trizol法提取rna可以第二天
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TRIzol法提取RNA
总RNA提取(TRIzol法)
仪器和材料:氯仿、异丙醇、无水乙醇、无RNA酶枪头(1000μL,200μL,
10μL)、移液枪、无RNA酶EP管(有1.5mL、2mL、15mL、50mL等不同规格)、75%乙醇(尽量现配现用,配制好后置于4℃冰箱待用)、滤纸、DEPC水、计时器记号笔等
注:上述材料标记好提RNA专用,自己保管好!
操作步骤:
1.细胞悬液按照每5×105~106个细胞加1mL TRIzol,贴壁细胞直接加TRIzol裂解,(1个T25cm2细胞培养瓶可加1~2mL TRIzol,可根据需求来添加),裂解数分钟(5~10分钟,可在倒置显微镜下观察细胞脱落情况),反复用枪吹打或持续振荡以裂解细胞。
2.将上述TRIzol裂解液转移至1.5mL EP管中,每个EP管做好标记,按照每1mL TRIzol加200μL氯仿的量加入氯仿,盖上EP管盖子,用力振荡(手动)15秒,在室温下放置10~15分钟(观察到明显分层即可);然后4℃离心机12000rpm离心15分钟。
3.将离心后EP管内上层液体转入新的EP管内(离心后分为3层,注意吸取第一层水相时不要吸到第二层,一般可吸到500μL左右),按照每1mL TRIzol加500μL异丙
javaweb第二天笔记
day02
昨天内容回顾 1、html的操作思想 ** 使用标签把要操作的数据包起来,通过修改标签的属性值来实现标签内数据样式的变化 *** 2、图像标签 3、超链接标签 4、表格标签 ** 技巧:数里面有多少行,每行里面有多少个单元格 **
** 输入项 *** 有name属性 * 普通输入项 type=\ * 密码:password * 单选:radio - name值相同 - value值 * 复选框:checkbox - name值相同 - value值 * 下拉框 select option * 文本域textarea * 隐藏项:type=\ * 文件:type=\
* 提交按钮 type=\* 重置:reset
CSS
* 使用图片提交:
6、div和span * div: 自动换行 * span:在一行显示
1、css的简介 * css:层叠样式表 ** 层叠:一层一层的
军训日记第二天
篇一:军训日记第二天
军训日记
2014年7月1日星期二 晴
今天是军训的第二天,我们还是像昨天一样,一如既往的累,一如既往的练,只是今天的天气有点变化无常,晴的时候太阳暴晒着,下雨的时候也是急凑的,毫无预兆的来临。即使风雨降临,我们还是坚持训练,任凭汗水和雨水相混合滴落到脸颊,教官也和我们一样在雨中,觉得教官挺辛苦的,虽然我们有时会对军训存在抱怨的唠叨声,但是我现在从心底里感谢军训,感谢我们亲爱的教官,让我们的体能能够得到提高,虽然今天只是第二天,也许我们的体能到底怎么样还看不出来,但这是一个长期的过程,这是需要长期锻炼的。
今天我们复习了昨天训练的内容,主要是站军姿,着重训练了队列,今天学的新内容主要是正步训练,在教官的耐心指导下,我们学会了正步的走法,觉得正步走起路虽然辛苦,但是确实是非常好看的,整个人看起来比较标直笔挺。还学会了敬礼,觉得真的体验到一个军人的自豪。
晚上,我们训练了一个小时后,教官教了我们打靶歌,虽然教官唱的不太标准,但我们也乐在其中。最后大家干脆围着教官坐了,大家一起唱歌,一起聊天,班级的凝聚力也逐渐提高,我们也正慢慢的和教官亲近了,虽然我们教官比较严格,但这样的教官才是对我们负责的教官,是真正为我们以后的身体素质着想。今天一
难忘第二天日记
三下乡第二天,被热醒的我听到外面下起了倾盆大雨,转个身便睡着了。大早上的被舍友叫醒刷牙洗脸,睁着惺忪睡眼,面对着充满新鲜空气的小学,新的一天开始了。
