crna gora

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cRNA

标签:文库时间:2024-10-05
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cRNA间接标记荧光法

RNA纯化(MN公司Nucleospin RNA Clean-up)

(1) 加水至100uL(<100ug)

(2) 等量混合RA1与无水乙醇(300uL+300uL/每管)

(3) 每管加入600uL RA1与无水乙醇的混合物,至700uL,混合均匀 (4) 转移到柱子,静置1 min (5) 10000rpm 离心 1 min

(6) 将柱子转移到新2ml 管,加RA3 700uL,10000rpm 离心 1 min (7) 弃管内液,柱中加350uL RA3,10000rpm 离心 1 min (8) 弃管内液,10000rpm 离心 2 min甩干

(9) 柱子转移到新管,打开放置2-3 min,将乙醇挥发干净 (10) 加65 预热水30uL,放置1 min,10000rpm 离心1min (11) 重复(10),增加回收率 (12) 取2uL,稀释50倍,测浓度。

DNA纯化(MN公司的Nucleospin Extract Ⅱ)

(1) 加2倍体积的NT液 (2) 转入柱子中,静置1min (3) 10000rpm离心1min

(4) 加600uL NT3,10000rpm离心1min (5) 离心2min 甩干

(6)