药理实验中

实验一 常用动物的捉拿与给药方法

【实验目的】

1、了解小鼠的饲养方法

2、练习并掌握小鼠的捉拿与给药方法 【实验材料】

1、 器材：鼠笼、饮水瓶、大烧杯、托盘天平、灌胃器、注射器、棉签 2、 药品：生理盐水、苦味酸溶液、75%酒精 3、 动物：小白鼠，20～30g 【实验方法】

1、 捉拿与固定：用右手捉住鼠尾，将其提起置于鼠笼或者粗糙平面上，向后轻拉鼠尾，用左手的拇指和

食指抓住小鼠两耳及颈背部皮肤，将小鼠置于左手掌心，以小指夹住小鼠尾巴即可。 2、 给药法

⑴ 灌胃：将小鼠固定，口朝上，颈部拉直，右手持灌胃针，先从口角处插入口腔，再沿上颚轻轻插入食管。一般给药剂量0.1-0.3ml/10g。

⑵ 腹腔注射：将小鼠固定，右手持注射器自下腹部一侧刺入皮下后，再刺入腹腔，缓慢注入药物。一般给药剂量0.1-0.3ml/10g。

⑶ 皮下注射：两人合作，一人左手抓住小鼠头部，右手拉住小鼠尾巴固定小鼠，另外一人用左手提起皮肤，右手持注射器刺入皮下注入药物。一般给药剂量为0.1-0.2ml/10g

⑷ 肌肉注射：最好两人合作，一人固定小鼠，另外一人将针头迅速垂直刺入后肢外侧肌肉，回抽无回血即可注入药物，一侧给药剂量为0.02-0.05ml/10g。

机能实验学指导

药理学实验部分

西藏民族学院医学系

2004年7月

目录

实验一、药理实验的基本知识和基本技能（综合实验） 实验三、不同给药途径和不同给药剂量对药物作用的影响实验

实验四、药物对家兔离体肠平滑肌的作用 实验五 血浆药物半衰期（t1/2）的测定 实验六、有机磷药物的中毒及其解救（综合） 实验七、药物的镇痛作用 实验八、药物的抗心律失常作用 实验九、录象及病案讨论

实验十、烟的急性毒性试验（综合实验）

实验一、药理实验的基本知识和基本技能

一、 二、

药理学实验须知 ㈠、目的

药理学实验课的目的在于通过实验，使学生1、掌握药理学实验的基本方法，2、了解获得药理学知识的科学途径，3、验证药理学中的重要理论，更牢固地掌握药理学的基本概念和基本知识。药理学实验课更高层次的目的是4、在于培养学生的能力，实验课是培养学生发现问题、分析问题和解决问题的重要课程。几乎所有药理学知识都是通过实验—有目的的科学实验而得到的。我们上实验课，就是要了解我们的前辈科学家们是怎样提出问题、分析问题并最终设计出科学的实验来验证或解决问题。也就是说，我们上实验课的目的是教会学生一种方法，一种科学的

机能实验学指导

药理学实验部分

西藏民族学院医学系

2004年7月

目录

实验一、药理实验的基本知识和基本技能（综合实验） 实验三、不同给药途径和不同给药剂量对药物作用的影响实验

实验四、药物对家兔离体肠平滑肌的作用 实验五 血浆药物半衰期（t1/2）的测定 实验六、有机磷药物的中毒及其解救（综合） 实验七、药物的镇痛作用 实验八、药物的抗心律失常作用 实验九、录象及病案讨论

实验十、烟的急性毒性试验（综合实验）

实验一、药理实验的基本知识和基本技能

一、 二、

药理学实验须知 ㈠、目的

药理学实验课的目的在于通过实验，使学生1、掌握药理学实验的基本方法，2、了解获得药理学知识的科学途径，3、验证药理学中的重要理论，更牢固地掌握药理学的基本概念和基本知识。药理学实验课更高层次的目的是4、在于培养学生的能力，实验课是培养学生发现问题、分析问题和解决问题的重要课程。几乎所有药理学知识都是通过实验—有目的的科学实验而得到的。我们上实验课，就是要了解我们的前辈科学家们是怎样提出问题、分析问题并最终设计出科学的实验来验证或解决问题。也就是说，我们上实验课的目的是教会学生一种方法，一种科学的

实验一 动物实验基本知识

一、实验目的

通过药理学实验的基础知识的学习和练习,掌握药理学实验的基本技能和方法。

二、实验内容

（一）教学电影：动物基本知识与实验技术； （二）实验：

三、实验仪器、设备 实验动物：家兔、小鼠、

实验器材：小鼠固定器家兔固定器、注射器兔台，手术器械，注射器，丝线，纱布等

四、实验方法与步骤 1、教师示教过程

小鼠、大鼠的捉拿灌胃，腹腔注射，皮下注射，标记.家兔捉拿、固定、灌胃、静脉注射，肌肉注射等。重点示教小鼠、大鼠的捉拿灌胃.

