花色苷含量测定方法原理

总花色苷含量测定—分光光度法

1、综合国内外资料,主要有以下几种计算吸光值A 的方法[1]:

(1) 当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时,需消除叶绿素吸收含量的影响;此时,

计算公式为: A = (Amax - A620) - 0.1(A650 - A620) (2) 含有其它干扰物质时花色苷总量的测定:

a) 直接法:在新鲜的植物提取物中,因为很少含有在花色苷的最大吸收区发生吸收的干扰物质,花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的吸光度来测定。

计算公式为: A = Amax

直接法吸收光谱测定:用××分光光度计于250 - 800nm 下全波长扫描,得到花色苷在0.1 % 盐酸—80 % 乙醇中的可见光区最大吸收波长,在此最大波长下测定各样品的吸光值A 。

b) pH 示差法:在加工或储藏过程中,会产生褐色降解物,这些降解物和花色苷具有相同的能量吸收范围。这类花色苷总量的测定,通常用pH示差法[8] 。

计算公式为: A = (Amax - A700) pH1.0 - (Amax - A700) pH4.5

pH 示差法吸收光谱测定:先确定合适的稀释因子,使样品在λmax下的吸光度在分光光度计的线性

总花色苷含量测定—分光光度法

1、综合国内外资料,主要有以下几种计算吸光值A 的方法[1]:

(1) 当叶绿素是该样品中主要存在的干扰色素时,需消除叶绿素吸收含量的影响;此时,

计算公式为: A = (Amax - A620) - 0.1(A650 - A620) (2) 含有其它干扰物质时花色苷总量的测定:

a) 直接法:在新鲜的植物提取物中,因为很少含有在花色苷的最大吸收区发生吸收的干扰物质,花色苷总量可以直接由可见区最大吸收波长处的吸光度来测定。

计算公式为: A = Amax

直接法吸收光谱测定:用××分光光度计于250 - 800nm 下全波长扫描,得到花色苷在0.1 % 盐酸—80 % 乙醇中的可见光区最大吸收波长,在此最大波长下测定各样品的吸光值A 。

b) pH 示差法:在加工或储藏过程中,会产生褐色降解物,这些降解物和花色苷具有相同的能量吸收范围。这类花色苷总量的测定,通常用pH示差法[8] 。

计算公式为: A = (Amax - A700) pH1.0 - (Amax - A700) pH4.5

pH 示差法吸收光谱测定:先确定合适的稀释因子,使样品在λmax下的吸光度在分光光度计的线性

摘 要

论文题目：牡丹花色与花色苷的研究

摘 要

牡丹为我国著名花卉，被称为“万花一品”、“冠绝群芳”的“花王”。花色是牡丹重要的观赏性状，花色素则是牡丹花色形成的物质基础，又因多种生理活性而具有潜在的应用价值。本文主要研究了中原牡丹品种群的花色、花色苷及二者的相关性，确定了大孔吸附树脂法纯化牡丹花色苷的工艺条件，测定了牡丹花提取液与花色苷的抗氧化活性。具体研究内容及结果如下：

1．利用色差仪按国际照明委员会（International Commission on Illumination，CIE）表色系统对94个中原牡丹品种的花色进行测定，并在此基础上，通过CLUSTER过程将花色三刺激值（明度L*、 色相a* 和b*）采用Ward离差平方和法进行了聚类分析。结果表明：94个中原牡丹品种花色在CIE表色系统坐标系上的分布广泛，聚类分析将其分为9个色系：白（20种）、绿（1种）、浅粉（8种）、粉红（13种）、粉蓝（12种）、红（14种）、紫（11种）、红紫（7种）、红黑（8种），不同色系牡丹的L*、 a* 和b*值特征明显。白、浅粉、粉红和红色系以及粉蓝、紫和红紫色系的L*与a*、L*与彩度（C*）均表现出显著的负相关性（L*与a*的相关

