dccik细胞免疫疗法成熟吗

篇一：DC-CIK生物免疫疗法

一、DC细胞治疗 ............................................................................................................. 1

什么是DC细胞治疗 ................................................................................................. 1

DC细胞治疗肿瘤的原理 ........................................................................................... 2

DC细胞治疗的肿瘤有哪些 ........................................................................................ 2

DC细胞治疗方案的优势 .................................................................

湿疣疱疹最新疗法：T细胞自体免疫疗法

据了解，目前治疗湿疣疱疹的方法很多，但根据临床治疗情况显示，效果都不是很理想，由沈阳军都医院的“T细胞自体免疫疗法”对湿疣疱疹的治疗效果非常显著，该方法疗效高，无痛苦、无损伤、副作用少，有效率在100%，在临床上有一定推广价值。

真实案例：患者亲身经历，控诉尖锐湿疣种种罪行

王先生说：“现在我和我的老婆生活的很美满，我也在尽全力弥补对她的伤害。其实在我得病以后，一直偷偷的在网上买药进行治疗，但是没有任何效果。后来老婆也说私处有点不舒服，我就彻底害怕了。我做了对不起老婆的事，自己也受到了惩罚，得了这种病，我是活该。但是把老婆也传染了，真是太对不起她了。最后我打听到了沈阳军都医院，医生采用“T细胞自体免疫疗法”只用了3天就把病治好了，还建议我老婆也来检查一下。以前没敢告诉她实情，但是现在知道了这病不光难治，还可能会导致癌变，我顾不了那么多了，把事都跟老婆说了，把她带到了医院。果然，她被我传染了。但是经过治疗后，现在也没事了。真是谢谢沈阳军都医院的专家，救了我，也救了我老婆，还救了我们这个家。从今以后，我再也不会出去鬼混了”。

据新技术定期更新统计，已临床治愈患者数十万余例

中国科学院“T细胞自体免疫疗法”是目前国际医学

Sartorius赛多利斯再生医学生物工艺｜基因治疗｜细胞疗法｜细胞免疫疗法

再生医学疗法修复、替代和改造人体细胞、组织和器官，以恢复正常功能。该学科具有巨大潜力，有助于解决目前传统制药或生物制药产品尚未满足的临床需求。在科学技术能够发挥无限潜力并实现稳健的商业化模式之前，再生药物开发公司必须克服众多工业化挑战，其中包括工艺放大和规模扩大以及应对污染风险。

赛多利斯斯泰帝生物技术公司是全球生物行业的解决方案供应商，凭借针对行业设计的先进技术，为从事再生医学的企业提供支持。凭借广泛的创新技术和服务，赛多利斯积极开发一次性自动化系统，为各类再生药物的开发、分析和制造提供支持。

赛多利斯从研究到商业制造，能够为基因治疗的各个阶段提供综合的工作流程解决方案，如病毒载体、细胞疗法（如间充质干细胞）和细胞免疫疗法（如CAR-T）。

基因治疗

赛多利斯技术非常适合生产病毒疫苗、载体和基因疗法。它们支持病毒的端到端一次性处理，涵盖工艺开发到商业生产（2000 L规模）的各个阶段。病毒相关产品制造商可从赛多利斯独特的上游和下游技术，以及包括工艺开发咨询、成本建模和工艺工程能力在内的分析和服务中受益。

基因治疗（GT）已成为再生医学领域发展最快、最有前景的领域之一，具有广泛

学习目标 掌握 HSC功能特征 掌握阳性和阴性选择的生物学意义 罗列 T 、 B 细胞的主要表面标志，并掌握其功能:-TCR-CD3 complex; -BCR complex; -coreceptors; -co-stimulatory molecules and co-stimulatory receptors

掌握T、B细胞的分类方法与功能 掌握 NK 细胞的特点

I 免疫系统:

概述

Tissues and organs Cells Molecules

免疫细胞的类型Cells of adaptive immune systemAntigen specific lymphocytes (T,B cells) Antigen presenting cells抗原提呈细胞

