细胞色素c的提取注意事项
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细胞色素C的提取
实验一、细胞色素C的制备和测定
摘要:细胞色素C为含铁卟啉的结合蛋白质,包括多种能够传递电子的含铁蛋
白质。广泛存在于各种动植物组织和微生物中。它是呼吸链中极重要的电子传递体。细胞色素C是一种细胞呼吸激活剂。在临床上可以纠正由于细胞呼吸障碍引起的一系列缺氧症状,使其物质代谢、细胞呼吸恢复正常,病情得到缓解或痊愈。在自然界中,细胞色素C存在于一切生物细胞里,其含量与组织的活动强度成正比。本实验以新鲜牛心为材料提取、制备和纯化细胞色素C,得到其粗品溶液,并进行含量测定。
关键词:细胞色素C 提取 制备 纯化 含量测定 1、原理:
细胞色素C包括多种能够传递电子的含铁蛋白质总称。广泛存在于各种动植物组织和微生物中。它是呼吸链中极重要的电子传递体,细胞色素C(cytochrome c,CytC)只是细胞色素的一种。它在呼吸链上位于细胞色素还原酶和细胞色素氧化酶之间。线粒体中的细胞色素绝大部分与内膜紧密结合,仅有细胞色素C结合轻松,较易被分离纯化。
细胞色素C为含铁卟啉的结合蛋白质,每个细胞色素C分子含有一个血红素和一条多肽链。分子质量约为13000,蛋白质部分由104个左右的氨基酸残基组成,其中赖氨酸含量较高,等电点10.2-10.8
细胞培养的注意事项
细胞培养
相关疾病:
每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了 ,培养细胞时有哪些惨痛经验教训可以分享呢?
早走早脱身,从此专注黑生物
1. 严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干。
2. 不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套。
3. 有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测。
4. 水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换 (灭菌水加进去)。
5. 晚上离开的时候最好给细胞房照紫外,超净台是用完就开。
6. 最好的是同一时间就你一个人在用细胞房在养细胞。
非科班出身经验分享
1. 别怕浪费。枪头什么的只要有可能污染就换,如果用酒精灯就什么都稍微烤一下,别直接放到火上,离一段距离。
2. 动作要既轻柔又有力。动作太重会有一堆一堆的气泡,动作太轻就吹不下来... 刚开始的时候吹细胞太痛苦了,稍微一下就起泡。后来就是吹的时候枪里的培养基不要一次全都压出来,留一点,枪的最头部尽量深的在液面以下。
3. 离开过操作台的东西再进操作台之前一定要用酒精喷一遍,包括一切实验耗材、仪器、以及你带着手套的手。
4. 实验结束后对实验台的消毒。紫外什么的,用前用后都照个 30 分钟。
5.
细胞培养注意事项
细胞冷冻保存方法、注意事项
1、欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态,约为80 – 90 %致密度。
2、冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。
3、注意冷冻保护剂之品质。DMSO 应为试剂级等级,无菌且无色(以0.22 micron FGLP Telflon 过滤或是直接购买无菌产品,
如Sigma D-2650),以5~10 ml 小体积分装,4 oC 避光保存,勿作多次解冻。Glycerol 亦应为试剂级等级,以高压蒸汽灭菌后避光保存。在开启后一年内使用,因长期储存后对细胞会有毒性。 4、冷冻保存之细胞浓度:
(1)normal human fibroblast: 1~3 x 106 cells/ml 。
(2)hybridoma: 1~3 x 106 cells/ml,细胞浓度不要太高,某些hybridoma 会因冷冻浓度太高而在解冻24 小时后死去。
(3)adherent tumor lines: 5~7 x 106,依细胞种类而异。Adenocarcinoma 解冻后须较高之浓度,而HeLa 只需1-3 x 106 cell
干细胞使用及注意事项