时珍国医国药２００７年第１８卷第８期

ＩＪＩｓＨＩｚＨＥＮＭＥＤＩｃｌＮＥＡＮＤ

ＭＡＴＥＲｎＭＥＤＩｃＡＲＥＳＥＡＲｃＨ２０ｃｒ７ＶｏＬ．１８

Ｎｏ．８‘

多糖含量测定方法比较

钟方晓１，任海华２，李岩１

（１．山东省中医药研究院，山东济南２５００１４；２．山东省肿瘤医院，山东济南２５０１１７）

摘要：目的探讨中药多糖含量测定方法酶可行性及稳定性。方法对测定多糖常用对照品葡萄糖、鼠李糖、半乳糖，参

考文献方法，分别采用硫酸一苯酚法、硫酸一蒽酮法比较显色反应后吸收曲线的稳定性。结果不同单糖对照品显色反

应后最大吸收波长不同，其中硫酸一苯酚法显色反应后稳定性较好，硫酸一蒽酮法稳定性较差。结论硫酸一苯酚法为

较理想的多糖含量测定方法。

关键词：多糖；硫酸一苯酚法；硫酸一蒽酮法．中图分类号：Ｒ２８４．２

文献标识码：Ａ

文章编号：１００８电８０５（２００７）０８－１９１６旬１

ｏｆ

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Ａｂｓｔ髓ｃｔ：０ｂｊｅ甜ｖｅ，１１ｌｅ

ｎｏｓ

天然产物

一些天然产物的含量测定方法

成分名称 提取方法 流动相 检测波长(纳米) 流速 柱温

丹参酮IIA 甲醇回流 甲醇-水(75:25/73：27) 270 1 室温

丹酚酸B 75%乙醇回流 甲醇-乙腈-甲酸-水(30:10:1:59) 286 1 室温

丹参素 水,超声/乙醇-水超声/盐酸(1->10)50毫升,超30分钟,冷,补足,氯化钠5克,取上清液25毫升,乙乙提取4次,合并,干,50%甲醇溶,定10毫升./50%甲醇超提 甲醇-水-乙酸(8:91:1)/乙腈-水-磷酸(2:60:0.5)/乙腈-水-乙酸(9:90:1)/甲醇-二甲基甲酰胺-水-乙酸(4:4:90:2/2:95:2:1)/甲醇-0.4%乙酸(5:95)/甲醇-1%乙酸(8:92)/乙腈-甲醇-水-冰醋酸（0.5：8：92：1） 280 1 室温

天然产物

362页后

《欧洲药典》中蛋白含量的测定方法

1. 《欧洲药典》第7版2.5.33，USP<1057>Biotechnology-derived articles-Total protein assay。

EP2.5.33收录了7种检测方法，即扫描法、Lowry 法、Bradford 法、BCA法、Biuret 法、荧光法和氮分析法。 1.1 扫描法：

原理：依据蛋白质结构中含有芳香族氨基酸（如酪氨酸、色氨酸），其在280nm处有吸光值。检测时，如果溶解蛋白质的溶剂也有高吸光度，则采用干扰对照液进行补偿消除。但如果干扰对照液吸光值也很高，则检测结果误差大。此外，低浓度蛋白质溶液会因蛋白质吸附至检测池上而影响浓度，后者可使用高浓度或用去离子去污剂处理样品。 待测品：蛋白质溶液浓度一般为0.2mg/mL~2 mg/mL。

对照品：选择合适的对照品，用溶解待测品蛋白质的溶剂配制，浓度与待测品溶液一致。 检测：检测过程中，将待测蛋白溶液、对照品溶液和干扰对照液保持在相同温度。使用石英比色皿检测280nm处吸光值，并使用规定的溶液进行补偿。溶液浓度应尽可能保持在适宜范围内以便获取准确结果。

光散射影响：样品引起的光散射会导致蛋白质检测结果准确度降低。如果蛋白质溶液中存

吸附树脂在中药产业化生产中已有广泛应用!吸附树脂柱在使用一定周期后!需要再生处理!可以去除树脂柱上堆积的杂质!使得树脂柱保持正常工作流速"存放后需重新使用的树脂柱!也

应再生处理"生产中常用的处理方法为碱水#

酸水#盐酸乙醇洗涤!水冲洗至中性即可"

本实验研究利用淫羊藿总黄酮$%&%

大孔吸附树脂上吸附#洗脱#再生过程!考察树脂再生后提取物残留量和再生后吸附容量的变化!作为吸附树脂再生效果的评价指标"

在本实验的操作条件下!得出如下结论’再生后吸附树脂柱上淫羊藿总黄酮的残留量为该产物再生前吸附洗脱平均收得率

的&()*!再生后树脂的吸附容量为+,(-&./0.12%

!与前%&批树

脂平均吸附容量+-(34./0.1

2%

相比较!变化不大"本实验研究的结论为’$%&%大孔吸附树脂可连续多批次地用于淫羊藿总黄酮的提取分离!从上述结论可以认为!再生后树脂柱上有淫羊藿总黄酮残留!再生后吸附容量变化不大!但可通过