Cells of innate immune systemMononuclear phagocytes 单核-巨噬细胞 Granulocytic cells 粒细胞 Mast cells 肥大细胞 Natural killer cells 自然杀伤细胞 Platelets 血小板4

Hematopoietic Stem Cell (HSC ) 造血干细胞 H

学习目标 掌握 HSC功能特征 掌握阳性和阴性选择的生物学意义 罗列 T 、 B 细胞的主要表面标志，并掌握其功能:-TCR-CD3 complex; -BCR complex; -coreceptors; -co-stimulatory molecules and co-stimulatory receptors

掌握T、B细胞的分类方法与功能 掌握 NK 细胞的特点

I 免疫系统:

概述

Tissues and organs Cells Molecules

免疫细胞的类型Cells of adaptive immune systemAntigen specific lymphocytes (T,B cells) Antigen presenting cells抗原提呈细胞

Cells of innate immune systemMononuclear phagocytes 单核-巨噬细胞 Granulocytic cells 粒细胞 Mast cells 肥大细胞 Natural killer cells 自然杀伤细胞 Platelets 血小板4

Hematopoietic Stem Cell (HSC ) 造血干细胞 H

　　我们知道，我们的身体是一个由细胞构成的王国，极其精密复杂，同时又高度有序。任何伟大的王国都既需要能干建设者，也需要勇猛防卫兵，我们身体细胞王国也不例外。

　　两者功能有什么不同

　　当我们的人体还在成长时，干细胞是细胞王国的建设者，通过分化源源不断提供新生细胞，增加我们身体细胞的数量;当我们成年后身体不再成长，干细胞又会扮演细胞王国的维护者，及时替换和更新衰老或受损的细胞。

　　干细胞是建设者

　　当有外敌入侵，如细菌和病毒，免疫细胞就会扮演细胞王国的军队，快速反应，将其清除。如果细胞王国中出现叛变分子，如正常细胞突变为癌细胞，免疫细胞就会扮演安保系统，将其识别并清除。

　　免疫细胞是防卫者

　　当外敌入侵过多，或王国内叛变分子太多，免疫细胞没有能力全部清除时，我们的身体就会生病。

　　两者如何分类

　　现在，让我们来进一步分别了解干细胞和免疫细胞，他们都分哪些种类，不同种类功能有何差异：

　　(1)按照分化潜能分类，干细胞分为：全能干细胞、多能干细胞和专能干细胞。

　　如果把人体比喻为一棵树，深埋大地的种子就是全能干细胞，就如同种子可以发育成长为一颗参天大树。

　　大树的主要枝干可以比喻为多能干细胞，如脐带/胎盘间充质干细胞，可以向

细胞免疫荧光染色

1. 盖玻片处理：用前1天用纱布擦净灭菌，放入6孔板。

2. 接种细胞：较低密度为适宜，约2000－10000个/孔（根据细胞生长状态决定，常用

5000个/孔），2ml（浓度为2500/ml）

3. 24h后细胞贴壁，根据需要同步16－18h，干预处理，细胞融合60－70％时染色最

佳

4. 37度PBS洗涤，3ml/孔，贴边加（可将6孔板倾斜，加完样在放正以防冲掉细胞，

0.5min。室温PBS也可，但4度禁止，否则细胞易皱缩。

5. 固定：4％多聚甲醛(1ml)，先常温稳定5min，然后4度，10min，（可放在饭盒内）。 6. 吸掉多聚甲醛，迅速加PBS 5ml/孔，洗涤5min×3次，镜下观察，细胞形态如前。 7. 透化：0.1％－4％triton×－100，1ml/孔，室温透化5min（triton是去污剂，目的是

