UDG酶是什么酶

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UDG酶和UNG酶

标签:文库时间:2024-07-08
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UDG酶,即Uracil - DNA Glycocasylase,尿嘧啶-DNA糖基化酶。 UDG酶简介

碱基对,是形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。如果有某一对碱基对的排列错误而导致基因编码异常,就很有可能引发癌症等疾病。可是,很多动物的DNA分子链中有数以亿计的碱基对,想从中找到错误的一条就无异于大海捞针。但美国的研究人员发现,有一种细胞酶可自动检验碱基对排列的对错。这就是UDG酶。美国约翰斯·霍普金斯大学医学院的研究人员报告说,他们通过实验发现,动物细胞中的一种UDG酶可以抓取DNA分子链中的基对并用特定形状的“口袋”来进行检查,如果碱基对排列形状正确则将其放回原处,如果形状有误则将其清除,DNA分子链中留下的空白会由其他修复机制来修补。 uracil-N-glycosylase

尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶

原理:UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键,形成的有缺失碱基的DNA链,在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂,从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50℃,95℃灭活。

作用:为保证PCR结果的准确性,要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG

UDG酶和UNG酶

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UDG酶,即Uracil - DNA Glycocasylase,尿嘧啶-DNA糖基化酶。 UDG酶简介

碱基对,是形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。如果有某一对碱基对的排列错误而导致基因编码异常,就很有可能引发癌症等疾病。可是,很多动物的DNA分子链中有数以亿计的碱基对,想从中找到错误的一条就无异于大海捞针。但美国的研究人员发现,有一种细胞酶可自动检验碱基对排列的对错。这就是UDG酶。美国约翰斯·霍普金斯大学医学院的研究人员报告说,他们通过实验发现,动物细胞中的一种UDG酶可以抓取DNA分子链中的基对并用特定形状的“口袋”来进行检查,如果碱基对排列形状正确则将其放回原处,如果形状有误则将其清除,DNA分子链中留下的空白会由其他修复机制来修补。 uracil-N-glycosylase

尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶

原理:UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键,形成的有缺失碱基的DNA链,在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂,从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50℃,95℃灭活。

作用:为保证PCR结果的准确性,要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG

UDG酶和UNG酶

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UDG酶,即Uracil - DNA Glycocasylase,尿嘧啶-DNA糖基化酶。 UDG酶简介

碱基对,是形成DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。如果有某一对碱基对的排列错误而导致基因编码异常,就很有可能引发癌症等疾病。可是,很多动物的DNA分子链中有数以亿计的碱基对,想从中找到错误的一条就无异于大海捞针。但美国的研究人员发现,有一种细胞酶可自动检验碱基对排列的对错。这就是UDG酶。美国约翰斯·霍普金斯大学医学院的研究人员报告说,他们通过实验发现,动物细胞中的一种UDG酶可以抓取DNA分子链中的基对并用特定形状的“口袋”来进行检查,如果碱基对排列形状正确则将其放回原处,如果形状有误则将其清除,DNA分子链中留下的空白会由其他修复机制来修补。 uracil-N-glycosylase

尿嘧啶-N- 糖基化酶(UNG)酶

原理:UNG酶的作用原理是选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键,形成的有缺失碱基的DNA链,在碱性介质以及高温下会进一步水解断裂,从而被消除.UNG酶的最佳活性温度为50℃,95℃灭活。

作用:为保证PCR结果的准确性,要预防非特异性PCR扩增和污染。常用的措施是使用UNG

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第六章 主要工业酶制剂的生产

第一节 淀粉制糖相关酶制剂的生产

一 α-淀粉酶的生产

α-淀粉酶作用于淀粉时,可以随机的方式从分子内部切开。α-1,4葡萄糖苷键而生成糊精和还原糖。其水解位于中间的。α-l,4键的概率比水解位于分子末端的概率大;不能水解支链淀粉的。α- 1,6键,也不能水解紧靠1,6分支点的α-1,4键;不能水解麦芽糖,但可以水解含有3个或3个以上α- l,4糖苷键的低聚糖。由于水解产物的还原性末端葡萄糖残基C1碳原子为α构型.故称α-淀粉酶。至今已有不少微生物的“α-淀粉酶被高度纯化。

