酵母菌是真菌还是细菌

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酵母菌DNA

标签:文库时间:2025-01-31
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采用3种方法对不同酵母菌的总DNA进行提取,经琼脂糖凝胶电泳、ND-1000型微量紫外分光光度计检测以及酶切、连接、预扩增试验结果的分析,表明采用改良氯化苄法提取酵母菌的总DNA质量最好,基本无DNA碎带,蛋白质污染小。通过对野生酵母菌菌株的验证试验,进一步证明采用改良氯化苄法提取的总DNA产量稳定、重复性好,可以直接用于限制性内切酶酶切试验,完全适于AFLP分析及一些其它分子生物学研究的要求方法三:酵母菌genomics/\基因组DNA的提取

一:仪器:同方法一

二:试剂:SE缓冲液(1M山梨醇,0.1MEDTA pH7.5);溶菌酶(蛋白酶K缓冲液(10mM Tris pH7.6 0.5% SDS 1mM EDTA);其余同前

三:操作

1.5ml 对数生长期细菌细胞

离心,12000rpm,1-2min

沉淀

溶于590ulSE缓冲液中混匀+10ul溶菌酶37℃,1hr

离心,12000rpm,8-10min

沉淀

溶于100μL,0.5μl蛋白酶K,混匀,37℃,1hr

加入1.2ml的CTAB

酵母菌DNA的提取

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酵母DNA提取方法

方法一:

石英砂法

1、5000rpm×5min 收集过夜培养的菌体(5ml左右),于 200μL 裂解液(50 mmol/ L Tris-HCl pH 8.0 , 180 mmol/ LEDTA pH 8.0 , 1 % SDS , 现配)中,加入 3/10 总体积石英砂在涡流混合器上振荡 13min,每隔 4min 将离心管取出用力甩几下,然后 65℃水浴 10min。 2、加入 200μL 5mol/L KAc,冰浴 8min; 3、12000rpm×5min 转移上清至新的离心管中;

4、加入 3 mol/L NaAc 35μl,加入异丙醇 200μL混匀后冰浴 8min,12000rpm×5min收集沉淀;

5、200μL TE 溶解,加入 RNase10μL,65℃水浴 10min; 6、加入 200μL 氯仿-异戊醇(24:1),抽提;

7、温柔地取上清 150μL ,加入 20μL 3 mol/L NaAc 及 375μL 无水乙醇,混匀后12000rpm×8min 收集 DNA;

8、70% 乙醇洗涤沉淀,吹干后 TE 溶解,-20℃保藏。

方法二:

蜗牛酶法

1. 接种于5 ml的YEPD培养基中在

细菌、酵母菌、霉菌和放线菌接种方法和形态观察

标签:文库时间:2025-01-31
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注意: 由于实验内容较多,所以我们只要把蓝色字体部分写在实验报告上即可,黑体字部分自己看一下。由于11-13周为教学质量检查

周,督导随时可能来查,所以预习报告还是要写。

细菌、酵母菌、放线菌和真菌接种方法和形态观察

一、微生物的接种技术

1 目的

1.1学习掌握微生物的几种接种技术

1.2 建立无菌操作的概念,掌握无菌操作的基本环节 2 基本原理

将微生物培养物或含有微生物的样品在无菌条件下移植到培养基上的操作技术称为接种。接种的关键是严格进行无菌操作。常用的接种方法有斜面接种、液体接种、穿刺接种、平板接种和固体接种等。 3 实验材料

3.1 菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、啤酒酵母、玫瑰暗黄链球菌、曲霉、荨麻青霉的斜面培养物

3.2 培养基:营养琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基及高氏1号培养基的斜面和平板 3.3 试剂:5ml无菌生理盐水试管 3.4 仪器与其他用品

酒精灯、记号笔、试管、橡胶塞、试管架、接种环、培养皿、超净台等。 4 操作步骤 4.1 斜面接种法

斜面接种法主要用于传代活化、纯化培养、鉴定或保存菌种。通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落,或挑取斜面,液体培养基中的纯培养物接种到斜面培养基上。操作应在无菌

利用酵母菌生产蛋白质

标签:文库时间:2025-01-31
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《生命科学文献与论文写作》课程论文

