黄酮标准曲线的测定

黄酮标准曲线绘制的实验报告

1.总黄酮的测定

1.1 实验仪器 电子天平AR2140;

紫外可见分光光度计UV2754; 型数控超声波清洗器KQ3200DB; 超级恒温槽;

Rotavapor R200 旋转蒸发仪 ; FD21C250 冷冻干燥机2 1.2 试剂及药品 芦丁 标准品

硝酸铝 国产分析纯（配成5 %） 亚硝酸钠 国产分析纯（配成10 %） 氢氧化钠 国产分析纯配成（配成1mol/L）

95%乙醇，无水乙醇 国产分析纯（配成60%乙醇 50%乙醇）

DPPH·（2，2-diphenyl-1-picrylhydrazyl，二苯代苦味肼基自由基） Vc（Ascrobic acid，维生素 C，抗坏血酸） 没食子酸对照品：基准纯。

大青叶子 采摘于海南大学东坡湖畔 1.3实验步骤：

1.3.1准备工作及波长的确定

样品60℃烘干粉碎机粉碎，过20目筛，装入试剂瓶中备用。根据查阅文献总黄酮在波长为510nm处吸收值最大。 1.3.2参照品芦丁标准溶液的制备

精密称取120 ℃干燥至恒重的芦丁标准样品37.5mg置于100mL烧杯中,用60%乙醇溶解后定容至25mL 容量瓶中,摇匀，即可得1

黄酮标准曲线绘制的实验报告

1.总黄酮的测定

1.1 实验仪器 电子天平AR2140;

紫外可见分光光度计UV2754; 型数控超声波清洗器KQ3200DB; 超级恒温槽;

Rotavapor R200 旋转蒸发仪 ; FD21C250 冷冻干燥机2 1.2 试剂及药品 芦丁 标准品

硝酸铝 国产分析纯（配成5 %） 亚硝酸钠 国产分析纯（配成10 %） 氢氧化钠 国产分析纯配成（配成1mol/L）

95%乙醇，无水乙醇 国产分析纯（配成60%乙醇 50%乙醇）

DPPH·（2，2-diphenyl-1-picrylhydrazyl，二苯代苦味肼基自由基） Vc（Ascrobic acid，维生素 C，抗坏血酸） 没食子酸对照品：基准纯。

大青叶子 采摘于海南大学东坡湖畔 1.3实验步骤：

1.3.1准备工作及波长的确定

样品60℃烘干粉碎机粉碎，过20目筛，装入试剂瓶中备用。根据查阅文献总黄酮在波长为510nm处吸收值最大。 1.3.2参照品芦丁标准溶液的制备

精密称取120 ℃干燥至恒重的芦丁标准样品37.5mg置于100mL烧杯中,用60%乙醇溶解后定容至25mL 容量瓶中,摇匀，即可得1

蕨菜中总黄酮和多糖的还原力测定

一．前言

1.项目的意义

蕨菜是采自蕨科蕨属中蕨的幼嫩叶。近年来已成为深受人们喜爱的山野菜。蕨菜还具有清热化痰、利尿安神等功效,经常食用蕨菜会有一定的保健作用。蕨菜中所含黄酮类化合物具有抗溃疡、抗过敏、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、降血脂、治疗心脑血管疾病等药用保健功能,也是一类具有广阔开发前景的天然抗氧化剂。文中对蕨菜黄酮的含量测定、抗氧化作用等方面进行了研究,为蕨菜的保健功能研究,更为蕨菜的深度加工与开发提供依据。 2.黄酮的研究进展

由于黄酮具有广谱的药理作用，特别是在抗癌、防癌和抗自由基方面的作用，引起人们 极大的开发兴趣。微波、超声波、酶解、浸提和超临界提取等几种黄酮的提取方法可以单独 使用，也可以相互辅助使用。黄酮的分离和鉴定方法主要有高效液相色谱法、紫外分光光度 法和颜色判别法。测定黄酮的活性时，主要是测其抗氧化性能。近年来，研究黄酮的学者越来越多，相信黄酮会更多地应用到医药、化妆、食品等领域。 3.实验内容

首先采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定样品中总黄酮含量。利用黄酮类化合物与铝 盐反应生成红色络合物,以芦丁为标准在510nm处测吸光度,进行黄酮含量的测定[然后通过对蕨

蕨菜中总黄酮和多糖的还原力测定

一．前言

1.项目的意义

蕨菜是采自蕨科蕨属中蕨的幼嫩叶。近年来已成为深受人们喜爱的山野菜。蕨菜还具有清热化痰、利尿安神等功效,经常食用蕨菜会有一定的保健作用。蕨菜中所含黄酮类化合物具有抗溃疡、抗过敏、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、降血脂、治疗心脑血管疾病等药用保健功能,也是一类具有广阔开发前景的天然抗氧化剂。文中对蕨菜黄酮的含量测定、抗氧化作用等方面进行了研究,为蕨菜的保健功能研究,更为蕨菜的深度加工与开发提供依据。 2.黄酮的研究进展

