SP

CD4+CD8-或CD4-CD8+

T细胞在胸腺中获得的三个特性

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功能性TCR的表达(包括CD3的表达)：pro-T→pre-T(DN)→DP→SP自身的MHC限制性：阳性选择DP→SP

自身耐受性：阴性选择DP→SP→外周T细胞

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阳性选择阴性选择(positive selection)(negative selection)发生场所胸腺皮质胸腺皮质→髓质参与的基质细胞胸腺上皮细胞与自身MHC分子过高/

一、淋巴细胞转化试验（MTT）

（一）原理：

四甲基偶氯唑盐（MTT）可作为线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时，线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成紫兰色的甲臢，将结晶的甲臢溶解释放后，可根据所测的OD值反映活细胞的数量和活性，从而推知待测样品的水平。

（二）材料：

MTT、电子天平、PBS液、二甲基亚砜、无菌针头过滤器、细胞计数板、台盼兰、无菌操作台，CO2培养箱，酶标仪，－20℃冰箱。用称取50mg的MTT，溶于10ml后，终浓度为5mg/ml，过滤除菌，无菌EP管分装，－20℃避光保存。丝裂原：PHA、ConA、PWM或其他丝裂原

（三）方法： 1、脾细胞制备：

（1）小鼠颈椎脱臼处死，75%乙醇浸泡3分钟，取出小鼠置于无菌纸上，左腹侧朝上；

（2）在小鼠左腹侧中部剪开小口，撕开皮肤，暴露腹壁，可见红色长条状脾脏；

（3）在脾脏下侧提起腹膜，剪开后上翻，暴露脾脏，用镊子提起脾脏，眼科剪分离脾脏下面的结缔组织，取出脾脏。放入盛有5ml Hanks液的培养皿中；

（4）制备脾细胞悬液

①钢网研磨法：无菌取脾，将脾脏放置不锈钢网（100或200目）上，置于盛有适量无菌Hanks液的小平皿中，用镊子轻轻将脾撕碎，用

项目十八 B淋巴细胞功能检测

一、溶血空斑试验 (Plaque forming cell assay)

【实验原理】

将SRBC免疫动物，隔一定时间取其脾脏制成细胞悬液，当与SRBC混合孵育时，其中抗体形成细胞释放的抗体会与周围SRBC特异性结合，在补体作用下，使这些致敏的SRBC溶解，从而在琼脂凝胶中的每个抗体形成细胞周围形成一个肉眼可见的溶血空斑。测定与补体结合力强的IgM形成细胞采用直接方法；测定与补体结合力弱的IgG或IgA形成细胞采用间接法，即实验中需加入抗免疫动物Ig的抗体(二抗)，才能促进溶血空斑形成。 此处只介绍小鼠琼脂直接溶血空斑技术。 【试剂和器材】

1．小白鼠 体重18~22 g。 2．补体 豚鼠混合新鲜血清。

3．SRBC悬液 用Gey液将SRBC洗3次，分别配成2.5×108个细胞/ml和5×108个细胞/ml浓度的红细胞悬液。 4．Gey液、琼脂糖。

5．注射器、剪刀、镊子、不锈钢网、小平皿、试管、吸管、显微镜、温箱、水浴箱。 【步骤和方法】

1．免疫小鼠 取1ml 2.5×108个细胞/ml 浓度的SRBC悬液注入小鼠腹腔，或取0.2 ml SRBC悬液经小鼠尾静脉注入

Brucella abortus induces apoptosis of human T lymphocytes

流产布鲁氏菌诱导人类T淋巴细胞的凋亡

摘要：免疫逃避是布鲁氏菌在面对CD4+T细胞有效的适应性反应后在其内存活的必

要条件。之前我们已经证明B.abortus可以通过下调MHC-Ⅱ分子的表达及巨噬细胞的抗原呈递间接的抑制CD4 + T细胞。然而，目前还不清楚B.abortus是否能够直接干扰T淋巴细胞。据报道，即使低水平的和非复制型的入侵T淋巴细胞，B.abortus也能诱导人类T淋巴细胞的凋亡。灭活的B.abortus也能产生同样的现象，说明有一个复杂的细菌的结构成分。我们已证明，典型的B.abortus外膜脂蛋白（L-Omp19），而并非他的非脂化形式，能诱导人类T淋巴细胞的凋亡。此外，合成的脂己肽能模拟蛋白的脂质部分的结构也能诱导T淋巴细胞死亡的增加，这表明牵连到现象的结构部件可以是任何B.abortus脂蛋白。B.abortus诱导的T淋巴细胞的凋亡依赖于TNF-α的分泌，因为用抗TNF-α的单克隆抗体预孵育的T淋巴细胞细胞的凋亡被抑制。总体而言，这些结果说明了一种新机制，通过直接抑制T细胞介导的反应B. abortus可

第十二章 T淋巴细胞介导的细胞免疫应答

一、选择题 [A型题]

1. TCR识别抗原的信号传递是通过： A. CD2 B. CD3 C. CD4 D. Igα、Igβ E. CD8

2. 特异性细胞免疫的两种基本形式是由哪些细胞介导的？ A. Th1、Th2、 B. Th 1、Ts C. Th 1、Tc D. Th 2、Tc E. Th 2、Ts

