医院常规空气细菌培养采样方法

1 空气细菌培养的采样方法

检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。此法简便，目前大部分医疗单位采用。

在消毒处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是：空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降，在室内各采样点处放好营养琼脂平板，采样高度距地面0.8～1.5m，采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。 2 细菌数的计算方法

细菌总数（cfu/m3=4500N/A×T）

式中A=平板面积（cm2） T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数（cfu）

这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表面，5min内能落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。

3 空气消毒效果和污染状况的评价

空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细

1 空气细菌培养的采样方法

检测空气细菌总数的细菌培养法平板暴露法。此法简便，目前大部分医疗单位采用。

在消毒处理后，操作前进行，室内面积≤30m2对角线内、中、外处设3点，内外点布位距墙壁1m处，室内面积＞30m2设4角及中央5点，4角的布点部位距墙壁1m处。基本原理是：空气中细菌等微生物可随尘粒一起下降，在室内各采样点处放好营养琼脂平板，采样高度距地面0.8～1.5m，采样时，将平板盖打开，暴露5min或10min，盖好平板。将平板置于37℃恒温箱培养48h计算菌落数。 2 细菌数的计算方法

细菌总数（cfu/m3=4500N/A×T）

式中A=平板面积（cm2） T——平板暴露时间（min） N——平均菌落数（cfu）

这个计算公式是根据在面积100cm3的培养基表面，5min内能落下的细菌相当于10L空气中含的细菌数而推算出来的。

3 空气消毒效果和污染状况的评价

空气消毒效果的比较应在消毒前后取样进行培养，如消毒后空气中细菌数明显下降，说明消毒效果好，下面规定适用GB15982——1995规定：Ⅰ类区域细菌总数≤10cfu/m3，并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅱ类区域细菌总数≤200cfu/m3并且未检出致病菌为消毒合格；Ⅲ类区域细

光合细菌的培养及应用方法

光合细菌(简称PSB)是地球上最早出现具有原始光能合成体系的原核生物，是一大类在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称，广泛存在于地球生物圈的各处。光合细菌在水产养殖上的应用主要有以下五个方面：作为养殖水质净化剂；作为饲料添加剂；用于鱼 、虾、贝幼体的培育；作为动物性生物饵料的饵料；防治鱼病。 一、培养工具的消毒方法

1．加热消毒法：利用高温杀死微生物的方法。

（1）直接灼烧：此法可直接把微生物烧死，灭菌彻底，但只适用于小型金属或玻璃工具的消毒。 （2）煮沸消毒：一般煮沸5～10分钟，适用于小型容器、工具的消毒。 （3）烘干箱消毒：亦称为恒温干燥箱消毒法。

2．化学药品消毒法：适用在批量培养中，大型容器、工具、玻璃钢水槽和水泥池中。 （1）酒精：浓度为70％的酒精常用于中、小型容器的消毒。用纱布蘸酒精在容器、工具的表面涂抹，10分钟后，用消毒水冲洗两次即可。

（2）高锰酸钾：按300ppm配成高锰酸钾溶液，把洗刷洁净的容器、工具放在溶液中浸泡5分钟，取出，再用消毒水冲洗2次～3次即可。 二、光合细菌的培养条件

1、 营养条件

光合细菌细胞体构成元素主要有：碳、氢、氧、氮、磷、钾、钠、镁、钙、硫和

大气中苯并(a)芘的测定方法

苯并〔a〕芘是多环芳香烃类化合物，又名3，4－苯并芘，简称Bap，分子式C20H12；分子量253.23；沸点475℃；熔点179℃；相对密度1.351。3，4－苯并芘纯品为无色或微黄色针状结晶，在水中溶解度较小，易溶于苯、氯仿、乙醚、丙酮、环己烷、二甲苯等有机溶剂。在苯中溶解呈蓝色或紫色荧光，在浓硫酸中呈桔红色并伴有绿色荧光。3，4－苯并芘是环境中普遍存在的对动物致癌性很强的一种物质，主要是含碳燃料及有机物热解过程中的产物。煤炭、石油等在无氧加热裂解过程中产生的烷烃、烯烃，经过脱氢、聚合，常可产生一定数量的3，4－苯并芘。工厂烟气中的悬浮颗粒物上吸附有3，4－苯并芘，散布在大气，一部分降落到水面和陆地上，从而污染水源和土壤。炼焦、化工、染料等工厂排出的工业废水中以及熏制食品、香烟烟雾中均含有3，4－苯并芘。

