拟南芥转化效率低
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拟南芥转化
1农杆菌感受态细胞的制备
挑取根癌农杆菌GV3101单菌落于5 ml含100 μg/ml利福平(Rifampicin),50 μg/ml卡那霉素(Kanmycin)和50 μg/ml庆大霉素(Genmycin)的LB液体培养基中,28℃振荡培养过夜;取过夜培养菌液500 μl接种于 50 ml LB(含相应抗生素)液体培养基中,28℃振荡培养4-8小时(OD600为0.5-0.8);冰浴30分钟,4,000 rpm,4℃离心10分钟,加入10 ml预冷的 20 mM CaCI2悬浮农杆菌细胞,4000 rpm,4℃离心10分钟;加入2 ml预冷的 20 mM CaCl2悬浮细胞,冰浴,分装成每管100 μl,液氮中速冻后,置-80℃保存备用。 2.质粒转化农杆菌 GV3101
将构建的带有目的基因的质粒pCAMBIA-1304-plc转化 (冻融法) 根癌农杆菌GV3101,步骤如下:
1) 从-80℃冰箱中取出 GV3101 感受 态细胞 (100 μl),置于冰上解冻;
2) 加入 5 μl 含目的基因的质粒,轻轻混匀;冰水浴 5 min; 3) 液氮冷冻 8 min; 4) 37℃水浴热激 5 min;
5) 加入 900 μl LB/
拟南芥原生质体的制备及转化
拟南芥原生质体制备转化操作流程
主要试剂
1. 纤维素酶解液: 试剂
15ml酶液体系
1. 1-1.5﹪ Cellulase R10 (YaKult Honsha) 0.225g干粉
2. 0.2-0.4﹪ Mecerozyme R10 (YaKult Honsha) 0.045g干粉 3. 0.4M mannitol 1.09g干粉 4. 20mM KCl 1 ml 0.3 M KCl母液
5. 20mM MES,pH5.7,1 ml 0.3 M MES,pH5.7母液 6. 加入10ml 水
7. 55℃水浴加热10分钟(钝化酶,提高酶的可溶性),冷却至室温后加入以下试剂 8. 10mM CaCl,1 ml 0.15M CaCl2
9. 5 mM β-Mercaptoethanol(可选用) 1ml 75mM β-Mercaptoethanol 母液(Sigma A-6793) 10.0.1﹪ BSA, 1 ml 1.5﹪BSA(4℃保存)
11.用0.45μm滤膜过滤后使用,酶液是淡棕色的澄清溶液。
2. PEG溶液(40%, v/v)(一次配置可以保存五天,但是最好现用现配,每个样品需100ul PEG4000溶液,可根据实验样品
脱硫效率低的原因及措施
一.改进FGD系统脱硫效率的一些原则措施
1)优化设计。合理确定脱硫装置的设计和运行参数
2)做好机组和除尘设备的运行,保证进人脱硫装置的烟气 参数在设计范围内
3)选择高品位、活性好的石灰石作为吸收剂 4)保证FGD工艺水水质
5)严格控制脱硫装置的运行参数
6)做好FGD系统的运行维护、检修、化验等管理工作
二 影响石灰石—石膏湿法烟气脱硫效率的主要因素
(1)烟气温度的影响
进入吸收塔烟气温度越低,越利于SO2气体溶于浆液,形成HSO-3,即:低温有利于吸收,高温有利于解吸。
(2)烟气中SO2浓度的影响
在钙硫摩尔比一定时,当烟气中SO2浓度很低时,由于吸收塔出口SO2浓度不会低于其平衡浓度,所以不可能获得很高的脱硫效率。一般情况下,随着烟气中SO2浓度的增加,脱硫效率随之提高,但当烟气中SO2浓度高于某一极限值时,脱硫效率会随着烟气中SO2浓度的增加而下降。
(3)烟气中氧浓度的影响O2参与烟气脱硫的化学过程,使HSO-3氧化为SO2-4,随着烟气中O2含量的增加,CaSO4〃2H2O的形成加快,脱硫效率也呈上升趋势。 (4)烟气含尘浓度的影响
原烟气中的飞灰在一定程度上阻碍了SO2与脱硫剂的接触,降低了石灰石中Ca2+的溶解速
拟南芥
拟南芥(Arabidopsis thaliana),是一种广泛分布于亚洲、欧洲以及北非地区的小型开花植物。从分类地位上讲,它属于十字花科(Brassicaceae) 鼠耳芥属(Arabidopsis)。作为近年来最为广泛应用的模式植物,拟南芥在分子遗传学、植物学以及农业科学的研究中发挥了重要的作用,被称为植物中的果蝇,是目前公认的五大模式生物之一。拟南芥基因组测序已于2000年由国际合作完成,也是第一种完成全基因组测序和分析的植物。
拟南芥是二年生草本植物,高7~40厘米。基生叶有柄呈莲座状,叶片倒卵形或匙形;茎生叶较小,无柄,披针形或线形。叶片表面覆盖有单细胞表皮毛。总状花序顶生,花朵直径约3mm,花瓣4片,白色,匙形。长角果线形,长0.5~2厘米,每个含20~30粒种子。根分为主根和侧根,可容土壤细菌共生。春型拟南芥萌发后3周左右就可开花,能在6周内完成一个世代。严格自花传粉(图1)。
拟南芥生活史与一般的开花植物无异:减速分裂形成的大小孢子分别形成雌雄配子体,即胚囊和花粉。胚囊经过双受精的过程,受精卵与受精极核分别发育成胚和胚乳。
2 拟南芥研究的主要策略
在拟南芥研究中,使用最多的是遗传学研究策略,包括正向遗传学和反向遗传学。正向
遗传
拟南芥种植手册_tair
原版拟南芥规范种植手册
HANDLING ARABIDOPSIS PLANTS AND SEEDS
Methods used by the Arabidopsis Biological Resource Center
GROWTH OF PLANTS Planting on soil
Growth conditions
Control of pests
Plant isolation and harvesting
