uplc-ms

超高效液相色谱(UPLC)

超高效液相色谱技术（ultra performance liquid chcromatography，简称UPLC）是一种综合了小颗粒填料、非常低系统体积(死体积)及快速检测手段等全新的检测技术。在全面提升HPLC的速度、灵敏度及分离度的同时，保留其原有的实用性及原理。基于小颗粒技术的UPLC，并非普通HPLC系统改进而成。它不但需要耐压、稳定的小颗粒填料（可达1.7μm），而且需要耐压的色谱系统(>15,000psi)、最低交叉污染的快速进样器、快速检测器及优化的系统体积等诸多方面的保障，以充分发挥小颗粒技术优势。这就需要对系统所有硬件和软件的进行全面创新。世界第一个商品化UPLC产品是Waters ACQUITY UPLCTM 超高效液相色谱系统，它于2004年3月投入市场。

图1：填料技术的沿革

1．小颗粒填料改善分离的理论与科学基础

液相色谱30年的发展史是颗粒技术的发展史。颗粒大小的改变直接影响到柱效，从而对分离结果产生直接影响。由上图可知：随着颗粒度的不断降低，色谱分离度不断提高。事实上，上述规律的理论基础是著名的Van Deemeter方程。Van Deemeter方程是色谱科学家预测颗粒度变化而引起

waters UPLC 计算信噪比

Q：怎样计算信噪比？

A：已经建立好信噪比的自定义字段后，即可进行计算，具体步骤如下：

1) 单击鼠标左键进入 “浏览项目”。

2) 选择欲浏览数据所在的项目，然后单击“确定”，进入该项目。

3) 在“通道”

选项卡

看）打开。

“查看”键 “通道”选项卡

中选择欲处理的数据，单击（查

4)

进入查看窗口，通过“文件－打开－处理方法”打开相应的处理方法。

waters UPLC 计算信噪比

5)

按处理方法图标进入处理方法窗口。

6)

在处理方法窗口里选择“适应性”选项卡。

钩选计算适应性结果。

在“空体积时间”栏内填入适当的空体积时间，如果不确定，并且不需要计算相对保留时间，可尝试填入1或者0.1。

在下部的“基线噪音和漂移测量”区域内，填入“运行时间百分比”以及“基线开始时间”与“基线结束时间”。

取用于平均的运行时间百分比

运行时间（在这段时间内平均数据点）的百分比。Empower 软件利用此数值来计算平均时间，其中“取用于平均的运行时间百分比”与“总运行时间”的积等于“平均时间”。软件将“平均时间”与“基线开始时间”相加，然后用“基线结束时间”减去所得结果数值，从而确定两个平均区域。平均计算只在平均区域进行

waters UPLC 计算信噪比

Q：怎样计算信噪比？

A：已经建立好信噪比的自定义字段后，即可进行计算，具体步骤如下：

1) 单击鼠标左键进入 “浏览项目”。

2) 选择欲浏览数据所在的项目，然后单击“确定”，进入该项目。

3) 在“通道”

选项卡

看）打开。

“查看”键 “通道”选项卡

中选择欲处理的数据，单击（查

4)

进入查看窗口，通过“文件－打开－处理方法”打开相应的处理方法。

waters UPLC 计算信噪比

5)

按处理方法图标进入处理方法窗口。

6)

在处理方法窗口里选择“适应性”选项卡。

钩选计算适应性结果。

在“空体积时间”栏内填入适当的空体积时间，如果不确定，并且不需要计算相对保留时间，可尝试填入1或者0.1。

在下部的“基线噪音和漂移测量”区域内，填入“运行时间百分比”以及“基线开始时间”与“基线结束时间”。

取用于平均的运行时间百分比

运行时间（在这段时间内平均数据点）的百分比。Empower 软件利用此数值来计算平均时间，其中“取用于平均的运行时间百分比”与“总运行时间”的积等于“平均时间”。软件将“平均时间”与“基线开始时间”相加，然后用“基线结束时间”减去所得结果数值，从而确定两个平均区域。平均计算只在平均区域进行

选择题：

1．CH3CH2Cl的质谱图中，M+2峰的强度约为M峰的（ ） A 1/3 B 1/2 C 1/4 D 1/1

3．化合物CH3Br的质谱中，M+2峰的相对丰度与M峰的相对丰度比值约为（ ） A 1:1 B 1:2 C 1:3 D 1:6 5．对于含有氮元素的化合物，其分子离子峰m/z应满足（ ） A 无论含有奇数个或偶数个N原子，其m/z均为偶数

B 若含有偶数个N原子，m/z为奇数；若含有奇数个N原子，m/z为偶数 C 若含有偶数个N原子，m/z为偶数；若含有奇数个N原子，m/z为奇数 D 无论含有奇数个或偶数个N原子，其m/z均为奇数 6．下列化合物中，其分子离子峰的m/z为奇数的是（ ）

A C7H8 B C6H14N2 C C6H13N D CH3Cl 7．若母离子的m/z为105，子离子的m/z为77，则形成的亚稳离子的m/z为（ ） A 143

新手求答：

1.一步计算完成后，有两个文件.xtd和.xsd。再继续下一步计算，在哪个文件上进行操作呢？

2.到最终运算结束，分析文件的时候，要分析哪个文件呢？.xtd还是.xsd的，还是分析不同的参数要选不同的文件呢？ 1、一般xtd里全选，复制，新建xsd，粘贴出来即可；或者导入table取总能量最低的 2、除非分析性质随时间变化，一般就用xsd分析

xtd是轨迹文件，xsd是结构文件，下一步的计算一般选xsd文件，计算结束后分析不同的参数需要选不同的文件。

1.Error calculate_finite_basis : Convergence failed when doing finite basis set correction