3，4－苯并芘对动物具有局部和全身的致癌作用，对猴子反复皮下注射可在局部形成肿瘤，从气管反复滴注可形成肺癌，在小鼠身上涂抹可使小鼠诱发皮肤癌。流行病学调查认为人的肺癌与环境中3，4－苯并芘的含量之间有着极为密切关系。虽然目前各国尚无公认3，4－苯并芘的最高容许浓度，但通过动物试验和现场调查提出了一些建议，例

第一章 环境空气和废气

第一节 环境空气采样

一、填空题

1．总悬浮颗粒物(TSP)是指能悬浮在空气中，空气动力学当量直径≤ 100 μm的颗粒物。可吸入颗粒物(PM10)是指悬浮在空气中，空气动力学当量直径≤ 10 μm的颗粒物。

2．氮氧化物是指空气中主要以 一氧化氮 和 二氧化氮 形式存在的氮的氧化物的总称。 3．从环境空气监测仪器采样口或监测光束到附近最高障碍物之间的距离，至少是该障碍物高出采样口或监测光束距离的 两 倍以上。

4．气态污染物的直接采样法包括 注射器 采样、采气袋 采样和 固定容器法采样。 5．气态污染物的有动力采样法包括： 溶液吸收 法、 填充柱采样法和低温冷凝浓缩 法。 6．影响空气中污染物浓度分布和存在形态的气象参数主要有 风速 、风向 、温度 、湿度、压力、降水以及太阳辐射等。

7．环境空气中颗粒物的采样方法主要有： 滤料法和自然沉降 法。

8．在环境空气采样期间，应记录采样 流量 、时间、气样温度和压力等参数。

9．在环境空气颗粒物采样时，采样前应确认采样滤膜无 针孔 和 破损 ，滤膜的毛面向上；采样后应检查确定滤膜无 破裂 ，滤膜上尘的边缘轮廓清晰，否则该样品膜作废，需要重新采样。 10．使用

环境空气采样技术导则

一、范围

本导则在进行环境空气污染物监测时，对采样点位，采样高度，采样时间和频率,以及采样方法和质量保证措施等项做出规定。本导则适用于环境空气中各种化学污染物的采样。 二、采样

环境空气监测中的采样点、采样环境、采样高度及采样频率的要求按《环境监测技术规范》大气部分执行。

SO2采样:

空气采样器：用于短时间采样的普通采样器，流量范围0-1L/min。用于24h连续采样的采样器应具有恒温、恒流、计时、自动控制仪器开关的功能。流量范围0.2-0.3L/min，采样器均应在采样前进行气密性检查和流量校准。吸收器的阻力和吸收效率应满足技术要求。

1.短时间采样：根据空气中二氧化硫浓度的高低，采用内装10ml吸收液的U形多孔吸收管，以0.5L/min的流量采样。采样吸收液温度的最佳范围在23-29℃，采样时间为45min—1h。