2、学生自己做实验操作练习。

小鼠、大鼠的捉拿灌胃，腹腔注射，皮下注射，标记.家兔捉拿、固定、灌胃、静脉注射，肌肉注射等。 1、捉持法 以右手提鼠尾，将小鼠放于粗糙面上，将鼠尾轻轻向后拉，以左手

的拇指及其食指捏双耳及头部皮肤，无名指、小指及掌心夹其背部皮肤及其尾部，便可将小鼠固定。

2、灌胃 左手持小鼠，使腹部朝上，颈部拉直，右手拿灌胃器子口交插入口腔，

从舌面紧沿上颚进入食道。若遇阻力，应退出后再插。 3、皮下注射 一人抓小白鼠头部皮肤，右手拉鼠尾，另一人左手捏背部皮肤，

右手持注射器刺入背部皮肤。

4、腹腔注射 左手抓小白鼠，右

药理学实验部分

实验一 甘草和半夏对豚鼠组胺引喘的平喘作用 实验二 对附子所致小白鼠中毒解救方案的的筛选

实验三 芫花与甘草配伍对小鼠自发活动的影响及急性毒性比较 实验四 丹参和复方丹参对小鼠耐缺氧能力的影响

实验五 生大黄、制大黄以及大黄与芒硝配伍对小鼠小肠运动的影响 实验六 三七和银杏叶对大鼠凝血时间和血栓形成的影响 实验七 薄荷油对离体肠平滑肌的作用

实验一 甘草和半夏对豚鼠组胺引喘的平喘作用

【目的】观察药物对气管收缩剂的拮抗作用，掌握甘草和半夏对豚鼠的平喘作用。 【原理】哮喘是一种以呼吸道炎症和呼吸道高反应性为特征的疾病，其发病机制包括呼吸道炎症、支气管平滑肌痉挛性收缩、支气管黏膜充血水肿及呼吸道腺体分泌亢进等多个环节。凡能拮抗发病病因或缓解喘息症状的药物均有平喘作用。 【材料】

1. 动物：豚鼠，体重100~152g，♀♂兼用。 2. 器材：药物喷雾装置，1ml注射器。

3. 药品：生理盐水，0.4%磷酸组织胺溶液，甘草和半夏水煎液（甘草2g和半夏5g，共煎

成10ml），1.25%异丙肾上腺素溶液，0.1%肾上腺素注射液。

【实验步骤】 1.动物筛选：取150~200g豚鼠，放入约4L的玻璃喷雾箱内，以400mmH

实验1 药理实验基本操作

一、

试验报告的撰写

实验报告要求结构完整、条理分明、用词规范、详略得当。

内容包含：试验题目、试验目的、实验原理、试验材料、试验方法、实验结果、讨论、结论、注意事项。

二、 三、

注射器的使用方法

试验目的：掌握注射器的使用方法 试验材料：

器材：注射器 1 ml、2 ml、5 ml；针头：4号、5号、6号。一般小鼠皮下、腹腔、肌肉注射用5.0-6号针头，静脉注射用4.5号或5号针头，口服灌胃用12号针头；大鼠与兔子用16号针头。

药品：生理盐水 试验方法：

1、 安装针头：选择适宜号数的针头，安装在针管的管嘴上，拧紧，要求针尖斜面与针管刻度面一致。

2、 吸取药液：将针尖浸入药液中，左手持针管，右手提抽针芯，缓慢吸取药液至需要量。 3、 排尽气泡：将吸入药液的注射器垂直向上，先抽一下针芯，使针头内的药液进入针管，并使针管内的空气汇集在药液上面，然后轻轻推动针芯，使空气自针头排出，直至溢出药液为止。若遇小气泡不易排出时，可再抽入空气少许，使该微量气泡汇合于抽入的空气中，然后一并排出（注意：避免将针头朝着自己或他人，防止液体喷射到人身上）。