利用酵母菌生产蛋白质

摘要:蛋白质在细胞和生物体的生命活动过程中,起着十分重要的作用,是生命机体几乎所有重要活动的承担者。酵母菌应用于生物领域由来以久。6000年来人们用这种微小的真菌制作面包、啤酒和酒。现今用于直接治疗疾病的人类蛋白质的生产,已经成为一个每年有着190亿美元产值的产业。但是这种生物大分子目前却不能大批量的生产。它们大都是费时费力的从培养皿中培养的动物(如中国仓鼠)细胞分泌提取的。基因工程研究人员发现了一种用低等的酵母菌来生产人类蛋白质的新技术。这种技术开辟了一条大量生产生物药品的新途径。酵母菌能够用来生产复杂的人类糖蛋白,这种技术对于治疗用人类蛋白的生产有着革命性的意义。更好、更便宜、更快、更安全,并提供了一个对产品的最终质量进行控制的手段。作为宿主的酵母最常用的是毕赤氏酵母和酿酒酵母。 关键词:酵母菌;生产;蛋白质

Production of proteins using the yeast

Abstract: Protein in cells and organisms of biological processes, play an important role in almost

利用重组酵母菌生产人胰岛素

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利用重组酵母菌生产人胰岛素

摘要:利用重组酵母菌生成人胰岛素为以下流程:获得目的基因→构建重组质粒→构建基因工程菌→工程菌发酵→产物分离纯化→产品检验。其中前三个流程为产人胰岛素酵母工程菌的构建,根据人胰岛素的氨基酸序列和酵母偏爱的密码子, 采用基因半合成技术合成人胰岛素基因。将合成的胰岛素基因克隆到pPIC9质粒,构建了毕赤(Pichia)酵母重组表达载体pPINS319,用BglII线性化后用电转化法导入毕赤酵母GSll5菌株,经过营养筛选和PCR 复筛,得到含人胰岛素基因的毕赤酵母工程菌株。后三个流程为胰岛素的大规模发酵生产,通过补料-分批发酵获得发酵液,分离纯化后获得人胰岛素。纯化后的重组人胰岛素产品经SDS-PAGE检测,氨基酸组成分析及小鼠惊厥实验证明制得产品为有生物活性的人胰岛素。

关键词:重组酵母;人胰岛素;发酵;纯化;鉴定

Using recombinant yeast to produce human insulin

HuSheng 1142043040

Abstract:The proceedings of produce human insulin by recombinant yeast show as foll

微生物实验7 酵母菌 - 图文

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微生物实验报告

酵母菌的培养及观察实验

刘欣怡201100140057

生物科学基地班

组别:周一下午三组

同组者:曹平平,周楠,

刘艺,刘希伟

实验完成时间:2012年11月19号

一、实验目的

1、了解酵母菌的形态及出芽方式 2、学习区分酵母菌的死细胞和活细胞 3、掌握酵母菌子囊孢子的观察方法 4、巩固显微镜操作技术和无菌操作技术

二、实验器材

1.菌种 :

酿酒酵母7d麦氏培琼脂(产孢培养基)斜面培养物,酿酒酵母2d YPD(酵母合成培养基)液体培养物。 2. 培养基 :

酵母合成培养基,麦氏琼脂斜面 3、试剂:

0.01%美蓝水溶液,5%孔雀绿水溶液,0.5%番红水溶液,95%乙醇,蒸馏水、香柏油、去离子水等。 4. 仪器

试管,锥形瓶,酒精灯,显微镜,擦镜纸,酒精灯,载玻片,盖玻片,双层瓶,接种环,滴管,滤纸,镊子、培养皿等。

三、实验原理

1、培养基:

酵母菌的能源主要是糖,一般用麦芽汁琼脂培养基培养。但实验要求不是很严格时,可以用

微生物实验:酵母菌与霉菌的形态观察 -

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实验四 酵母菌与霉菌的形态观察

一. 实验目的

1. 2. 3. 4.

观察酵母菌的形态与结构并掌握其特征。

观察霉菌的菌落特征,学会霉菌的一般制作方法。 观察并掌握各种霉菌的个体形态及生长繁殖方式。 进一步熟悉显微镜的使用。

二. 实验原理

酵母菌是一类单细胞真菌,一般呈圆形、椭圆形,无性繁殖以芽孢为主,也有少数是裂殖,有些酵母菌能产生囊孢子,有的能形成假菌丝。酵母菌的菌落似细菌菌落,但较大且厚,多呈白色,少数为红色。酵母菌在液体中生长可形成菌膜、菌环、沉淀和浑浊。酵母菌的细菌结构较完善,即有壁、膜、质、核等结构。酵母菌的细胞形态、繁殖方式和培养特征均为菌种鉴定的依据。

酵母活细胞新陈代谢旺盛,活力强,还原力也强,若无毒的染料进入细胞,既被还原脱色,但死细胞及代谢作用缓慢的老弱细胞无此还原力。美兰是无毒染料,且能被活细胞还原成无色,故可用来区别细胞的死活。

