植物生物学实验自主实验

实验一 多酚氧化酶活性测定（3学时）

一、实验目的：

掌握测定多酚氧化酶活性的方法；了解多酚氧化酶的特性 二、实验原理：

多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，能使一元酚和二元酚氧化生成醌。醌有颜色，在525nm下有最大光吸收，通过分光光度法测定反应体系颜色变化可测定酶活性。 三、器材与试剂

低温离心机、s22pc分光光度计、儿茶酚、pH 7.2磷酸缓冲液 四、实验内容：

1．称取马铃薯0.5克，加入2.5mL pH 7.2磷酸缓冲液，少许PVP，研磨匀浆，转移到离心管，再用2.5mL pH 7.2磷酸缓冲液冲洗研钵，合并提取液。4℃ 4000rpm离心15分钟，上清液即为粗酶液。

2．在试管中，加入2.5mL pH 7.2磷酸缓冲液，1.5mL 儿茶酚以及1mL 粗酶液，空白调零以1mL磷酸缓冲液代替粗酶液。

3．A值测定：加入粗酶液后迅速混匀，立刻于525nm下测定反应体系的A值，每隔30秒记录一次，共记录5次。 4．计算酶活力。按下式计算 PPO活性＝U/min gFW

A值增加0.001定义为一个酶活力单位。 五、实验报告：

计算所测材料的PPO活性。选择A值变化均匀的三组数值求平均值。

实验二 植物耐盐生理指标测定（9学时）

一、实验目

一、实验目的与要求1.掌握光学显微镜的使用和保养。2.掌握植物细胞的显微构造。 3.掌握临时装片法和部分染色方法。 4.掌握植物生物学实验报告的制作及生物 绘图法。

http://202.119.109.14/zwsy/index.htm

植物生物学实验(一) 植物细胞的基本结构、 主要细胞器及其代谢产物南京师范大学生命科学学院

一、实验目的与要求 5. 了解原生质体的形态特征。 6. 掌握植物细胞内的几种主要的贮藏营养 物质(淀粉粒、晶体等)的形态结构及 检验方法。 7. 通过细胞的胞间连丝、纹孔以及细胞质 流动现象的观察，了解植物体本身是一 个统一的整体。

二、实验材料洋葱(Allium cepa L.)的鳞叶，黑藻 (Hydrilla verticillata Royle)的叶，红 辣椒(Capsicum annuum L.)的果实，马 铃薯(Solanum tuberosum L.)的块茎， 黑藻(Hydrilla verticillata)的幼嫩植株。

三、实验内容与方法 1、显微镜的构造与基本使用方法图1 普通光学显微镜的结构 1 目镜； 2 物镜； 3 光源； 4 聚光器； 5 光圈； 6 镜座； 7 镜柱； 8 镜臂； 9 镜筒； 10

生物学大实验（硕士研究生实验课内容）

一． 细胞培养技术与方法 1. 教学目的与要求：

1) 了解细胞培养室的设置，设备和无菌操作。 2) 掌握细胞培养用器械的清洗与消毒方法。 3) 掌握细胞培养的实验程序 。

4) 掌握细胞的复苏、细胞的计数、细胞的传代培养、细胞的冻存方法。

2. 教学内容：

（1）实验器材的清洗包装和消毒：

一）玻璃器械洗消：

（一）新的玻璃器皿的洗消： 1.自来水刷洗，除去灰尘。

2.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。

3.刷洗、烘干：12小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干。

4.泡酸、清洗：用清洁液（重铬酸钾120g：浓硫酸200mL：蒸馏水1000mL）浸泡12小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次，最后蒸馏水冲洗3-5次，用双蒸水过3次。

5.烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸（油光纸）包装。 6.高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向15磅时，维持20-30分钟。 7.高压消毒后烘干 。