将脂质成分破坏，如细胞膜、核膜等，故不影响实验结果，可不用洗涤）

8. 5％BSA（滤过）室温封闭至少20min（可配制含5％BSA和0.2％triton的混合液，将

两步合成一步）风干

9. 用5％BSA将一抗1：50或1：100（常用）稀释至EP管 200ul/玻片 10. 将纱布垫在饭盒中，去离子水润湿纱

第十三章 B淋巴细胞介导的体液免疫应答

一、单项选择

1. 再次体液免疫应答时，下述哪项是正确的？

A. 抗体产生的潜伏期短 B. 抗体亲和力低 C. 抗体维持时间短 D. 以IgM抗体为主 E. 刺激的抗原与初次不同 2. 体液免疫应答主要由下列哪种免疫细胞所介导：

A. T细胞 B. B细胞 C. NK细胞 D. 吞噬细胞 E. 上皮细胞 3. 下述哪项不是记忆性B细胞的特点：

＋

A. 大小与静止B细胞相仿 B. 可持续分泌高水平Ig C. CD27 D. 再次与相同抗原相遇时可迅速活化并分泌大量Ig E. 存活时间较长 4. B细胞对以下哪种抗原的应答需要T细胞辅助： A. 白喉毒素 B. 脂多糖 C. 荚膜多糖

D. 金黄色葡萄球肠毒素 (SEA) E. 以上都不是 5. 下列哪种描述不是再次免疫应答的特点： D

A. 潜伏期短 B. 抗体浓度增加快，快速到达平台期

C. 抗体维持时间长 D. 抗体水平持续很低 E. 诱发再次应

肿瘤的细胞免疫治疗

□华中科技大学同济医学院附属协和医院干细胞研究与应用中心

湖北省生物靶向治疗研究重点实验室

傅冰洁张萌李欣审校黄士昂教授

（２００７）０４－００６１－０４［中图分类号］Ｒ７３０．５［文献标识码］Ａ［文章编码］１６７１－９４５Ｘ

肿瘤是各种致癌因素诱发细胞恶变和多种免疫细胞抗肿瘤监测杀伤功能两种“阴阳”机制互动失衡导致的恶性疾病。传统的肿瘤治疗主要是通过手术、化疗与放疗来达到早期根除肿瘤和减轻瘤负荷的目的，存在着肿瘤转移与复发的危险性，具有损伤正常组织与免疫功能低下等严重副作用，导致目前临床上肿瘤转移、复发和死亡的几率极高。肿瘤的免疫细胞治疗是通过恢复与增强肿瘤患者自身的免疫监测和杀瘤功能，可以有效地杀灭患者术后和放化疗后体内残存的肿瘤细胞，达到治疗肿瘤、预防复发与转移和最终根治肿瘤的目的，具有特异性强、副作用轻等优点，正在逐步成为肿瘤综合治疗中的一个重要环节，也是当前肿瘤治疗基础研究和临床应用的热点与发展方向。

目前的肿瘤免疫细胞治疗主要包括：细胞因子诱导杀伤细胞、淋巴因子激活杀伤细胞、自然杀伤细胞和特异性更强的肿瘤浸润细胞等具有直接杀伤肿瘤细胞效应的免疫细胞，可呈递肿瘤特异性抗原以活化具杀伤效应的Ｔ细胞的ＤＣ细胞，以及具有负向免疫调

细胞爬片免疫荧光实验步骤

第一天：

1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；

2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min， PBS浸洗玻片3次，每次3min；

3. 0.5%Triton X-100( PBS配制 )室温通透20min（细胞膜上表达的抗原省略此步骤）；

4. PBS浸洗玻片3次，每次3 min，吸水纸吸干PBS，在玻片上滴加正常山羊血清，室温封闭30min；

5. 吸水纸吸掉封闭液，不洗，每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒，4℃孵育过夜；

第二天：

6. 加荧光二抗： PBST 浸洗爬片3次，每次3min，吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗，湿盒中20-37℃孵育1h，PBST浸洗切片3次，每次3min；注意：从加荧光二抗起，后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。

7. 复染核：滴加DAPI避光孵育5min，对标本进行染核，PBST 5min×4次洗去多余的DAPI；8. 用吸水纸吸干爬片上的液体，用含抗荧光淬灭剂的封片液封片，然后在荧光显微镜下观察采集图像。

细胞免疫荧光步骤

1.在24孔板里加500微升培养基，放爬片，接种细胞（做实验以30-50%汇合度较好。10000-30000左右

2.给药处理24h