改善吸附洗脱过程的流动性提高工作效率"

以上实验提供的数据和结论!可作为吸附树脂法工艺流程设计中再生效果评价的参考依据!但是完整的工艺流程设计尚需考虑多种因素"

参考文献’

5%6胡军!周跃华(大孔吸附树脂在中药成分精制纯化中的应用57

6(中成药!+&&+!+,8+

果胶的测定（方案一）：

黄晓钰，刘邻渭等．食品化学综合实验[M]．中国农业大学出版社. 2002．158~159

实验原理：果胶经水解，其产物——半乳糖醛酸可在强酸环境中与咔唑试剂产生缩合反应，

生成紫红色化合物，其呈色深浅与半乳糖醛酸含量成正比，由此可进行比色定量测定果胶。 实验试剂：1.化学纯无水乙醇或95%乙醇。

2.精制乙醇：取无水乙醇或95%乙醇1000ml，加入锌粉4g，硫酸（1:1）4ml，

至于衡温水浴中回流10h，用全玻璃仪器蒸馏，馏出液每1000ml加锌粉和氢氧化钾各4g，并进行蒸馏。

3. 0.15%咔唑乙醇溶液：称取咔唑0.150 g，溶于精制乙醇并定容至100ml。 4.半乳糖醛酸标准溶液：先用水配置成浓度1 g/L的溶液，再配制成浓度分别为

（0、10mg/L、20 mg/L、30 mg/L、40 mg/L、50 mg/L、60 mg/L、70mg/L）的

系列半乳糖醛酸标准溶液。

5.优级纯浓硫酸。

操作方法：1样品处理： 总果胶提取：（鲜样）研磨新鲜样品50g，放入1000ml烧杯中，加入0.05mol/L

HC

2 0 1 3年1 2月第 2 O卷第 1 2期

中国中医药信息杂志

5 9

H P L C测定药用芦荟中芦荟苷和芦荟大黄素含量彭贵龙，周光明，秦红英西南大学化学化工学院，发光与实时分析教育部重点实验室，重庆 4 0 0 7 1 5

摘要：目的

以离子液体 1一丁基一 3一甲基咪唑溴化盐 ([ B M I M] B r )为萃取剂超声辅助萃取，高效液相色谱法同时分采用 P h e n o m e n e x C色谱柱 ( 2 5 0 m i l l× 4 . 6 m m, 5 p m );流动相：甲醇一 O . 3%

离测定芦荟中的芦荟苷和芦荟大黄素。方法

冰醋酸水溶液 ( 6 5: 3 5 );流速：0 . 8 0 m L/ m i n;紫外检测波长：3 6 0 n m;柱温： 3 5℃。结果为0 . 0 5 0 6、0 . 2 6 2 n g/ m L,平均加样回收率分别为 9 5 . 9 9%、9 5 . 8 0%。结论

芦荟苷和芦荟大黄素

分别在 0 . 0 0 0 3 3 6—1 . 6 8 P g (,=0 . 9 9 9 9 6 )、0 . 0 0 0 6 0 8~3 . O 4 g (,=0 . 9 9

阿司匹林含量测定方法综述

一、阿司匹林原料药的含量测定 （1）酸碱滴定法 1、直接滴定法 2、水解后剩余滴定 3、两步滴定法 （2）仪器法

4、反相高效液相色谱法 5、薄层色谱法 6、紫外分光光度法

二、阿司匹林制剂的含量测定 1、两步滴定法 光谱法： 2、比色法

3、双波长紫外分光光度法 4、双波比值光谱法 5、同步扫描荧光光谱

6、萃取-火焰原子吸收光谱法 7、紫外分光光度法 8、分光光度法 9、荧光光度法 10、差示分光光度法 11、紫外褶合光谱法 12、近红外漫反射法 色谱法：

13、高效液相色谱法 14、反相高效液相色谱法

15、离子抑制-反相高效液相色谱法 16、气相色谱法

17、大口毛细管气相色谱法 18、胶束薄层色谱法 电泳法：

19、非水毛细管电泳法 20、反向高效毛细管电泳法 其他法：

21、动力学光度法测定痕量乙酰水杨酸 23、电极法

24、柱分配色谱-紫外分光光度法 25、阻尼最小二乘法

26、线性扫描伏安法测定阿司匹林 27、百分吸收系数法

摘要：阿司匹林是水杨酸类解热镇痛药物，临床上主要用于治疗感冒发烧、牙痛等慢性疼

痛，现在的研究发现小剂量的阿司匹林也