（二）旧的玻璃器皿的洗消：

1.刷洗、烘干：使用

生物学大实验（硕士研究生实验课内容）

一． 细胞培养技术与方法 1. 教学目的与要求：

1) 了解细胞培养室的设置，设备和无菌操作。 2) 掌握细胞培养用器械的清洗与消毒方法。 3) 掌握细胞培养的实验程序 。

4) 掌握细胞的复苏、细胞的计数、细胞的传代培养、细胞的冻存方法。

2. 教学内容：

（1）实验器材的清洗包装和消毒：

一）玻璃器械洗消：

（一）新的玻璃器皿的洗消： 1.自来水刷洗，除去灰尘。

2.烘干、泡盐酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀盐酸中12小时以除去脏物、铅、砷等物。

3.刷洗、烘干：12小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干。

4.泡酸、清洗：用清洁液（重铬酸钾120g：浓硫酸200mL：蒸馏水1000mL）浸泡12小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次，最后蒸馏水冲洗3-5次，用双蒸水过3次。

5.烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸（油光纸）包装。 6.高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向15磅时，维持20-30分钟。 7.高压消毒后烘干 。

（二）旧的玻璃器皿的洗消：

1.刷洗、烘干：使用

普通生物学实验（三）

教 案

目 录

35、细菌的简单染色、革蓝氏染色???????????????????????3 36、细菌的芽孢、荚膜、鞭毛染色鉴定及运动性观察???????????????5 37、微生物细胞形态及菌落特征观察??????????????????????11 38、培养基制作、灭菌与无菌操作接种技术??????????????????? 19 39、微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数???????????????????35 附：微生物的菌种保藏?????????????????????????????41 40、微生物鉴定中常用的生化反应……………………………………………………………45 附：微生物自动鉴定仪鉴定???????????????????????????48 41、微生物细胞大小测定及显微镜直接计数 ??????????????????51 42、乳酸菌分离及食用乳酸制作 ???????????????????????55 ①乳酸菌分离与鉴定?????????????????????????????55 ②食用乳酸制作???????????????????????????????55

普通生物学实验（三）

教 案

目 录

35、细菌的简单染色、革蓝氏染色???????????????????????3 36、细菌的芽孢、荚膜、鞭毛染色鉴定及运动性观察???????????????5 37、微生物细胞形态及菌落特征观察??????????????????????11 38、培养基制作、灭菌与无菌操作接种技术??????????????????? 19 39、微生物的分离纯化及稀释平板菌落计数???????????????????35 附：微生物的菌种保藏?????????????????????????????41 40、微生物鉴定中常用的生化反应……………………………………………………………45 附：微生物自动鉴定仪鉴定???????????????????????????48 41、微生物细胞大小测定及显微镜直接计数 ??????????????????51 42、乳酸菌分离及食用乳酸制作 ???????????????????????55 ①乳酸菌分离与鉴定?????????????????????????????55 ②食用乳酸制作???????????????????????????????55

绪论

了解植物界的基本概况和研究植物的重要性，以及植物科学的发展简史和发展趋势，了解植物生物学和分支学科的研究内容，明确学习目的，掌握植物生物学的学习方法。

第一章 植物细胞与组织 （一）名词解释:

1. 植物组织 2.细胞分化 3.分生组织 4.传递细胞 5.维管束、维管组织和维管系统 6.细胞的全能性 7.极性 （二）判断与改错：

1． 只有多细胞生物才有细胞分化现象。 2.皮孔是表皮上的通气组织。 3.水生植物储水组织很发达。

4.成熟的导管分子和筛管分子都是死细胞。 5.活的植物体并非每一个细胞都是有生命的。 6.“棉花纤维”不属于纤维。

7.筛域即筛管分子的侧壁上特化的初生纹孔场。 8.成熟的筛管分子是无核、无液泡、管状的生活细胞。 9.分泌道和分泌腔均由细胞中层溶解而形成。 （三）填空：

1.导管是由许多 分子连接而成，其相连的横壁上形成 孔，侧壁有 、 、 、 和 五种加厚式样。

2.根据在植物体中所处的位置，可把分生组织区分为

绪论

了解植物界的基本概况和研究植物的重要性，以及植物科学的发展简史和发展趋势，了解植物生物学和分支学科的研究内容，明确学习目的，掌握植物生物学的学习方法。

第一章 植物细胞与组织 （一）名词解释:

1. 植物组织 2.细胞分化 3.分生组织 4.传递细胞 5.维管束、维管组织和维管系统 6.细胞的全能性 7.极性 （二）判断与改错：

1． 只有多细胞生物才有细胞分化现象。 2.皮孔是表皮上的通气组织。 3.水生植物储水组织很发达。

4.成熟的导管分子和筛管分子都是死细胞。 5.活的植物体并非每一个细胞都是有生命的。 6.“棉花纤维”不属于纤维。

7.筛域即筛管分子的侧壁上特化的初生纹孔场。 8.成熟的筛管分子是无核、无液泡、管状的生活细胞。 9.分泌道和分泌腔均由细胞中层溶解而形成。 （三）填空：

1.导管是由许多 分子连接而成，其相连的横壁上形成 孔，侧壁有 、 、 、 和 五种加厚式样。

2.根据在植物体中所处的位置，可把分生组织区分为

实验一 显微镜的结构及使用

[实验目的]

（一）熟悉显微镜的结构及各部件性能。 （二）掌握显微镜的使用方法。 （三）了解显微镜的维护方法。 [实验原理]

虽然显微镜的目镜和物镜的结构很复杂，但它的作用相当于一个凸透镜，其成像原理和光路图如图1所示，被检物体AB放在物镜（O1）下方的1—2倍焦距之间，则在物镜（O1）后形成一个倒立的放大实像A1B1，这个实像正好位于目镜（O2）的下焦点之内，通过目镜后形成一个放大的虚像A2B2，这个虚像通过调焦装置使其落在眼睛的明视距离处，即25cm,使所看到的物体最清晰，也就是说虚像A2B2是在眼球晶状体的两倍焦距之外，通过眼球后在视网膜形成一个倒立的A2B2缩小像A3B3。

[实验器材]擦镜纸 字母装片 羊毛交叉擦片 普通光学显微镜 二甲苯 香柏油 三 内容与方法：

普通光学显微镜(Microscope)的外形和结构因类型不同略有差异，但基本结构和功能是相似的。（图2） （一） 1.

微镜的基本结构及功能：光学显微镜由机械部分、照明部分和光学部分构成。 机械部分：

（1）镜座：位于底部的金属座。一般为马蹄形，用以支持和稳定整个镜体。 （2）镜柱：镜座与镜臂相连的短柱。

（3）镜臂：镜柱上方弯曲部分

第一章 植物细胞的结构与功能

质膜：是包围在细胞质表面的一层薄膜，通常紧贴细胞壁，厚度约7～8 nm （原生质体表面的一层薄膜，脂类和蛋白质）

质膜的结构：脂双层+膜蛋白+膜糖

质膜的功能：1.物质跨膜运输2.能量转换3.代谢调节4.细胞识别5.抗逆性6.信号转导7.纤维素的合成和微纤丝的组装

生物膜的“流动镶嵌模型”主要特点：有序性、流动性、不对称性

质膜有许多重要的生理功能。质膜具有选择透性，能有选择地允许物质出入细胞，能控制细胞与外界环境之

间的物质交换，维持细胞内环境的相对稳定；质膜又具胞饮作用、吞噬作用和胞吐作用；此外，质膜还具有主动运输，接受和传递胞外信息，细胞间的相互识别以及抵御病菌感染等功能。因此，质膜对细胞的生命活动有重要作用。

细胞壁

化学组成：主要是多糖，包括纤维素、果胶质和半纤维素等。往往在多糖组成的细胞壁中添加了其他成分，如木质素，还有不亲水的角质、木栓质和蜡质等。 层次：根据时间和化学成分的不同分成三层：

①胞间层（中胶层、中层）：细胞分裂产生新细胞是最早形成，是相邻细胞共有的一种结构，存在于细胞壁的最外面。主要成分是果胶质，特性是柔软和胶粘，由可塑性，在细胞间起缓冲作用。 ②初生壁：细胞分裂和正在生长时形成的细胞