香蕉组培培养基配方

采用正交设计法,研究红香蕉组培培养基中的无机盐、蔗糖及细胞分裂素等重要组成成分和细胞分裂素6-BA与生长素NAA的浓度配比对红香蕉快繁增殖的影响。结果表明：培养基中无机盐浓度对芽的诱导作用大于蔗糖浓度,细胞分裂素影响最小;在6-BA4.5mg／L的基础上,配合加入NAA0.3mg/L,芽的增殖效果更好。红香蕉增殖培养基最优化组合为：MS+6-BA4.5mg/L+NAA0.3mg/L+蔗糖2%。

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广西农业科学

20 0 2年第 2期

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红香蕉组培培养基的优化研究黎炎(广西农科院经作所南宁 5 0 0 ) 30 7

黄记生(广西农科院生物所 )

摘要：用正交漫计法，究红香蕉组培培养基中的无机盐、采研蔗糖及细胞分裂素等重要组成成于和细胞分裂素 6,一

B A与生长索 NAA的浓度配比对红香蕉快繁增殖的影响.结果表明：培养基中无机盐浓度对芽的诱导作用大十

蔗糖浓度 .细胞分裂素影响最小； 6 A 4 5 g I在一B . m/的基础上，配台加入 NAA03/芽的增殖效果更好。红香 mg[.蕉增殖培养基最优化组合为：+6 A 4 5/+NAA0 3/ 4蔗糖 2。 MS~B .mg| . mgI -

组培实验遇到的常规问题

1.有些植物在组培生根阶段会把大量元素和糖减半，我应根据什么来判断是否需要减半？ 答：在组培过程中，我们提起配方往往只局限于激素的配比和添加物的使用，其实对基本培养基的构成和培养条件（温度、光照、湿度、PH等）都属于配方的范畴。在这方面的调整主要是根据实际培养状况灵活调整。在生根阶段，试验证明培养基高渗透势或液体培养基有利于营养素和激素的运转，有利于根的发生和形成质量，因此大部分植物在生根过程需要调整基本培养基的组成。但具体需不需要应该通过对比试验确定。

2.什么是滤纸桥生根？

答：1）滤纸桥生根技术是分化苗直接瓶外生根技术，其作用主要是简化生根环节，提高炼苗成活率，降低组培成本，同时还可以对污染苗进行最大程度的利用。

3.组织培养中出现黄化的原因有几种？

答：黄化是指在组培过程中由于培养基成分、环境、激素、碳水化合物等各种因素引起的幼苗整株失绿，全部或部分叶片黄化、斑驳。这一现象在植物组织培养中比较常见，特别在部分木本花卉中较为常见，引起黄化的主要原因是培养基中Fe的含量不足；各矿质营养不均衡；培养环境通气不良，瓶内乙烯含量升高；激素配比不当；糖用量不足或长时间不转移糖已耗尽；PH值变化过大；培养温度不适；光照不足等。

解决的方

146种培养基配方

1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用）

牛肉膏 蛋白胨 氯化钠 琼脂 pH

水

3g 5g 10g 15~20g 7.0~7.2 1000mL

2、2、高氏（Gause）1号培养基（培养放线菌用） 可溶性淀粉

硝酸钾 氯化钠 磷酸氢二钾 硫酸镁 硫酸亚铁 琼脂 水 pH

20g 1g 0.5g 0.5g 0.5g 0.01g 20g 1000mL 7.2～7.4

配制时，先用少量冷水将淀粉调成糊状，倒入煮沸的水中，在火上加热，边搅拌边加入其他成分，溶化后，补足水分至1000mL。121℃灭菌20min。 查氏（Czapek）培养基（培养霉菌用）

硝酸钠 磷酸氢二钾 氯化钾 硫酸镁 硫酸亚铁 蔗糖 琼脂 水 pH

2g 1g 0.5g 0.5g 0.01g 30g 15~20g 1000mL

自然

121℃灭菌20min。

4、马丁氏（

实验室用平板培养基配方

1.MRS培养基：

液体：蛋白胨 10g 牛肉膏 10g

柠檬酸铵2g 乙酸钠 5g(无水乙酸钠3g) 酵母粉 5g 葡萄糖 20g 磷酸氢二钾 2g 吐温 1.0ml 盐液甲 5.0ml 蒸馏水： 1000ml 溴甲酚紫 0.8g

[备注]盐液甲的配制：MgSO4.7H2O 11.5g ，MnSO4.4H2O 2.8g

蒸馏水 100ml

固体：在MRS液体培养基中加入1.6%~2%的琼脂

PH=6.5~7.0 121℃灭菌30min

2.YB培养基：

液体:蛋白胨 5g 葡萄糖 5g 酵母粉 5g 磷酸氢二钾4g 3.08%硫酸锰 1.0ml 蒸馏水 1000ml 固体：在YB液体培养基中加入1.4%~1.7%的琼脂 PH=6.0~7.0 121℃灭菌30min

3.PYD培养基：

液体：酵母粉

DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。分为高糖型（低于4500mg/L）和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。

基本简介

DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量，同时又分为高糖型（低于4500mg/L）和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。

主要特点

（1）氨基酸含量为依格尔培养基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等； （2）维生素含量为依格尔培养基的4倍； （3）含有糖酵解途径中的重要物质——丙酮酸； （4）含有微量的铁离子。