八点一到,开始了今天的朗诵。学生们的声音很是响亮,虽然拖长了音,稚嫩的声音洋溢着生气,真是活力无限的象征。教他们生字词,朗诵了几遍后,让学委带读,声音一遍比一遍响亮。接下来就是我的第一节英语课啦,来这儿之前就把要上的课都备好了,一上课就发现有问题了。班上有已经上完了六年级的,有五年级升六年级的,也有四年级升五年级的,英语课的进度都不一样。我备的课是六年级上学期第一单元的内容,期中单词不超过二十个,然而他们有的根本没学过,学过的都会,没学到的自然不会。电脑上我的课件尽管没有出问题,也不适合他们,所以我单单教他们学了六个实用单词和一些出行方式。先教他们读熟,接着又点学生起来一个个念单词,把单词一个个过,争取每个学生都学会这些单词。在点名念单词的时候,发现他们的口音有点问题,一直在纠正一个单词。下课后让他们回家背熟这些单词,然后将明天要上的那节课改为音标课,教会他们一些该要学会的并有助于记单词的东西。
通过这节英语课,让我知道了学生的活跃性和好学性,学习永不会停止,只要你想就能学习到你想要知道
军训第二天日记
军训第二天,6:20起床后,大家都把军服穿上,把被子叠得整整齐齐的,直到教官叫我们出去集合,我们才穿上鞋子,走出了宿舍。
我们来到操场上集合,教官把队伍弄得整整齐齐的,然后就开展了四、五、六年级军姿的比赛。听说站好了军姿晚上会有活动,所以在大家都一动不动,最后,经过我们全体四年级努力,我们军姿站得最好。
我们刷完牙,吃完早餐,我们就开始展开训练。
教官先教我们几个重要的动作,比如:蹲下与起立等。训练完这些后,接着训练军姿和踏步,我发现经过第二天的军姿强化训练,动作协调能力都提高。
午休过后,可怕的训练又要开始了,我们来到操场,复习了一下上午动作。复习完后,我们又要练习踏步了,练习完后,到了我们活动的时间,不知不觉又到冲凉和吃晚饭的时间了。吃过晚饭后,我们就去看电影。
晚上睡觉时,经过一天训练,觉得很累。很快进入梦乡,梦见自已正在回家的路上呢。
实习第二天日记
今天是实习的第二天了,今天可以用几个“一”来形容:一烦、一晒、一惊、一乐、一自在。
本来说好的今天剪草,结果因为没有人愿意去铺沙,我和宿舍的同事不得不去完成昨天没有完成的作业。这让我郁闷了很久,整天跟沙子打交道,浑身都是那种很细的沙子,粘在身上很烦人的。今天天气应该还算可以的,多云有阵雨,26-31度。虽然只有3分钟很小的阵雨,但是还是下了,而且云也比较多,风也应该有4-5级,不过今天的紫外线强度貌似特别强。今天出门前特意涂了防晒霜,但是晚上去洗澡发现今天晒的好厉害,连洗澡的时候水冲的身上都疼,脸也有点疼,洗完后发现我变得相当黑了……两天,完全变黑,真的很难想象。
铺沙,看似简单,实则不易。两天,6个人,1台铺沙机,1辆拖拉机。这些数字足以证明这项工作的工作量有多大了。昨天看了一天,也没怎么操作,今天同事就让试试,结果我第二次操作的时候就出现失误了,轮胎把果岭草坪擦掉了一小块〔60×15cm〕,当时吓的我那个心啊……同事说没事,新手几乎都有这个过程,又跟我详细讲解了一下操作方法,之后主管之说让我们找块草坪把那补起来,不要让总监知道。中午见到总监的时候我都没敢和他打招呼〔总监办公室在我宿舍隔壁,隔个过道,下午才补的草坪〕。
也许应该算
初中军训日记第二天
篇一:军训日记(第二天的军训)
日期:2016年5月10日星期二 天气:晴
勇敢地克服困难 (军训第二天)
第二天的军训来临了,我站在镜子前望着身着军装,昂首挺胸的我,心中若有所思,我心想:今天我还能做到军令如山,一切行动听指挥吗?还能做到掉血掉肉不掉队的精神吗?看着那身绿色的军装就仿佛看到了无边的草地就像心怀宏志忠于革命忠于党的军人。我穿着那条让我熟悉的绿色短袖,短袖上粘满了昨天的汗水,仿佛今天的困难又在向我招手。我的脑海中一直在重复着一句话:只有克服困难,不被困难打倒,你才算是成功的!我盼望着,期盼着今天的训练。
“立正”“立二”熟悉的声音回荡在我耳旁。教官对我们大声喊道:“现在,让我们复习一下站军姿。开始”起初我一动不动犹如一个木头人,就算风来了,雨来了我都不会动一下。可是一切都来得那么突然。我心想:完了,这下完了,我的脸好痒,要不抓一下吧!不过这个念头很快就被我打消了。我想了想终于想出了一个好办法,能忍则忍实在不行就用嘴吹一吹。我瞪大眼睛,张大嘴巴,把下嘴唇贴在上嘴唇上使劲地吹,就像一条胖头鱼。吹啊吹,吹啊吹可还是很痒。我用坚定的信念告诉自己你一定行。我忍住,我下定决心就算天塌下来我也不挠!我始终相信只要有坚定的毅力就能克服困难。我望着教官
初二开学第二天日记
此时,我已经不再是稚气未脱的新生了,而是稳重成熟的初二生了。小编整理的初二开学第二天日记,希望给大家带来帮助!
