细胞骨架与肿瘤化疗

细胞骨架与肿瘤

一、什么是细胞骨架

细胞骨架是真核细胞中真核细胞内蛋白纤维交织而成的立体网架结构，参

与细胞形态的维持、细胞运动、细胞分裂等几乎所有的细胞生命活动。广义的细胞骨架有：细胞质骨架、核骨架、核纤层、细胞外基质。狭义上可分为：微管、微丝和中间纤维。细胞骨架作为支架可维持细胞的形态，亦可为细胞内细胞器提供附着位点；还分别参与细胞转运、信号转导、细胞分裂等功能。

1、微管，直径约25nm。典型的微管是由,根原纤维形成的一个空管,常延伸到像纤毛、鞭毛或某些原生动物的轴伪足这样一些长细胞突起中,形成有规则构型的复合物。由微管蛋白和微管结合蛋白组成，微管的装配分三个时期：成核期、延长期和稳定期。微管组装的动态调节模型有：非稳态动力模型和踏车模型。影响微管组装的因素有：微管蛋白浓度、GTP、Mg离子、温度和PH。其功能有：维持细胞形态，参与细胞特定结构的形成，参与细胞内物质的运输，参与细胞的运动，参与细胞内信号转导，维持细胞内细胞器的定位和分布。

2、微丝，直径为6一8nm。在微绒毛、褶终膜和微靖等细胞的伸展部分尤为显著。其结构与功能和微管相似。

3、中间纤维，除微丝和微管外,在高等生物细胞中通常还能观察到第三类纤维—中等纤维(其直径界

第七章 细胞骨架

第七章 细胞骨架

一、填空题

A-七-1. 细胞骨架是指存在于真核细胞中的蛋白纤维网架体系，狭义的骨架系统主要包括 微丝 、 微管 和 中间丝 。

A-七-2. 构成微管的蛋白有两类： α微管蛋白 和 β微管蛋白 。

A-七-3. 微管在细胞中有三种存在形式：单管、 二联管 和 三联管 ，其中主要分布在纤毛和鞭毛杆状部位的是 二联管 。

A-七-4. 装配时具有“踏车现象”的细胞骨架是 微丝 和 微管 。

A-七-5. 紫杉醇是作用于 微管 的特异性药物，而鬼笔环肽是作用于 微丝的特异性药物。

A-七-6. 微丝的基本组成单位是 肌动蛋白 ，其在细胞中也有两种存在方式： ① 球状肌动蛋白 ② 纤丝状肌动蛋白 。

A-七-7. 在细胞骨架系统中较为稳定的一种骨架纤维是 中间纤维 。 A-七-8. 中间纤维蛋白分子 八 聚体之间在纵向端对端首尾相连组成一条原纤维， 四 条原纤维侧向相互作用最终形成中间纤维。

A-七-9. 细胞骨架中具有极性的为 微丝 和 微管 。

B-七-10. 鞭毛和纤毛内部是由 微管 组成的轴丝构成的结构。其基部的结构式为__三联管__，而其杆部的结构

Chapter 1０ 细胞骨架与细胞运动

10.1 细胞骨架的组成和功能

10.1.1 细胞骨架的组成和分布

微管：主要分布在核周围,并呈放射状向胞质四周扩散； 微丝：主要分布在细胞质膜的内侧； 中间纤维：分布在整个细胞中。 10.1.2 细胞骨架的功能

①作为支架(scaffold)； ② 在细胞内形成一个框架(framework)结构；③ 为细胞内的物质和细胞器的运输及运动提供机械支持；④ 为细胞的位置移动提供力；⑤ 为信使RNA提供锚定位点，促进 mRNA翻译成多肽；⑥ 是细胞分裂的机器；⑦ 参与信号转导。

10.2 微管(microtuble, MT)

10.2.1 微管的结构和类型

中空的管状；外径约 24 nm，内径约 14 nm, 壁厚 5 nm；长度变化不定。 细胞内微管呈网状和束状分布, 并能与其他蛋白共同组装成纺锤体、基粒、中心粒、纤毛、鞭毛、轴突、神经管等结构。 A 微管的结构

微管是由微管蛋白异源二聚体为基本构件，螺旋盘绕而成；在每根微管中二聚体头尾相接, 形成细长的原纤维(protofilament)； 13条原纤维纵向排列组成微管的壁。

B 微管蛋白(tubulin)类型：

α和β微管蛋白：直径4nm的

[来源学科网ZXXK]