这不提示了吗，应该是基组精度选择不合理

改变一下参数也许能收敛，提高截止能量，降低一下K点或精度

2.使用doml3计算磁性时，设置自旋多重度，发现

Multiplicity: Select the multiplicity from the dropdown list to perform a calculation on a specific spin state. Available option

MS——EEPO延展教育的宽度

时光如梭，岁月从沙漏中偷偷溜走，当我们还问着“时间都去哪儿了”时，面前的课堂里传来孩子们愉快而爽朗的笑声，我与EEPO的缘分已经悄无声息的走入一年之尾，初遇它——甚是疑惑，甚至不解；今读它——豁然开朗，叹为观止。通过一系列理论书籍、视频，一次次真实有效的操作，乃至和大师孟教授的“亲密接触”之后，内心之中才把MS---EEPO从迷惘的象牙塔上请下来，这一次，我把EEPO先进的教育的理论奉上心中的神坛。

用一句很真实的话说，在教育艺术的课堂上，我真的膜拜了。 上篇—— EEPO初探 EEPO给我最大的感受是三个字“新”、“动”、“活”，即新颖的MS——课型方式、以动制静的MS——学习方式、灵活的MS——评价方式。

一. 新颖的MS——课型方式

传统的教学课型方式没有固定形式，就语文学科而言，大的方面有作文课型、阅读课型、单元课型、单课课型等，但是从未对语文学科指出经典课型有哪些，MS——EEPO课型方式主要有要素组合式、哲学式、平台互动式等方式。这三个课型综合了所有学科的特点，从而推出一套能

MS报表方案

SQL SERVER 提供多种服务来实现BI的功能。

1）SQL SERVER Reporting Services 2）SQL SERVER Integration Services 3）SQL SERVER Analysis Services

一．安装部署 1.1 安装条件

Windows Installer 3.1 MDac IE 6.0

1.2 安装组件

? 如果安装SQL SERVER 数据库引擎： 在SQL Server 安装文件里包括：

Integration Services Analysis Services Reporting Services BI Development Studio

文件路径：

C:\\Program Files\\Microsoft SQL Server\\MSSQL.1

数据库引擎中的数据库文件，包括Reporting Services用的数据库文件： ReportServer.mdf

ReportServerTempDB.mdf

C:\\Program Files\\Microsoft SQL Server\\MSSQL.2

存放分析服务的项目，把

MS报表方案

SQL SERVER 提供多种服务来实现BI的功能。

1）SQL SERVER Reporting Services 2）SQL SERVER Integration Services 3）SQL SERVER Analysis Services

一．安装部署 1.1 安装条件

Windows Installer 3.1 MDac IE 6.0

1.2 安装组件

? 如果安装SQL SERVER 数据库引擎： 在SQL Server 安装文件里包括：

Integration Services Analysis Services Reporting Services BI Development Studio

文件路径：

C:\\Program Files\\Microsoft SQL Server\\MSSQL.1

数据库引擎中的数据库文件，包括Reporting Services用的数据库文件： ReportServer.mdf

ReportServerTempDB.mdf

C:\\Program Files\\Microsoft SQL Server\\MSSQL.2

存放分析服务的项目，把

液质联用

液质联用（HPLC-MS）又叫液相色谱-质谱联用技术，它以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。液质联用体现了色谱和质谱优势的互补，将色谱对复杂样品的高分离能力，与MS具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来，在药物分析、食品分析和环境分析等许多领域得到了广泛的应用。

基本意义

色谱的优势在于分离，为混合物的分离提供了最有效的选择，但其难以得到物质的结构信息，主要依靠与标准物对比来判断未知物，对无紫外吸收化合物的检测还要通过其它途径进行分析。质谱能够提供物质的结构信息，用样量也非常少，但其分析的样品需要进行纯化，具有一定的纯度之后才可以直接进行分析。因此，人们期望将色谱与质谱联接起来使用以弥补这两种仪器各自的缺点。

据统计，已知化合物中约80%的化合物是亲水性强、挥发性低的有机物，热不稳定化合物及生物大分子，这些化合物的分析不适宜用气相色谱分析，只能依靠液相色谱。如果能成功地将液相与质谱联接使用，这一技术将在生物、医药、化工和环境等领域大有应用前景。为达到这一目的需要一个起“接口”作用的装置将液相与质谱联

ICP-MS 基本原理和仪器基本构造

被分析样品通常以水溶液的气溶胶形式引入氩气流中，然后进入由射频能量激发的处于大气压下的氩等离子体中心区；

等离子的高温使样品去溶剂化、汽化解离和电离； 部分等离子体经过不同的压力区进入真空系统，在真空系统内，正离子被拉出并按其质荷比分离；

检测器将离子转化为电子脉冲，然后由积分测量线路计数；

电子脉冲的大小与样品中分析离子的浓度有关，通过与已知的标准或参比物质比较，实现未知样品的痕量元素定量分析。 仪器基本构造

电感耦合等离子体质谱仪组成部分：

① 样品引入系统 ② 离子源 ③ 接口

④ 离子聚焦系统 ⑤ 质量分析器 ⑥ 检测系统

四极杆 检测系统 质量分析器 离子聚焦系统 Turbo Pump 离子源 样

接口部分 品引入

Turbo Pump Rotary Pump Rotary Pump 系统

真空系统

样品引入系统

蠕动泵 雾化器 雾室

离子采集接口 截取锥、采样锥

离子聚焦系统

四极杆 90° 离子聚焦透镜

其原理是利用离子的带电性质，用电场聚集或偏转牵引离子，将离子限制在通向质量分析器

的路径上，也就是将来自截取锥的离子聚焦到质量过滤