3. 下列哪种细胞因子由Tc分泌并参与Tc的增殖及分化? A. IL-1 B. TNF-β C. IFN-γ D. MCF E. MAF

4.Tc细胞活化时, 第二信号中最重要的一对分子是： A. CD2与LFA-3 B. CD8与MHC-I类分子 C. CD4与MHC-II类分子 D.CD28与B7-1 E.TCR与CD3

5. Th细胞在CTL细胞的活化过程中的作用主要是： A. 协助传递第一信号 B. Th分泌促进增殖、分化的细胞因子 C. Th能促进Tc的TCR表达

D. Th促进Tc表达MHCⅡ类分子 E. Th促进Tc释放穿孔素

6. Tc杀伤靶细胞时下列哪项是正确的？ A. TC无需与靶细胞接触 B. 靶细胞被溶解时,TC同时受损 C. TC具特异性杀伤作用 D穿孔素诱导靶细胞

B淋巴细介导胞特的异免疫性应答液免疫体答应：抗进入原体机后诱 导相应的抗特异原性B细胞化、活增殖并 最终化分为浆胞，产生特异性细体 抗进入液体发挥免，疫效。 应分——抗类：原DTAg-的免应疫答 、ITA-g的免疫应答B细

对胞D抗原T免的疫答 B细应对胞D抗原T的别 识 B胞细活 B细胞的化增殖和终末分

B细化对胞D抗原的识T 别BC识别抗R原对B胞的激细的活两个相关 互的作联用B:CR特异性合结抗原—活—第化一信 号B胞细内并加工BC化R所结的抗原，合形p成MH, C呈提给特异T性识别h,h活化后T通过达的 表DC40与BL胞表面C细D4结合——0活第二信化号1. 2

.

BC对R抗原识的别与CRT别识抗的不原同之处：1.

2.3.BC不R仅能识别蛋质白抗，还能原识别 多、核肽、多糖类、酸类和小脂分子 合物类化原 B抗C能特异R识别完整性抗原天然的 象，构识或别原抗降解所暴露位表空的 间构象 BRC对抗原的别识需APC的不加和工提 呈亦无MH,C制性限

细胞B化活需要号 信 细胞B活化第一信号：抗原(激刺信) a) 号)bBCR-CD97/b信a号 BR共受体的C殖作用增— C—1D9C/21DC/D81

B细活化胞第的信号(共二刺的信激号

文章编号（Article ID）：1009－2137（2015）02－0312－06·论著·163例儿童急性淋巴细胞白血病细胞遗传学特征

郭晓红1*，翟晓文2，钱晓文2，王宏胜2，范翠青1

1复旦大学附属儿科医院儿科研究所，2血液科，上海201102

摘要目的：了解儿童急性淋巴细胞白血病的细胞遗传学特征。方法：通过骨髓染色体核型分析和荧光原位杂交检测，对163例初诊急性淋巴细胞白血病儿童（0－17岁）进行细胞遗传学分型。结果：本组病例细胞遗传学异常率87．7%（143/163）。倍体群分析显示，最常见高超二倍体（51－67条染色体）45例（27．6%），X染色体和21号染色体获得率为100%。特异性基因异常最常见t（12；21）ETV6/ＲUNX1（26例，16．0%），其次是t（1；19）TCF3/ PBX1（13例，8．0%），t（4；11）MLL重排和t（8；14）IGH/MYC（各6例，3．7%），t（9；22）BCＲ/ABL（2例，1．2%）和iAMP21（1例，0．6%）。非典型结构异常率为：dup（1q）20．2%，del（6q）和del（9p）10．4%，del（12p）12．9%和del （13q）5.5%等。与西方儿童比较，t（

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组织细胞坏死性淋巴结炎21例临床病理

分析

（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）

【摘要】 目的 探讨组织细胞坏死性淋巴结炎(HNL)的临床病理特征及其诊断与鉴别诊断。方法 回顾性分析21例HNL患者的临床病理资料及免疫组织化学检查结果。结果 21例中，男6例，女15例。患者以颈部淋巴结肿大伴高热、外周血白细胞降低为临床特征。病理表现：淋巴结呈破碎状，淋巴结内见边界清楚的碎屑样坏死、组织细胞增生及纤维素沉积，不伴有中性粒细胞浸润。结论 HNL临床少见，多见于年轻女性。临床表现及病理皆有其特点；组织形态学及免疫组织化学检查是确诊HNL的重要手段；易误诊为恶性淋巴瘤。

【关键词】 组织细胞坏死性淋巴结炎 病理学 临床 免疫组织化学

组织细胞坏死性淋巴结炎(histiocytic necrotizing

lymphadenitis，HNL)又称亚急性淋巴结炎、Kikuchi(菊池)病，是一种良性自限性疾病，临床表现为持续高热、颈部淋巴结肿大；病理上易与恶性淋巴瘤等混淆，误诊率高达40%［1］。笔者通过对21例

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