细胞骨架

A型题：

1.细胞骨架是由哪几种物质构成的

A.糖类 B.脂类 C.核酸 D.蛋白质 E.以上物质都包括 2.下列哪种结构不是由细胞中的微管组成

A.鞭毛 B.纤毛 C.中心粒 D.内质网 E.以上都不是 3.关于微管的组装，哪种说法是错误的

A.微管可随细胞的生命活动不断的组装与去组装 B.微管的组装分步进行

C.微管的极性对微管的增长有重要意义

D.微管蛋白的聚合和解聚是可逆的自体组装过程 E.微管两端的组装速度是相同的

4.在电镜下可见中心粒的每个短筒状小体

A.由9组二联微管环状斜向排列 B.由9组单管微管环状斜向排列

C.由9组三联微管环状斜向排列 D.由9组外围微管和一个中央微管排列 E.由9组外围微管和二个中央微管排列 5.组成微丝最主要的化学成分是

A.球状肌动蛋白 B.纤维状肌动蛋白 C.原肌球蛋白 D.肌钙蛋白 E.锚定蛋白 6.能够专一抑制微丝组装的物质是

A.秋水仙素 B.细胞松弛素B C.长春花碱 D.鬼笔环肽 E.Mg+ 7.在非肌细胞中，微丝与

中 国 海 洋 大 学 实 验 报 告

姓名：常天易 系年级：海洋生命学院2012级 专业：生物科学

科目：分子细胞生物学实验 学号：12050011006

植物细胞骨架的观察

一、实验目的：

1. 掌握植物细胞骨架处理及染色方法。 2. 对细胞骨架的形态和分布有一个初步认识。

二、实验原理：

真核细胞胞质中存在的纤维网状结构称为细胞骨架，包括：微管

（直径20-25nm）、微丝（直径6-7nm）、中间丝（直径10nm）、和粗丝等。考马斯亮蓝R250是一种普通的蛋白质染料，它可以使各种细胞骨架蛋白着色，显示微丝组成的张力纤维。张力纤维（直径40nm）在体外培养细胞中普遍存在，与细胞对基质的附着，维持细胞扁平铺展的性状有关。

三、实验材料

洋葱表皮细胞

试剂：

1、0.01mol/L的磷酸盐缓冲液 2、M-缓冲液

3、1%Triton X-100/M-缓冲液 4、30%戊二醛-PBS溶液

四、实验方法

撕取1平方厘米见方的洋葱表皮细胞，在培养皿中浸泡于PBS缓冲液中，使其沉底。 去PBS溶液，加入1% TritonX-100处理30min 去 TritonX-100，使用M-缓冲液洗三遍，每次5min 加入3%戊二醛溶液固定3

第九章 细胞骨架

一、名词解释 1、肌动蛋白

2、中心粒/中心体 3、细胞骨架 4、动力蛋白 5、驱动蛋白 6、微管组织中心 7、踏车行为 二、判断题

1、与微丝不同，中间纤维蛋白合成后，基本上均组装成为中间纤维，没有大量游离的单体存在。

2、通常微管的负极指向中心体

3、微管和微丝都具有极性，在装配时，正极的装配速度较快。

4、微管和微丝的装配需要能量，而中间纤维的自发装配不需要能量。

5、通常细胞内微丝和微管处于动态平衡，在低温条件下，微丝和微管趋向于解聚

6、肌动蛋白单体在临界浓度时，微丝的正极趋于装配，负极趋于解聚，微丝长度保持相对不变。

7、微丝和微管的两端都可以进行装配和解聚。 8、纤毛的运动与微管有关。 9、细胞松弛素可以使细胞变圆

10、纺锤体与染色体的运动有关，其中动粒微管在染色体运动时发生显著变化，而极微管和星体微管变化不大。

11、细胞松弛素的作用是促进微丝的稳定性。

12、与肌动蛋白和微管蛋白不一样，中间纤维蛋白具有组织特异性。 13、肌动蛋白的装配需要ATP提供能量。 14、微管蛋白的装配需要GTP提供能量。 15、微管蛋白的α和β亚基上都具有GTP结合位点，在微管装配时α亚基上的GTP会发生水解。

16、微管的直

植物细胞骨架的光学和荧光显微镜观察

一、实验目的：掌握植物细胞骨架处理及染色方法。

二、实验原理：用适当浓度的TritonX-100处理时，可将细胞内蛋白

质破坏，但细胞骨架系统的蛋白质却被保存，用光学染料考马斯亮兰R250和荧光染料鬼笔环肽染色，在普通光学显微镜和荧光显微镜下观察微丝结构。

三、实验步骤：

光学观察 1、

撕取洋葱鳞茎内表皮细胞（约1cm2大小若干片）置于装有

pH6.8磷酸缓冲液的50ml烧杯中，使其下沉；材料预处理时间太短会影响下一步操作，务必过夜处理。 2、 3、 4、 5、 6、

吸去pH6.8磷酸缓冲液，用1% TritonX-100处理20min； 吸去1% TritonX-100，用M-缓冲液洗三次，每次8min； 3%戊二醛固定30min；

pH6.8磷酸缓冲液洗三次，每次8min；

0.2%考马斯亮兰R250染色20min或者25μg/ mL罗丹明-

鬼笔环肽染色1小时； 7、

用蒸馏水洗1-2次，将内表皮细胞平铺子载玻片上，加盖

玻片，于显微镜下观察。

荧光观察：

1． 固定液中(固定液成份:4 %多聚甲醛, 50 mmol/ L Pipes pH 6.9 ,

5 mmol/ L EGTA , 5mmol/

第×章

肿瘤化疗

肿瘤的治疗方法，大致可以分为两大类，一是药物治疗，如化疗、内分泌治疗、生物治疗、中药治疗等，另一类是非药物治疗，如手术、放疗、射频治疗等。化疗是药物治疗最主要的手段。