工业上大规模生产和应用的α-淀粉酶主要来自细菌和曲霉。芽孢杆菌所产α-淀粉酶分为液化型与糖化型两种。目前只有液化型酶有用,由于活性高,发酵周期短,酶的耐热性高,尤其是枯草杆菌为大多数工厂所采用。我国淀粉糖工业使用的液化酶BF-7658。地衣芽抱杆菌的酶耐热性比枯草杆菌为高,但产量较低。芽孢杆菌易于退化和遭受噬菌体感染而降低产酶能力。由微生物制备酶制剂,产酶量高,易于分离和精制,适于大量生产。当然亦能从植 物和动物中提取α-淀粉酶,满足特殊的需要,但由于成本高,产量低,目前还不能实现工业化生产。具有实用价值的α-淀粉酶生产菌列于表5—6。

乳酸脱氢酶酶活力测定

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实验六 乳酸脱氢酶酶活力测定 及紫外吸收法测定蛋白质含量

目的要求

(1) 掌握LDH活性测定原理;

(2) 学习用比色法测定酶活性的方法。

实验原理

乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase简称LDH,EC.1.1.1.27, L-乳酸:NAD+氧化还原酶)广泛存在于生物细胞内,是糖代谢酵解途径的关键酶之一,可催化下列可逆反应。

LDH可溶于水或稀盐溶液。组织中LDH含量测定方法很多,其中紫外分光光度法更为

简单、快速。鉴于NADH, NAD+ 在340nm及260nm 处有各自的最大吸收峰,因此以NAD+为辅酶的各种脱氢酶类都可通过340nm光吸收值得改变,定量测定酶的含量。本实验测定LDH活力,基质液中含丙酮酸及NADH,在一定条件下,加入一定量酶液,观察NADH在反应过程中340 nm 处光吸收减少值,减少越多,则LDH活力越高。其活力单位定义是:在25℃,pH7.5条件下A340nm/min下降为1.0的酶量为1个单位。可定量测定每克湿重组织中LDH单位。定量测定蛋白质含量即可计算比活力(U/mg)。

利用上述原理,改变不同第五则可测定相应脱氢酶反应过程中A340nm的改变,定量测定酶活力,如苹果酸脱氢

酶习题

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第一章 酶

一、名词解释 #1、Kcat: #2、限制酶:

3、活性中心和必需基团 4、酶原: 5、同工酶: #6、巯基酶: 7、酶原激活: 8、酶工程: 9、固定化酶:

#10、中间产物学说: 11、金属酶:

12、别构效应剂: 13、诱导酶: 14、比活性: 15、协同效应: #16、KNF模型: 17、别构酶:

18、全酶与蛋白酶: 19、共价修饰调节: 20、多酶体系: 21、辅基:

22、诱导契合学说: 23、核糖酶: 24、酶原:

25、酶的反馈抑制: #26、MWC模型:

二、选择

1、核酶的化学本质是

A、核糖核酸 B、粘多糖

C、蛋白质 D、核糖核酸和蛋白质的复合物

2、乳酸脱氢酶经过透析后,其活性大大降低或消失,这是因为:

A 亚基解聚 B 酶蛋白变性 C 失去辅酶

D 缺乏底物与酶结合所需要的能量 E 以上都不对

3、下列对酶的叙述,哪一项是正确的?

