叶绿体分离与荧光观察实验原理和注意事项

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叶绿体的分离及荧光观察

【实验目的】

1.学习使用差速离心法获取叶绿体

2.通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法。

3.观察叶绿体的自发荧光和次生荧光，并熟悉荧光显微镜的使用方法。

【实验原理】

1.高等植物中叶绿体象双凸或平凸透镜，长径5—10um，短径2-4um，厚2-3um。

高等植物的叶肉细胞一般含50-200个叶绿体，可占细胞质的40%。、

叶绿体的数目因物种细胞类型，生态坏境，生理状态而有所不同。在藻类中叶绿体形状多样，有网状，带状，裂片状和星形等等，而且体积巨大，可达100um.

叶绿体由叶绿体外被，类囊体和基质3部分组成。

叶绿体含有3种不同的膜：外膜，膜，类囊体膜和三种彼此分开的腔：膜间隙，基质和类囊体腔。

2.匀浆破碎细胞，利用差速离心方法分离等渗介质中的悬浮颗粒。收集类叶绿体大小的颗

粒，得到叶绿体。

差速离心法：颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心力以及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一时间，密度和大小不同的颗粒其沉降速度不同。

依次增加离心力和离心时间，就能够使非均一悬浮中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部．分批收集即可获得各种亚细胞组分。

叶绿体的分离应在等渗溶液(

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实验步骤和注意事项

实验步骤和注意事项：

1、认识光具座，将实验器材按蜡烛、凸透镜、光屏的顺序放置． (将凸透镜放在中间整数的位置上)

2、注意调节它们的高度，使烛焰、透镜中心和光屏中心在一条与光具座平行的直线上．（原因是什么？）

3、将蜡烛火焰与透镜的距离由远及近，即物距由大到小移动．观察成像特点并记录． (注意: 1、尽量多次测量； 2、光屏上的像必须调到最清晰的状态。

) 分析数据，比较物距和焦距的关系，得出成放大、倒立像的条件和缩小、倒立像的条件．成像的特点透镜焦距物距 u （范围）像距 v (范围) 正立、倒立放大、缩小虚像、实像u2f 2f vf 倒立缩小实像 U=2f v=2f 倒立等大实像 2f uf v2f 倒立放大实像 U=f / 不成像 f=10cm uf / 正立放大虚像特别注意以下问题：

（1）在物距是两倍焦距时成的像不和物体大小相等。

（2）物体在一倍焦距上不能成像的原因。

（3）物

合伙做生意的基本原则

2、付出少的人不敢监督。由于付出多的人没有得到什么回报（有时候只是区区数千元甚至数百元的工资），自然气粗，稍不高兴随时可能撂挑子，付出少的人根本不敢多话，否则自己收不了场。

3、时间长了关系就变质了。在上述两种心态的左右下，合伙人的关系就会逐渐微妙起来，久而久之合作就难以为继，甚至朋友都三、监督到位、惩罚有力

由于给予CEO足够的经济利益，并授予他足够的权限，所以其他合伙人可以名正言顺地监督他。 首先，会计和出纳应该由不同的合伙人聘请，分别对自己的雇主负责。从经济上掌握企业的命脉。如果财务人员不称职，CEO不能直接解雇，只能在合伙人会议上说明理由，要求重新聘请。至于财务公开则更是无需多言，合伙人当然随时有权查账。

其次，CEO应当定期提供企业经营状况汇总表，包括营业额、采购成本、办公成本、产品库存等，让合伙人了解企业的经营情况，以便提出建议或加强监督。

再次，CEO应当将管理模式的细节书面化备案，免得在CEO离职之后企业出现管理真空。这一条非常重要，它可以保证CEO永远不能挟持企业。虽然没有任何一个CEO欢迎这样的约定，但如果给予的报酬足够高，接受的人还是不在少数。

最后，应当在合伙协议中载明做不成。

事实上，合伙做生意

【课标要求】光合作用的基本过程。

【考向瞭望】综合考查光合作用和细胞呼吸各阶段的物质变化及其相互联系。

【知识梳理】一、捕获光能的色素（“绿叶中色素的提取和分离”的实验分析）

（一）原理解读：1、色素的提取：可以用无水乙醇（或丙酮）作溶剂提取绿叶中的色素，而不能用水，因为叶绿体中的色素不能溶于水。2、色素的分离：利用色素在层析液中的溶解度不同进行分离，溶解度大的在滤纸上扩散得快，反之则慢。