中科华氏代理的产品:胚胎多潜能干细胞HS系列:HS-ET-PSC-A,B,C,D 型号 内容物说明 为复合型细胞混悬液,其中包含了胚胎多潜能干细胞HS-ET-PSC-A 及胚胎神经干细胞(ZK-ET-EMM-Sub001)三种干细胞复合制剂,干移植高浓度干细胞,可迅速改善细胞数量为20000万单位。 为复合型细胞混悬液,其中包含了胚胎多潜能干细胞主要针对亚健康体征比较明显,(ZK-ET-PSC-Sub001)、胚胎造血干细胞(ZK-ET-APB-Sub001)以HS-ET-PSC-B 及胚胎神经干细胞(ZK-ET-EMM-Sub001)三种干细胞复合制剂,干或有神经性损失的人群使用。 细胞数量为15000万单位。 为复合型细胞混悬液,其中包含了胚胎多潜能干细胞HS-ET-PSC-C 主要针对亚健康体征显现,出现并伴有神经系统疾病的老年人,患者状态。 功效 主要针对亚健康状况比较严重,(ZK-ET-PSC-Sub001)、胚胎造血干细胞(ZK-ET-APB-Sub001)以处于极度临病状态,大剂量一次(ZK-ET-PSC-Sub001)、胚胎造血干细胞(ZK-ET-APB-Sub001)两身体机能缺陷,免疫力低下人群种干细胞复合制剂,干细胞数量
注意事项
资源二室四平地区二类调查注意事项
1、外业前,各组组长负责检查各项资料及工作程序准备是否齐全。各单位要与
相临单位进行接图,防止外业出现错、漏。
2、应充分收集利用局方掌握的与本次调查相关的各种资料和信息,对调查单位的情况进行充分的了解,保证工作的顺利开展。
3、样地除落入大片耕地外,其它都应现地落实。改设样地的GPS坐标值一般应为“00”点。样地地类是按中心点小班地类确定,当样地落在小班边缘时要注意地类的确定。
4、样地应进行有林地成数计算,计算过程可记录在样地最后一页(即样地位置图的背面),精确到0.1。
5、当一个乡镇内含有多个国营林场时,要注意区分。
6、各级被调查单位驻址、非林地小班的四旁树、新修建的主要道路和水渠等,调查时不要漏。部分道路和渠在卫片上分辨不清的,要现地落实,并及时修改线图。
7、林带不要含跨公路、铁路、水渠等扣面积的非林地线性小班。
8、明确小班因子借用条件。林带小班借用因子后,林带宽度仍需实测。借用的小班号在备注栏注明。
9、做样圆时,严格用皮尺实测样木距离,禁止目测。
10、能使用PDA调绘的,要注意原始数据(包括小班、样圆、样带、角规、踩点
数据)的备份,注意严格按程序要求的步骤操作,避免因操作失误引起错误。
注意事项
资源二室四平地区二类调查注意事项
1、外业前,各组组长负责检查各项资料及工作程序准备是否齐全。各单位要与
相临单位进行接图,防止外业出现错、漏。
2、应充分收集利用局方掌握的与本次调查相关的各种资料和信息,对调查单位的情况进行充分的了解,保证工作的顺利开展。
3、样地除落入大片耕地外,其它都应现地落实。改设样地的GPS坐标值一般应为“00”点。样地地类是按中心点小班地类确定,当样地落在小班边缘时要注意地类的确定。
4、样地应进行有林地成数计算,计算过程可记录在样地最后一页(即样地位置图的背面),精确到0.1。
5、当一个乡镇内含有多个国营林场时,要注意区分。
6、各级被调查单位驻址、非林地小班的四旁树、新修建的主要道路和水渠等,调查时不要漏。部分道路和渠在卫片上分辨不清的,要现地落实,并及时修改线图。
7、林带不要含跨公路、铁路、水渠等扣面积的非林地线性小班。
8、明确小班因子借用条件。林带小班借用因子后,林带宽度仍需实测。借用的小班号在备注栏注明。
9、做样圆时,严格用皮尺实测样木距离,禁止目测。
10、能使用PDA调绘的,要注意原始数据(包括小班、样圆、样带、角规、踩点
数据)的备份,注意严格按程序要求的步骤操作,避免因操作失误引起错误。
注意事项
美国旅游注意事项-1
特别注意:美国禁止携带打火机入境,美国交通部将打火机列入危险品,并禁
止将打火机装入经过安检的行李中。美国运输安全管理局将处理所有带到安检点的打火机。美国运输安全管理局强烈奉劝乘客在赶往机场前,仔细详尽地检查其随身行李和托运行李中是否携带了这些违禁物品。
一.出境须知:
1. 客人在出发前往机场前,请务必仔细检查护照、签证、机票(必须有确切的