霉菌是一些小型丝状真菌、单细胞(根霉、毛霉)或多细胞(曲霉、青霉),其细胞结构与酵母类似,同属真核细胞。

霉菌形态较复杂,个体较大,具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。其菌丝分为气生菌丝与营养菌丝(菌丝比放线菌粗得多)观察时请注意菌丝是否具有横膈膜、有无假根、无性繁殖时形成何种孢子,

04 酵母菌的形态观察和显微直接计数法

标签:文库时间:2025-01-31
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实验四 酵母菌的形态观察和显微直接计数法

酵母菌是单细胞的真核微生物,个体比细菌大得 多,细胞核与细胞质已有明显的分化。繁殖方式 也较复杂,无性繁殖主要是出芽生殖,仅裂殖酵 母属是以分裂方式繁殖;有性繁殖是通过接合产 生子囊孢子。 酵母菌的形态通常有球状、卵园状、椭圆状、柱 状或香肠状等多种。

Saccharomyces cerevisiae

本实验通过用美蓝染色制成水浸片来观察生活的 酵母形态和出芽生殖方式,区分死、活细胞。 美蓝是一种无毒性染料,它的氧化型是蓝色的, 而还原型是无色的,用它来对酵母的活细胞进行 染色,由于细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具 有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化型变 为无色的还原型,所以酵母的活细胞无色,而对 于死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们无此还 原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡 蓝色。因此,用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形 态,还可以区分死、活细胞。

一、实验目的和内容目的:了解酵母菌及其形态结构。内容:观察酵母菌个体形态、出芽方式,并区分 死、活细胞。

二、实验材料和用具

酿酒酵母(Saccharomyes cerevisiae) 斜面菌 种。 0.05%美蓝染色液; 显微镜、载玻片、擦镜纸、盖玻片、接

酵母菌的形态观察及其子囊孢子的观察 - 图文

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酵母菌的形态观察及其子囊孢子的观察

一.实验目的

1.了解并掌握酵母菌的形态及出芽方式。

2.学习并掌握区分酵母菌死活细胞的基本方法。

3.了解并掌握酵母菌子囊孢子形态的基本观察方法。

二.实验原理

1.酵母菌

酵母菌是多形的、不运动的单细胞真核微生物,细胞核与细胞质已

有明显的分化,菌体比细菌大。繁殖方式也较复杂,无性繁殖主要是出芽生殖,仅裂殖酵母属是以分裂方式繁殖;有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。本实验通过用美蓝染色浸片来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。

2.美蓝染液水浸片法( 鉴定酵母菌细胞的死活)

美蓝为无毒性染料,其氧化型为蓝色,而还原型为无色。用它对酵母菌染色时,由于活细胞的新陈代谢作用,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型,所以酵母的活细胞无色;对于死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此,用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态,还可以区分死、活细胞。

还原剂(活细胞的新陈代谢) 美蓝(氧化型) 美蓝(还原型) 蓝色

研究性学习——探究酵母菌呼吸方式的改进实验方案

标签:文库时间:2025-01-31
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综合目前常用的几种方案,比较适合中学生日常做实验用

探究酵母菌呼吸方式的改进实验方案

方案一:探究酵母菌的发酵现象(第1至2组的方案) 1、 准备2个相同矿泉水瓶,并分别标注为AB,

2、 先在杯子倒入半瓶温开水,再加入葡萄糖搅拌,使葡萄糖溶解。然后倒入A矿泉水中,在瓶口封上保鲜膜,并拧紧盖子;

3、 在杯子中倒入半瓶温开水,再加入葡萄糖搅拌溶解于水中。压碎酒饼(即酵母菌),倒入杯中进行搅拌,混合均匀后,倒入B矿泉水瓶中,在瓶口封上保鲜膜,并拧紧盖子。

4、 安放1天或2天,观察现象

现象:B瓶子变得很硬,保鲜膜上有水珠出现

注意事项:1、要用温开水,瓶盖一定要拧紧,一旦盖上瓶盖,就不能拧开,否则实验失败

2、静置在课室内,不要经常摇动。

方案二:探究酵母菌的发酵现象(第3至4组的方案)

1、 准备2个相同矿泉水瓶,并分别标注为C D,

2、 先在杯子倒入半瓶温开水,再加入葡萄糖搅拌,使葡萄糖溶解。然后倒入C矿泉水中,在瓶口用橡皮筋绑紧一个气球;

3、 在杯子中倒入半瓶温开水,再加入葡萄糖搅拌溶解于水中。压碎酒饼(即酵母菌),倒入杯中进行搅拌,混合均匀后,倒入D矿泉水瓶中,在瓶口用橡皮筋绑紧一个气球。

4、 安放1天或2天,观察现象

现象:D瓶上的气球被吹胀了

注意