（二）实验流程图示：1、提取色素：（1）称取绿叶；（2）剪碎；（3）研磨：加入少许SiO2、CaCO3和10mL无水乙醇；（4）过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布；（5）收集滤液。2、制备滤纸条：（1）长与宽略小于试管，在一端剪去两角；（2）在距剪去两角的一端1cm处画铅笔线。3、画滤液细线：（1）沿铅笔线画一条直且均匀的滤液细线；（2）干燥后，再画一两次。4、色素分离：将滤液条插入有3mL层析液的试管中，有滤液细线的一端朝下。5、观察结果：滤纸条上色素带有四条，如图。

（三）色素的吸收光谱：叶绿素a和叶绿素b主要吸收红光和蓝紫光，胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光。

（四）实验中几种化学试剂的作用：1、无水 乙醇用于提取绿叶中的色素。2、层析液用于分离绿叶中的色素。3、二氧

食品化学实验相关事项

一、实验室规则

1．每个同学都应该自觉遵守课堂纪律，维护课堂秩序，不迟到，不早退，不大声谈笑。不穿高跟鞋和皮肤暴露较多的衣服。

2．实验前必须认真预习，熟悉本次实验的目的、原理、操作步骤，懂得每一操作步骤的意义和了解所用仪器的使用方法，否则不能开始实验。

3．实验过程中要听从教师的指导，严肃认真地按操作规程进行实验，并把实验结果和数据及时、如实记录在实验记录本上，文字要简练、准确。完成实验后经教师检查同意，方可离开实验室。

4．实验台面应随时保持整洁，仪器、药品摆放整齐。公用试剂用完后，应立即盖严放回原处。勿使试剂、药品洒在实验台面和地上。实验完毕，仪器洗净放好，将实验台面抹拭干净，才能离开实验室。

5．使用仪器、药品、试剂和各物品必须注意节约。洗涤和使用仪器时，应小心仔细，防止损坏仪器。使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，发现故障须立即报告教师，不得擅自动手检修。

6．实验室内严禁吸烟、进食！加热用的电炉应随用随关，严格做到：人在炉火在，人走炉火关。乙醇、丙酮、乙醚等易燃品不能直接加热，并要远离火源操作和放置。实验完毕，应立即拨去电炉开关和关好水笼头，拉下电闸。离开实验室以前应认真、负责地进行检查水电，严防发生安全

【课标要求】光合作用的基本过程。

【考向瞭望】综合考查光合作用和细胞呼吸各阶段的物质变化及其相互联系。

【知识梳理】一、捕获光能的色素（“绿叶中色素的提取和分离”的实验分析）

（一）原理解读：1、色素的提取：可以用无水乙醇（或丙酮）作溶剂提取绿叶中的色素，而不能用水，因为叶绿体中的色素不能溶于水。2、色素的分离：利用色素在层析液中的溶解度不同进行分离，溶解度大的在滤纸上扩散得快，反之则慢。

（二）实验流程图示：1、提取色素：（1）称取绿叶；（2）剪碎；（3）研磨：加入少许SiO2、CaCO3和10mL无水乙醇；（4）过滤：漏斗基部放一块单层尼龙布；（5）收集滤液。2、制备滤纸条：（1）长与宽略小于试管，在一端剪去两角；（2）在距剪去两角的一端1cm处画铅笔线。3、画滤液细线：（1）沿铅笔线画一条直且均匀的滤液细线；（2）干燥后，再画一两次。4、色素分离：将滤液条插入有3mL层析液的试管中，有滤液细线的一端朝下。5、观察结果：滤纸条上色素带有四条，如图。

（三）色素的吸收光谱：叶绿素a和叶绿素b主要吸收红光和蓝紫光，胡萝卜素和叶黄素主要吸收蓝紫光。

（四）实验中几种化学试剂的作用：1、无水 乙醇用于提取绿叶中的色素。2、层析液用于分离绿叶中的色素。3、二氧

干 燥 失 重 测 定 法

干燥失重测定法分为（1）常压恒温干燥法（2）减压干燥法（3）干燥剂干燥法 （1）常压恒温干燥法：

概念：将供试品置已在相同条件下干燥至恒重的扁形称量瓶内，精密称定，于烘箱内在规定

温度下干燥至恒重。

适用性：本法适用于受热稳定及水分易赶除的药物。

干燥原理：湿物料进行干燥时，同时进行着二个过程：（1）热量由热空气传递给湿物料，

使物料表面上的水分立即气化，并通过物料表面处的气膜，向气流主体中扩散；（2）由于湿物料表面处水分气化的结果，使物料内部与表面之间产生水分浓度差，于是水分即由内部向表面扩散。因此，在干燥过程中同时进行着传热和传质二个相反的过程。干燥过程的重要条件是必须具有传热和传质的推动力。