A 所有的蛋白质都是酶

B 所有的酶均以有机化合物作为底物 C 所有的酶均需特异的辅助因子 D 所有的酶对其底物都具绝对特异性

E 上述都不对

酶作业

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(酶与维生素)

一、填空题(30%)

1. 从酶蛋白结构上看,仅具三级结构的酶为 ,具有四级结构的酶为 ,而在系列反应中催化一组多个反应的酶称为 。

2. 结合酶(双成分酶)由蛋白质部分和非蛋白质部分组成,非蛋白质部分为 的一部分,统称 ,其中与酶蛋白结合紧密,不能用透析法除去的称为 ,而结合不紧密,可用透析法除去的称为 。

3. 米氏常数(Km)为反应速度到 一半时的 ,其单位为 。 4. 精氨酸酶只对L-Arg作用,不能对D-Arg作用,是因为这种酶具有 专一性。 5. 高温使酶促反应速度 的原因是 。

6. 某些调节酶(寡聚酶)v对[S]作图时形成 型曲线,这是底物与酶分子上专一性结合部位结

合后产生的一种 效应而引起的。

7. NAD+的中文名称是

酶技术

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酶工程发展概况及应用前景

生工090419 张祎伟

【前言】

回顾21世纪,生物科学与生物工程在全球崛起并迅速发展,已经从整体水平发展到细胞水平和分子水平,在基础与应用研究领域取得了举世瞩目的成果\酶工程作为生物工程的重要组成部分,其作用之重要、研究成果之显著已为世人所公认。展望21世纪,生物科学与生物工程将以更快的速度发展,在世界科技与经济的发展中起支柱和骨干作用。

一、酶工程在食品工业中的应用

在我国古代就开始将产酶的微生物运用于食品的制作中。在现代食品工业中,酶的应用渗透到各个领域。随着固定化酶、修饰酶、基因工程酶等技术的突破性发展,酶工程在食品工业中的应用将更加广泛和深入。

酶工程在食品分析与检测

由于酶具有特异性,因此,它适合于植物和动物材料的化合物的定性和定量分析。例如,采用乙醇脱氢酶测定食品中的乙醇含量;采用柠檬酸裂解酶测定柠檬酸的含量等。另外,在食品中加入一种或几种酶,根据它们作用于食品中某些组分的结果,可以评价食品的质量,这是一种十分简便的方法。

酶工程在食品保鲜方面的应用

生物酶用于食品保鲜主要就是制造一种有利食品保质的环境,它主要根据不同食品所含的酶和种类,而选用不同的生物酶,使食品所含的不利食品保质的酶受到抑制或降低

酶学

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第三部分 酶学

一、选择题

1、某酶催化底物生成产物的反应速度为非酶促反应的1010倍,则其催化产物转变 为底物的速度为非酶促反应的多少倍? A、10-10 B、10-5

10 5

C、10 D、10

2、酶竞争性抑制作用的特点是

A、Km↑ Vmax不变 B、Km↓ Vmax不变 C、Km不变 Vmax↓ D、Km不变 Vmax↑ E、Km↓ Vmax↑

3、合成辅酶A所需要的维生素是

A、遍多酸 B、VitppNAD C、VitBFAD D、VitBTPP E、VitB

4、催化某些蛋白中谷氨酸残基羧化反应后的酶含哪种维生素? A、生物素 B、VitC C、VitA D、VitE E、VitK

5、酶加速反应速度是通过

A、提高反应活化能 B、增加反应自由能的变化 C、改变反应的平衡常数 D、降低反应的活化能 E、减少反应

酶学

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第三部分 酶学

一、选择题

1、某酶催化底物生成产物的反应速度为非酶促反应的1010倍,则其催化产物转变 为底物的速度为非酶促反应的多少倍? A、10-10 B、10-5

10 5

C、10 D、10

2、酶竞争性抑制作用的特点是

A、Km↑ Vmax不变 B、Km↓ Vmax不变 C、Km不变 Vmax↓ D、Km不变 Vmax↑ E、Km↓ Vmax↑

3、合成辅酶A所需要的维生素是

A、遍多酸 B、VitppNAD C、VitBFAD D、VitBTPP E、VitB

4、催化某些蛋白中谷氨酸残基羧化反应后的酶含哪种维生素? A、生物素 B、VitC C、VitA D、VitE E、VitK

5、酶加速反应速度是通过

A、提高反应活化能 B、增加反应自由能的变化 C、改变反应的平衡常数 D、降低反应的活化能 E、减少反应