4、 持注射器：

（1） 用右手拇、中二指持注射器（针管的刻度面朝上以

晨

i.h. 皮下注射

q.n. 每晚 i.m. 肌肉注射

i.v. 静脉注射 h.s. 睡时

i.v.gtt 静脉滴注 us.ext 外用

a.c. 饭前 p.c. 饭后 a.m. 上午

1

不同剂量、剂型对药物作用的影响

【实验目的】略

【实验方法】

1. 取蟾蜍三只，称重，编号。

*注：以下皆为蟾蜍胸淋巴囊注射0.15ml/10 g体重。

（1）甲注射1%戊巴比妥钠水溶液。红线

（2）乙注射1%戊巴比妥钠阿拉伯胶溶液。黄线 （3）丙注射0.3%戊巴比妥钠水溶液。绿线 2. 观察蟾蜍翻正反射消失的时间并记录。

【实验结果】

戊巴比妥钠对蟾蜍作用结果

编号 体重 给药量 给药时间 翻正反射消失时间 时间间隔

2

不同给药途径对药物作用的影响

【实验目的】略

【实验方法】

1. 取小鼠三只，称重，编号。

*注：以下动物皆给予尼可刹米0.2 ml/10 g体重。

（1）甲鼠灌胃给药。 （2）乙鼠皮下注射。 （3）丙鼠腹腔注射。

2. 盖上盖子，将小鼠置笼中观察是否依次出现竖尾，跳跃，惊厥，死亡的现象，并记录其出现药效的时间和强度。

【实验结果】

尼可刹米对小鼠作用结果

编号 体重 给药量 起效时间 药物作用速度及强度

3

药物反应的个体

药理学实验部分

实验一 甘草和半夏对豚鼠组胺引喘的平喘作用 实验二 对附子所致小白鼠中毒解救方案的的筛选

实验三 芫花与甘草配伍对小鼠自发活动的影响及急性毒性比较 实验四 丹参和复方丹参对小鼠耐缺氧能力的影响

实验五 生大黄、制大黄以及大黄与芒硝配伍对小鼠小肠运动的影响 实验六 三七和银杏叶对大鼠凝血时间和血栓形成的影响 实验七 薄荷油对离体肠平滑肌的作用

实验一 甘草和半夏对豚鼠组胺引喘的平喘作用

【目的】观察药物对气管收缩剂的拮抗作用，掌握甘草和半夏对豚鼠的平喘作用。 【原理】哮喘是一种以呼吸道炎症和呼吸道高反应性为特征的疾病，其发病机制包括呼吸道炎症、支气管平滑肌痉挛性收缩、支气管黏膜充血水肿及呼吸道腺体分泌亢进等多个环节。凡能拮抗发病病因或缓解喘息症状的药物均有平喘作用。 【材料】

1. 动物：豚鼠，体重100~152g，♀♂兼用。 2. 器材：药物喷雾装置，1ml注射器。

3. 药品：生理盐水，0.4%磷酸组织胺溶液，甘草和半夏水煎液（甘草2g和半夏5g，共煎

成10ml），1.25%异丙肾上腺素溶液，0.1%肾上腺素注射液。

【实验步骤】 1.动物筛选：取150~200g豚鼠，放入约4L的玻璃喷雾箱内，以400mmH

药理学实验讲义

南方医科大学药学院

２０１０－７

目 录

实验一 实验动物操作的基本机能……………………………… 2 实验二 实验三 实验四 实验五 实验六 实验七 实验八 附录1 附录2

不同给药途径对药物作用的影响……………………… 4 全血水杨酸二室模型药物代谢动力学参数测定……… 5 肝肾功能对药物作用的影响…………………………… 6 药物镇痛实验…………………………………………… 7 巴比妥类药物的抗惊厥作用…………………………… 9 利多卡因对抗氯化钡引起的心律失常实验…………… 13 有机磷酸酯类中毒及解救……………………………… 14 药理学实验基本要求……………………………………19 药理学在新药研究中的应用……………………………22

实验一、实验动物操作的基本机能

一、目的：学习实验动物编号、捉持、给药、采血等基本操作方法。

二、实验材料

（一）动物：小白鼠10只，雌雄各半，体重18g ~ 22g。家兔1只，雌雄均可。 （二）器材：1 ml注射器，5 ml注射器，针头，灌胃针头，大烧杯，天平。

三、方法 1. 性别鉴别

小鼠的性别鉴别通常以肛门与生殖孔之间的距离来判

第一章 现代药理学实验方法与技术简介

第一节 分子生物学试验方法与技术

分子生物技术在药理学实验中应用较为广泛，包括核酸分子探针的标记、核酸分子杂交、多聚酶链反应、蛋白印迹杂交技术、cDNA文库、随机分子库技术、外核基因在真核细胞中的表达、转基因动物、人类基因治疗等。现将更为常用的技术介绍如下：

一、核酸分子探针的标记 标记核酸分子探针（nucleic acid probe）是进行核杂交的基础，根据核酸分子探针的来源及性质进行选择，选择的基本原则是具有高度的特异性，探针选择直接影响杂交结果的分析。根据检测对象和目的不同，，可选择不同的探针种类及标记方法。

㈠ 探针种类

1．基因组DNA探针 是克隆化的各种基因片断，也是最常用的核酸探针，探针应尽可能选用基因编码（外显子），避免使用内含子及其它非编码序列。

2．cDNA探针 与mRNA互补的DNA链称cDNA，是一种较为理想的核酸探针，特异性较高。

3．RNA探针 RNA与RNA或DNA杂交体的探针稳定性，特异性高。 4．寡核苷酸探针 人工合成寡核苷酸片段做探针，可根据需要合成相应序列。

㈡ 标记物

常用的探针标记物有两类：放射性同位素和非放射性同位素。标记物的检测