操作方法：

1取供试品，混合均匀（如为较大的结晶，应先迅速捣碎使成2mm以下的小粒），取约1g或各品种项下规定的重量，置与供试品相同条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定，除另有规定外，在105℃干燥至恒重。由减失的重量和取样量计算供试品的干燥失重。 2供试品干燥时，应平铺在扁形称量瓶中，厚度不可超过5mm，如为疏松物质，厚度不可超过10mm。放入烘箱或干燥器进行干燥时，应将瓶盖取下，置称量瓶旁，或将瓶盖半开进行干燥；取出

本文档主要讲述静电测量原理及其注意事项,希望对大家有帮助。

静电测量原理及其注意事项

静电测量就是用相应的测量装置测量有关静电的物理参数。主要的静电参数有：静电电位，介质的质量电量密度和体积电量密度;静电放电火花的放电电量、放电能量、放电电流;电阻、电容、电感;介质的表面电阻率和体电阻率、介电常数;放电时间常数等等。测量用的仪器设备有：静电电位仪、高阻计、电容电桥、电感电桥、检流计、示波器、静电衰减仪、法拉第简、静电感度测量装置等。 静电测试是整个静电防护工程中不可或缺的组成部分，也是静电防护设计和管理的依据。静电基本参数的测试是静电测试的主要组成部分，对分析静电起电与放电的机理，判断作业工况中静电放电的危险性，确定作业环境的静电隐患等级，检验静电预防措施的效能以及评估静电灾害事故。（防静电服的防静电原理是什么？ ）

静电对人们的日常生产和生活的影响越来越大，其应用和危害也日益引起世界的关注，一方面静电技术已被广泛地应用到各行各业，如电子照相、静电存储、电集尘、静电复印机等等；另一方面，静电造成的危害甚至灾难也时有发生，如飞行器的机体因为电晕放电而干扰了通信等门，”，尤其是在航空航天领域，因为高分子材料的大量应用，静电的危害更为严重。

测量静

资源二室四平地区二类调查注意事项

1、外业前，各组组长负责检查各项资料及工作程序准备是否齐全。各单位要与

相临单位进行接图，防止外业出现错、漏。

2、应充分收集利用局方掌握的与本次调查相关的各种资料和信息，对调查单位的情况进行充分的了解，保证工作的顺利开展。

3、样地除落入大片耕地外，其它都应现地落实。改设样地的GPS坐标值一般应为“00”点。样地地类是按中心点小班地类确定，当样地落在小班边缘时要注意地类的确定。

4、样地应进行有林地成数计算，计算过程可记录在样地最后一页（即样地位置图的背面），精确到0.1。

5、当一个乡镇内含有多个国营林场时，要注意区分。

6、各级被调查单位驻址、非林地小班的四旁树、新修建的主要道路和水渠等，调查时不要漏。部分道路和渠在卫片上分辨不清的，要现地落实，并及时修改线图。

7、林带不要含跨公路、铁路、水渠等扣面积的非林地线性小班。

8、明确小班因子借用条件。林带小班借用因子后，林带宽度仍需实测。借用的小班号在备注栏注明。

9、做样圆时，严格用皮尺实测样木距离，禁止目测。

10、能使用PDA调绘的，要注意原始数据（包括小班、样圆、样带、角规、踩点

数据）的备份，注意严格按程序要求的步骤操作，避免因操作失误引起错误。

资源二室四平地区二类调查注意事项

1、外业前，各组组长负责检查各项资料及工作程序准备是否齐全。各单位要与

相临单位进行接图，防止外业出现错、漏。

2、应充分收集利用局方掌握的与本次调查相关的各种资料和信息，对调查单位的情况进行充分的了解，保证工作的顺利开展。

3、样地除落入大片耕地外，其它都应现地落实。改设样地的GPS坐标值一般应为“00”点。样地地类是按中心点小班地类确定，当样地落在小班边缘时要注意地类的确定。

4、样地应进行有林地成数计算，计算过程可记录在样地最后一页（即样地位置图的背面），精确到0.1。

5、当一个乡镇内含有多个国营林场时，要注意区分。

6、各级被调查单位驻址、非林地小班的四旁树、新修建的主要道路和水渠等，调查时不要漏。部分道路和渠在卫片上分辨不清的，要现地落实，并及时修改线图。

7、林带不要含跨公路、铁路、水渠等扣面积的非林地线性小班。

8、明确小班因子借用条件。林带小班借用因子后，林带宽度仍需实测。借用的小班号在备注栏注明。

9、做样圆时，严格用皮尺实测样木距离，禁止目测。

10、能使用PDA调绘的，要注意原始数据（包括小班、样圆、样带、角规、踩点

数据）的备份，注意严格按程序要求的步骤操作，避免因操作失误引起错误。