回程日期)、邀请函、出境卡等一切出境证件、资料。上述物品请随身携带,切勿放于行李箱内; 2. 如在机场领取,请仔细检查一资料上的姓名是否正确,并妥善保管上述物品。 3. 携带的可拆卸变焦镜头相机、数码相机、录像机、笔记本电脑等请务必在中
国海关办理出关申报手续,并保管好申报单,手机等小件物品不用申报。如对带出物品拿不准是否应申报时,请向海关咨询。
4. 按照现行规定,每位客人出境时可携带5000美元或等值外币。
二.搭乘国际航班须知:
1. 旅行团机票属于团体机票,按照航空公司规定团队机票不能退,不能改、不能换。
2. 行李托运:免费托运两件行李(一件行李的三边之和在158厘米以内,两件
行李的三边之和不超过273厘米,每件行李的重量不超过20公斤)。乘客携带的利器,如小刀、指甲刀等请放在
注意事项
雅思考生注意事项
考生必须
? 在报名时提供身份证件(护照或者身份证)。该身份证件信息需包括证件号码、持证人签名、生日及照片。请参考《中国地区雅思考生须知》内关于身份证件的要求,在境外参加考试的考生必须出示护照。
? 在考试当日出示一张近期护照标准尺寸照片。 相片要求如下 –彩色照片 –在六个月内拍摄
–背景为白色,可以清楚显示考生全貌 –照片无污损 –对焦清晰
–由专业照片冲印店打印 –显示考生头部及肩部 –考生正面直视镜头 –表情自然 –嘴唇闭合
–眼睛睁开,清楚可见 –不戴眼镜 –照片无阴影
–面部无遮挡物,露出眼睛,耳朵和嘴唇 –在照片背面注明姓名及考号
? 如果在考试日期前考生的报名证件有所变更,请立即联系英国文化协会(在中国作为英国使/领馆文化教育处开展工作)考试部,否则考生将被取消考试资格,并不得转考、退考或退费 ? 在考试当日出示与报名时一致的身份证件,否则考生将被取消考试资格和考试成绩,并不得转
考、退考或退费。
? 准时到达考点,迟到考生将: – 无法进入考场 – 无法参加任何考试环节 – 不得转考、退考或退费
? 将携带的个人物品放置在考试教室以外,以下物品不得带入考试教室
天车注意事项
天车使用管理制度及安全注意事项
天车管理制度:
一.目的
明确天车(管理)责任,加强天车管理,消除天车事故及隐患。
二.适用范围
适用于全公司天车的管理。
三.职责
1、设备部对本制度的实施负责,设备部负责人对本制度 的有效执行有监督检查责任。
2、各部门负责人对本部门的天车使用负责,天车的操作 使用及维护保养应设专人管理,天车外借应与借用部门进行 交接、天车出现损坏,由使用人承担全部责任并修复。
四.设备操作
1、凡使用天车人员,必需熟知操作按钮的启动方向、各种安全装置的作用和正确的吊挂、捆绑方式,否则禁止使用。
2、工作前应检查天车,吊具(如吊钩、吊环、钢丝绳等)是否安全可靠,无问题时方可使用。
3、天车在吊装时严禁超载。
4、吊运的物体必须吊挂牢固平稳后方可起吊。吊运时禁止同时使用两个以上的动作或斜拉,斜拽。物体旋转时,必须平稳后方可松钩。
5、吊运物体的高度必须高出运行线路上所遇到的物体,但不得从人的上方通过。
6、禁止用吊钩吊人或人员乘坐在吊运的物体上。
7、操作人员在实施吊运工作时,应精神集中不得与别人闲谈。 8、捆绑、吊运具有尖锐边缘的物体时,需用木板等软料垫好,防止钢丝
桃花注意事项
简析龙年感情运
每个人都祈盼爱情幸福,但爱情却总是捉弄痴情的人。在辛卯兔年里,不管是快乐还是痛苦,大多都经历了波折的过程,或受尽了爱情的折磨??,因此渴望有个更好的归宿。那么在壬辰龙年里,你的爱情究竟是啥状态呢?
从生肖上看:
最好的三个属相:
属鸡的人与龙年六合,感情的基础较好,异性缘很旺,会扫除兔年的阴霾,爱情上收获多于波折。 属猴的人与龙年三合,感情的基础也不错,异性缘较旺,也会摆脱兔年的折磨,享受爱情的甜蜜。 属鼠的人与龙年三合,感情的气场也挺强,异性缘较旺,也会摆脱兔年的烦恼,得到爱情的青睐。 较差的三个属相:
属狗的人与龙年六冲,感情的基础不好,异性缘较差,会失掉兔年的幸运,变化很大,爱情上挫折多于收获。
属兔的人与龙年相害,感情的基础不牢,异性缘也差,会延续兔年的纠结,伤害较多,爱情上烦恼多于快乐。
属龙的人在龙年自刑,感情的基础虽有,但异性缘不好,会延续上年的不顺,爱情上也比较纠结。
从日格上看:
最好的三个日格:
酉金格:日支为酉金的,与辰年六合,婚恋气场很好,异性缘很旺,会扫除兔年霉运,爱情上收获多于付出。
申金格:日支为申金的,与辰年三合,婚恋气场不错,异性缘较旺,也会摆脱兔年困惑,爱情上收获多于波折。
子水格:日支