初二开学第二天日记【一】
初一是初中三年中最轻松、开心,值得留恋的。在初一,老师的关心让我感到了充实和安宁,朋友的理解和安慰让我有了扬起生命值烦的信心和勇气。还记得第一次历史测验就让我常到了什么是“痛”的滋味,当时知觉的周围一片黑暗,一片混混沌沌,茫然的我几乎看不清前方凄迷的征程……。老师走过来拍拍我肩膀说:“胜败乃是兵家常事,而且刚刚接触历史未免会有点不适应的啦,以后多点背书就行啦!”同桌说:“对嘛!我们学习又不是为了分数,只要你有信心我相信你一定行,加油!”
艳丽的花,人们只惊慕她的美丽,却不在意他曾经受过风和雨的洗礼。勇敢地走过自己,我不是还有许多梦想吗?是的!一切都源于一个梦想——考回新会一中高中部。14岁——初二,一个灿烂的年龄,灿烂的人生,无数梦正在编织,无数承诺正在实现,不能轻言放弃!一切梦想就寄托在初二了!
初二开学第二天日记【二】
时间过得真快啊,眼一睁一闭,一天就这样过去了,正如春晚的那首歌一样《时间都去哪儿了》。今天已经是我们开学第二天了。
今天放假,所以身为我们毕业班的老师们都为我们布置了相当
军训日记第二天800字
11月30日 星期二 天气 雨
今天,我从铺上醒来,以为还在家里呢。我发现睡不着了,可大家还在睡觉,我就经过郑老师允许云跑步了。
早上,我洗了脸,刷了牙,就云吃饭了,早惚是鸡蛋、粥、榨菜、鸡蛋,我边吃边唱,不一会儿就吃完了。洗好了碗后,我们又要军训了。
我们来到了操场,开始了练习,这次一站也是三小时左右。有一次,我动了一下,没想到给老师罚了五百多个下蹲,累得我腰酸背痛,再也不敢动了,像个机器人一样听着老师的命令。我累得浑身上下都不舒服,想动一下,可一想又要做下蹲,我又不敢了,想:真正的军人就是这样练出来的。
下午,我们进行了拉练活动。我们走出了校门,来到了西溪湿地边,踏着军步,四个人要看齐,走了约一个小时左右。我们又原路返回,我虽然腿很酸,可还是忍着来到了军校。回来后,我们大家都出汗了。休息了一小会儿,又练来了,我们下午又练了左右前后转等一些内容。
吃过晚餐,我刷牙,洗脸后,开始了整理床。我把被子叠了大半天,可觉得还是不好看,最后才整整齐齐的叠成了个豆腐块。整理了被子后,就开始整平床单了,睢瞧这床单皱得像海上的一片片波浪,又仿佛是老爷爷脸上的一条条皱纹。我举起手,用手把皱的地方打平,我是在上铺所以打床单时,这边好了那边又皱了,我
Trizol法提取总RNA(细胞和组织)
Trizol法提取总RNA
1、①提取组织RNA时,研钵高温高压灭菌,每50-100mg组织液氮研磨后,将粉末用液氮预冷的药匙转移至预先装有1ml Trizol的EP管中,充分混匀(粉末总体积不能超过Trizol体积的10%)用1ml Trizol试剂裂解;
②提取细胞RNA时,每5-10×106个细胞用1ml Trizol裂解,反复吹打或剧烈振荡;
2、将上述裂解液,室温15-30℃静置5min;
3、每1ml Trizol加入0.2ml氯仿,在手中用力振荡15s,室温放置2-3min后,12000r离心15min(2-8℃);
4、取上层水相置于新EP管中,按照每1ml Trizol加入0.5ml异丙醇的量加入异丙醇,室温放置10min,12000r离心10min(2-8℃),弃上清;
5、向沉淀中按每1ml Trizol加1ml 75% 乙醇(4℃),涡旋混合,进行洗涤,7500r离心5min(2-8℃),弃上清; 6、将RNA沉淀在室温下自然干燥(5-10min); 7、用30μl RNase-free water溶解RNA沉淀; 8、取出1μl,稀释10倍,测定RNA浓度并记录; 9、进行反转录或分装保存于-80℃