SEED HANDLING AND PRESERVATION
The methods used by the ABRC for handling plants and seeds are outlined below. These procedures are designed to generate healthy plants that give maximum set of pure seeds and to preserve these in the safest and most convenient manner. Many other approaches may be equally as good, especia
拟南芥成花途径
拟南芥成花途径
拟南芥成花途径
摘要
成花转变是一个复杂的过程,不仅是形态上的变化,而且包括在花芽分化前发生的一系列复杂的生理生化变化,通过感受外部环境因子(包括光周期、温度和GA等)变化,经内源因子(包括营养状况和年龄发育阶段等)作用,最终促进茎尖分生组织分化形成花或花序,保证生殖最优化。成花过程是一个复杂的调控网络,拟南芥中至少有7条成花调控途径,其中包括了一些编码不同类型蛋白的“成花整合因子”,它们通过整合各个途径的信号调控成花时间,例如能够快速促进花发育的
FLOWERING LOCUS T (FT)和
SUPPRESSOR OF
OVEREXPRESSION OF CONSTANS 1 (SOC1)。
关键词:光周期途径;春化途径;自主途径;年龄途径;赤霉素途径;常温途径;糖类途径
1
拟南芥成花途径
目前拟南芥中至少有7条主要的信号途径参与调控,即响应日照长度和感应光质调控开花的光周期途径(photoperiod pathway),低温促进成花的春化途径(vernalization pathway),赤霉素调控植物成花的赤霉素途径(GA pathway),与赤霉素和光周期不相关而依赖自身发育状况的自主途径(au
低起点教学如何提高思想品德课堂效率
【摘要】思想品德教学是一种思想上的引导教学,以培养学生的思维为主要教学目标。在本文中,笔者从思想品德课堂的性质入手,针对思想品德上的“低起点”教学方法进行阐述,并且总结出“低起点”教学在实际的品德课堂上的引用。
引言:
“好的起点等于成功的一半”,起点决定着学生的学习效果,在实际的教学中,我们通常会针对教学中的课堂导入部分进行一定的精心设计,而有的教师将这二者混淆,导致一些教学方法的使用错误,本文中指出了这些问题,并且总结了一些经验。
一、“低起点”教学的教学阐释
“低起点”教学是针对初中思想品德课堂上的教学起点而言,品德老师在课堂上对学生进行引导的初始阶段,可以适当降低难度,学生在学习的过程中就会很自然地跟随老师的引导,进而学习知识。
二、“低起点”教学在思想品德课堂上的应用
“低起点”教学的方式在初中思想品德课堂上应用比较广泛,尤其针对一些课堂效果比较差的情况,教师发现学生回答不出相应的问题或者注意力集中的时间比较短,都有可能是教学起点过高的现象导致的。
基于ISM的大学生课堂效率低的研究
关于影响大学生课堂效率低因素的调查问卷
您好,
我是兰州交通大学物流管理专业的学生,为了详细地了解我校的学生学习的状况,从而给出相关学习上的指导建议以及构建科学有效的学习机制提高大学生课堂学习效率,特进行此次调查,希望大家能严肃认真,实事求是地反映情况,您的配合将对我们学校有关大学生提高学习效率的研究有很大的帮助。我们诚恳地希望您的支持和配合。 基本资料
1.学院 专业
2.性别: A.男 B.女 ( ) 3.年级: A.大一 B.大二 C.大三 D.大四 ( ) 针对下列影响大学生课堂效率低下的因素进行选择
1.手机网络的诱惑 ( ) A.是 B.否 C.不能确定
2.认为考试只要考前突击不要平时的积累 ( ) A.是 B.否 C
基于ISM的大学生课堂效率低的研究
关于影响大学生课堂效率低因素的调查问卷
您好,
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2.性别: A.男 B.女 ( ) 3.年级: A.大一 B.大二 C.大三 D.大四 ( ) 针对下列影响大学生课堂效率低下的因素进行选择
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2.认为考试只要考前突击不要平时的积累 ( ) A.是 B.否 C
拟南芥成花时间调控
拟南芥成花时间调控
REGULATION OF TIME TO FLOWER IN ARABIDOPSIS
THALIANA
朱克明 学号:D06064 导师:梁建生
摘要:调控开花时间是大多数植物由营养生长向生殖生长转化的一个重要生长发育过程。影响拟南芥开花时间的因素有很多,其中光照和温度是两个主要的外部因素,而赤霉素(GA)和一些自主性因子是主要的内部因素。目前,一般按照对以上因素的反应将晚花突变体归于四条开花调控途径:光周期途径、春化途径、自主途径和GA途径。在不断变化的外部环境条件和内部生理条件下,这些途径通过一些主要的整合基因如SOC1、FT、LFY等实现了对拟南芥开花时间的精确调控。
关键词:拟南芥,开花时间,整合途径
Abstract: The timing of the floral transition has significant consequences for reproductive success in plants. There are many factors affecting the flowering time of Arabidopsis. The photoperiod and temperat