主要成分

DMEM(A) 细胞培养基（粉末型）成分

序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 化合物名称 无水氯化钙 .2H 2 O 硝酸铁 .9H 2 O 氯化钾 无水硫酸镁 氯化钠 无水磷酸二氢钠 丁二酸 丁二酸钠 L-盐酸精氨酸 L-盐酸胱氨酸 甘氨酸 L-盐酸组氨酸 L-异亮氨酸 L-亮氨酸 含量 (mg/L) 265.00

DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。分为高糖型（低于4500mg/L）和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。

基本简介

DMEM是一种含各种氨基酸和葡萄糖的培养基，是在MEM培养基的基础上研制的。与MEM比较增加了各种成分用量，同时又分为高糖型（低于4500mg/L）和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于细胞停泊于一个位置生长，适于生长较快、附着较困难肿瘤细胞等。

主要特点

（1）氨基酸含量为依格尔培养基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等； （2）维生素含量为依格尔培养基的4倍； （3）含有糖酵解途径中的重要物质——丙酮酸； （4）含有微量的铁离子。

主要成分

DMEM(A) 细胞培养基（粉末型）成分

序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 化合物名称 无水氯化钙 .2H 2 O 硝酸铁 .9H 2 O 氯化钾 无水硫酸镁 氯化钠 无水磷酸二氢钠 丁二酸 丁二酸钠 L-盐酸精氨酸 L-盐酸胱氨酸 甘氨酸 L-盐酸组氨酸 L-异亮氨酸 L-亮氨酸 含量 (mg/L) 265.00

麦康凯琼脂

麦康凯可能是世界上常用的一种鉴别培养基，它主要通过乳糖发酵鉴别肠道致病菌，还能抑制革兰氏阳性菌生长，发酵乳糖的细菌能使培养基变红，这是因为细菌发酵乳糖产酸而使培养基的PH值变成酸性的。不发酵乳糖的细菌没有颜色的变化。

麦康凯抑制阳性菌的生长，是因为其中加了结晶紫。 MACCONKEY AGAR

MacConkey agar is probably the most popular solid differential medium in the world. It is mainly used in identification of lactose fermenting, Gram-negative enteric pathogens and for inhibiting growth of Gram-positive organisms. Bacterial colonies that can ferment lactose turn the medium red. This red color is due to the pH indicators response to the acidic environment cre

麦康凯琼脂

麦康凯可能是世界上常用的一种鉴别培养基，它主要通过乳糖发酵鉴别肠道致病菌，还能抑制革兰氏阳性菌生长，发酵乳糖的细菌能使培养基变红，这是因为细菌发酵乳糖产酸而使培养基的PH值变成酸性的。不发酵乳糖的细菌没有颜色的变化。

麦康凯抑制阳性菌的生长，是因为其中加了结晶紫。 MACCONKEY AGAR

MacConkey agar is probably the most popular solid differential medium in the world. It is mainly used in identification of lactose fermenting, Gram-negative enteric pathogens and for inhibiting growth of Gram-positive organisms. Bacterial colonies that can ferment lactose turn the medium red. This red color is due to the pH indicators response to the acidic environment cre

培养基验收规程

1 目的

规范培养基验收的过程和项目，以保证实验室所用培养基符合要求。

2 适用范围

适用于本实验室培养基的验收工作。

3 职责

培养基验收员应遵循本规程，按照本规程的要求进行培养基验收。 建立并更新《实验室在用培养基清单》

4 程序

4.1术语和定义

4.1.1培养基批量：是培养基完整的可追溯单位，是指满足产品要求（内部控制）和性能测试，产品型号和质量稳定的一定量的半成品或成品。这些产品在特定的生产周期生产，而且编号相同。

4.1.2商品化脱水合成培养基：使用前需加水和处理的干燥培养基，如：粉末、小颗粒、冻干粉等形式：

——完全培养基；

——不完全培养基，使用的时候需加入添加剂。

4.1.3商品化即用型培养基：以即用形式或融化后即用形式置于容器（例如平皿、试管或其他容器）内供应的液体、固体或半固体培养基： ——完全可即用的培养基； ——需重新融化的培养基；

——使用前需重新融化并分装的培养基；

——使用前需重新融化，添加物质并分装的培养基。

4.2培养基接货验收

培养基的接货验收，由培养基验收员完成。

新购买的商品化脱水合成培养基（通常为脱水的粉状或颗粒装）和商品化即用型培养基，应保

常用培养基的配制

（一）营养琼脂培养基

【用途】供细菌总数测定、保存菌种、细菌纯化、一般细菌培养、血琼脂培养基基础之用。

【成分】牛肉膏 3g

NaCl 5g 蛋白胨 10g 琼 脂 20g

【pH值】7.2±0.2

【制法】上述成分称取38g加蒸馏水1000ml，经121.3℃ 30min高压灭菌备用。 （二）蛋白胨水培养基

【用途】供细菌培养、吲哚试验之用。

【成分】蛋白胨 10g

氯化钠 5g

【pH值】7.6 【制法】将上述成分溶于1000ml蒸馏水中，过滤，分装于试管，每管2～3ml，经121.3℃ 20min高压灭菌备用。

（三）半固体培养基

【用途】供观察细菌动力、菌种保存、H抗原位相变异试验等。 【成分】蛋白胨 10g

氯化钠 5g 琼脂 2.5～3g

【pH值】7.6

【制法】上述成分加入1000ml蒸馏水中，加热溶解，分装于试管，每管3～4ml，经 121.3℃ 20min高压灭菌备用。

（四）营养肉汤培养基

【用途】供一般细菌培养、转种、复苏、增菌等，也可用于消毒效果的测定。 【成