化疗（chemotherapy），顾名思义，就是采用化学药物治疗的意思，广义而言，所有采用化学药物进行的治疗，均可称为化疗。但肿瘤化疗与普通内科的化疗有不同的内涵，一般而言，普通内科使用的化学药物毒副作用一般较轻，无需特别关注，而肿瘤化疗通常使用一些毒副作用较大且对机体正常细胞损伤明显的化学药物，这类化学药物被称为“细胞毒药物（cytotoxic agents）”。肿瘤化疗通常特指采用细胞毒药物进行的肿瘤治疗，因此，称其为细胞毒治疗更为确切，但基于传统习惯，目前仍延用这种说法。

肿瘤的化疗起源于上个世纪40年代，最早使用氮芥治疗淋巴瘤获得了成功，随着药物研究的发展，目前化疗已经成为肿瘤治疗中不可缺少的手段，与手术、放疗并称为肿瘤的三大治疗方法。随着新药的不断上市，越来越多的肿瘤通过化疗获益，已有一些肿瘤通过化疗达到了临床治愈或长期生存的效果。

第一节 肿瘤细胞增殖动力学与肿瘤化疗

一．细胞周期动力学

关于印发《XX医院规范肿瘤化学药物治疗管

理制度》的通知

各科室、社区卫生服务中心（站）

为进一步加强医院肿瘤化疗工作的质量控制和管理，促进肿瘤化疗学科的规范化建设和发展，根据《广西壮族自治区医疗机构肿瘤化学药物治疗质量控制管理规范》和《广西壮族自治区医疗机构肿瘤化学药物治疗质量控制评价标准（试行）》（桂卫医?2010?184号）文件精神，结合医院实际，特印发《XX医院规范肿瘤化学药物治疗管理制度》，请认真学习并遵照执行。

附件：1、XX医院肿瘤化疗适应症及注意事项

2、XX医院住院病历化疗质量评分表

1

XX医院

规范肿瘤化学药物治疗管理制度

化学药物治疗（简称化疗）是专业性极强的肿瘤治疗技术，化疗方案设计和执行的各环节均要求从业医护人员具备较高的综合诊断和评估的能力，全面掌握肿瘤化疗适应证、禁忌证，以及化疗药物药理知识和药品的选择、配伍、给药方式、给药时机、剂量调整等专业知识，并具有预防和处理化疗药物不良反应的专业技能。为进一步加强医院肿瘤化疗的医疗安全和医疗质量管理，结合医院实际，特制定本制度。

一、 科室准入管理

肿瘤患者化疗特别是肿瘤手术后患者的化疗原则上要求在肿瘤科进行。

特殊情况下对于确需在其他专科进行化疗者，如短期内需妇科专科多

1.头颈肿瘤的化学治疗方案

2.肺癌的化学治疗方案

3.乳腺癌的化学治疗方案

4.胃肠道肿瘤的化学治疗方案

5.血液及淋巴的化学治疗方案

6.骨及软骨瘤的化学治疗方案

7.泌尿和男性生殖系肿瘤的化学治疗方案

8.女性生殖系统肿瘤的化学治疗方案

9.恶性黑色素瘤的化学治疗方案

10.原发不明的肿瘤的化学治疗方案 1.头颈部肿瘤 一、脑肿瘤

1、神经胶质瘤（高度恶性）--

BCNU卡氮芥（氯乙亚硝脲）方案---配合放疗，有效率30-50% 卡氮芥 100-150MG/M2 IV 第1-3天 或卡氮芥 200MG/M2 IV 第1天 （每6-8周重复,可用6次）

2、多形性成胶质细胞瘤和退行性星形细胞瘤

VEP方案联合放疗------每28天一周期，总共12周期---放疗同步或放疗结束立刻。 长春新碱 1.4MG/M2（最大量2MG） IV 第1天 足叶乙甙 100MG/M2 IV（40-60分钟） 第1-3天 甲基苄肼 100MG/M2 PO 第1-7天

放疗：术后全脑外照射，总剂量59.4GY，时间7周。 3、多形性成胶质细胞瘤和退行性神经胶质瘤 PVC方案------每6-8周重复 环己亚硝脲 110MG/M2 PO 第一天