2.24小时连续采样：用内装50ml的吸收液的多孔吸收管，以0.2—0.3L/min的流量连续采样18—24h。吸收液温度须保持在23-29℃的范围。

NO2、NOX

1.便携式空气采样器：流量范围0—1L/min。采气流量为

0.4L/min，误差小于±5%。

2.恒温自动连续采样器：采样流量为

环境监测的考题

环境空气、烟尘、烟气采样考题

一、填空题

1、空气采样器一般以 计量流量。流量计的读数受 和 的影响，常以 进行刻度校准。24小时自动连续采样装置必须具备 和 装置，以便计算标准

状态下（O℃，101.3kPa）的采样体积。

答案：转子流量计 温度 压力 皂膜流量计 恒温 定时

2、用四氯汞钾吸收液或用甲醛缓冲液采集空气中的二氧化硫时，环境温度太高、太低都会

影响 。上述两种吸收液的最适宜采样温度范围分别为 。

答案：采样吸收率 10～16℃，23～29℃

3、在进行锅炉烟尘排放浓度测试时，对锅炉负荷有一定要求。新锅炉验收测试应在 下

进行，在用锅炉的测试必须在 的情况下进行，手烧炉应在 的时间内测定。

答案：设计出力 锅炉设计出力的70%以上 不低于两个加煤周期

二、选择题

1、 污染源大气污染物排放中的最高允许排放浓度，是指处理设施后或无处理设施排气筒中

污染物 ② 浓度平均值，所不得超过的限值。

答案： ①24小时 ②任何1小时 ③45分钟

2、 静压是单位体积气体所具有的势能，它

一、采样工作流程

1、接受任务现场监测和采样承担部门的负责人在接到任务后提前通知有关科室配合，质量管理室填写任务传递单，将任务传递至现场监测人员。

2、对监测项目基本情况进行调查现场监测人员认真了解监测对象的生产设备、工艺流程，清楚主要污染源、主要污染物及其排放规律，查看环保措施落实和环保设施运行情况，监控生产负荷，调查现场环境（如：气象、水文、污染源）有关参数和周边环境敏感点，检查监测点位符合性及安全性，搜集与编制技术（监测）报告有关的各种技术资料并做好相关的记录。

3、领取并检查采样所需仪器设备和辅助材料，进行采样前准备现场监测人员根据任务传递单领取采样容器、滤膜，准备现场监测和采样所需的仪器设备、器具、样品标签、现场固定剂等，并完成仪器设备的运行检查。

（1）采样前准备的仪器设备和辅助材料

包括：采样器、风速风向仪、气温气压计、GPS吸收瓶（内装配置好的吸收液，装箱，含空白、平行）、滤膜（含空白和备用膜）、镊子、凡士林、剪刀、手套、封口膜、电池、原始记录单、交接单、样品标签和笔等相关仪器物品。

（2）仪器设备的运行检查在领用时，要检查并填写仪器的使用记录，尤其检查采样器流量是否需要校准，并对采样器进行气密性检查。

（3）现场采样前的准备

1）复核现场工

菌落

定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单一肉眼可见的细菌集团。 菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性。 2、细菌在液体培养基中的生长现象 混浊

沉淀：多见于链状排列的细菌。 菌膜：多见于厌氧菌。

3、细菌在半固体培养基中的生长现象 有鞭毛细菌：

在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线边缘模糊。 无鞭毛细菌：

只沿穿刺线生长，穿刺线边缘清晰。

生化试验鉴定：糖发酵试验、淀粉实验、油脂水解试验、吲哚实验、M.R.及V.P的原理及方法。

1.淀粉水解试验

1.将固体淀粉培养基熔化后冷却至50℃左右，无菌操作制成平板。 2.用记号笔在平板底部划成4部分。

3.将枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌分别在不同的部分点种，在平板的反面分别在4部分写上菌名。

4将平板倒置在37℃温箱中培养48h。

5观察各种细菌的生长情况，打开平板盖子，滴入少量卢氏碘液于平板中，轻轻旋转平板，使碘液均匀铺满整个平板。如菌苔周围出现无色透明圈，说明淀粉已被水解，为阳性。透明圈的大小可初步判断该菌水解淀粉能力的强弱，即产生胞外淀粉酶活力的高低。 2油脂水解试验

1将熔化的固体油脂培养基冷却至50℃左右时，充分摇荡

烟尘烟气采样器的采样方法

各种根据美国环保局USEPA参考方法的固定源排放污染物采样设备-烟尘烟气采样器。主要方法归纳为等动力采样方法(等速采样方法)或烟气采样方法。等动力采样方法(等速采样方法)中，采样速率与源流量按比例调节，而烟气采样方法中采样通过在一个恒定的低速率来取样。许多烟气采样方法也可以用等动力采样器(等速采样器)加合适的附件来实施。下面是一些部分采样方法列表： 烟尘烟气采样器之等动力采样方法(等速采样方法) 方法4(Method4):烟道气湿度 方法5(Method5):颗粒物排放(PM) 方法5B(Method5B):非硫酸颗粒物 方法8(Method 8): 硫酸雾和二氧化硫 方法12(Method12):无机铅

方法13A和13B(Method 13A &13B):总氟化物 方法17(Method17):烟道内过滤的颗粒物 方法23(Method 23): 二恶英和呋喃 方法26A(Method 26A): 卤化氢和卤素 方法29(Method 29): 多种金属 方法201A(Method 201A): PM10 排放 方法202(Method 202): 可凝结颗