由于黄酮具有广谱的药理作用，特别是在抗癌、防癌和抗自由基方面的作用，引起人们 极大的开发兴趣。微波、超声波、酶解、浸提和超临界提取等几种黄酮的提取方法可以单独 使用，也可以相互辅助使用。黄酮的分离和鉴定方法主要有高效液相色谱法、紫外分光光度 法和颜色判别法。测定黄酮的活性时，主要是测其抗氧化性能。近年来，研究黄酮的学者越来越多，相信黄酮会更多地应用到医药、化妆、食品等领域。 3.实验内容

首先采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定样品中总黄酮含量。利用黄酮类化合物与铝 盐反应生成红色络合物,以芦丁为标准在510nm处测吸光度,进行黄酮含量的测定[然后通过对蕨

蕨菜中总黄酮和多糖的还原力测定

一．前言

1.项目的意义

蕨菜是采自蕨科蕨属中蕨的幼嫩叶。近年来已成为深受人们喜爱的山野菜。蕨菜还具有清热化痰、利尿安神等功效,经常食用蕨菜会有一定的保健作用。蕨菜中所含黄酮类化合物具有抗溃疡、抗过敏、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、降血脂、治疗心脑血管疾病等药用保健功能,也是一类具有广阔开发前景的天然抗氧化剂。文中对蕨菜黄酮的含量测定、抗氧化作用等方面进行了研究,为蕨菜的保健功能研究,更为蕨菜的深度加工与开发提供依据。 2.黄酮的研究进展

由于黄酮具有广谱的药理作用，特别是在抗癌、防癌和抗自由基方面的作用，引起人们 极大的开发兴趣。微波、超声波、酶解、浸提和超临界提取等几种黄酮的提取方法可以单独 使用，也可以相互辅助使用。黄酮的分离和鉴定方法主要有高效液相色谱法、紫外分光光度 法和颜色判别法。测定黄酮的活性时，主要是测其抗氧化性能。近年来，研究黄酮的学者越来越多，相信黄酮会更多地应用到医药、化妆、食品等领域。 3.实验内容

首先采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定样品中总黄酮含量。利用黄酮类化合物与铝 盐反应生成红色络合物,以芦丁为标准在510nm处测吸光度,进行黄酮含量的测定[然后通过对蕨

蕨菜中总黄酮和多糖的还原力测定

一．前言

1.项目的意义

蕨菜是采自蕨科蕨属中蕨的幼嫩叶。近年来已成为深受人们喜爱的山野菜。蕨菜还具有清热化痰、利尿安神等功效,经常食用蕨菜会有一定的保健作用。蕨菜中所含黄酮类化合物具有抗溃疡、抗过敏、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、降血脂、治疗心脑血管疾病等药用保健功能,也是一类具有广阔开发前景的天然抗氧化剂。文中对蕨菜黄酮的含量测定、抗氧化作用等方面进行了研究,为蕨菜的保健功能研究,更为蕨菜的深度加工与开发提供依据。 2.黄酮的研究进展

由于黄酮具有广谱的药理作用，特别是在抗癌、防癌和抗自由基方面的作用，引起人们 极大的开发兴趣。微波、超声波、酶解、浸提和超临界提取等几种黄酮的提取方法可以单独 使用，也可以相互辅助使用。黄酮的分离和鉴定方法主要有高效液相色谱法、紫外分光光度 法和颜色判别法。测定黄酮的活性时，主要是测其抗氧化性能。近年来，研究黄酮的学者越来越多，相信黄酮会更多地应用到医药、化妆、食品等领域。 3.实验内容

首先采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定样品中总黄酮含量。利用黄酮类化合物与铝 盐反应生成红色络合物,以芦丁为标准在510nm处测吸光度,进行黄酮含量的测定[然后通过对蕨

蕨菜中总黄酮和多糖的还原力测定

一．前言

1.项目的意义

蕨菜是采自蕨科蕨属中蕨的幼嫩叶。近年来已成为深受人们喜爱的山野菜。蕨菜还具有清热化痰、利尿安神等功效,经常食用蕨菜会有一定的保健作用。蕨菜中所含黄酮类化合物具有抗溃疡、抗过敏、抗菌、抗炎、抗氧化、抗衰老、降血脂、治疗心脑血管疾病等药用保健功能,也是一类具有广阔开发前景的天然抗氧化剂。文中对蕨菜黄酮的含量测定、抗氧化作用等方面进行了研究,为蕨菜的保健功能研究,更为蕨菜的深度加工与开发提供依据。 2.黄酮的研究进展

由于黄酮具有广谱的药理作用，特别是在抗癌、防癌和抗自由基方面的作用，引起人们 极大的开发兴趣。微波、超声波、酶解、浸提和超临界提取等几种黄酮的提取方法可以单独 使用，也可以相互辅助使用。黄酮的分离和鉴定方法主要有高效液相色谱法、紫外分光光度 法和颜色判别法。测定黄酮的活性时，主要是测其抗氧化性能。近年来，研究黄酮的学者越来越多，相信黄酮会更多地应用到医药、化妆、食品等领域。 3.实验内容

首先采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定样品中总黄酮含量。利用黄酮类化合物与铝 盐反应生成红色络合物,以芦丁为标准在510nm处测吸光度,进行黄酮含量的测定[然后通过对蕨

多酚

精确称取没食子酸标准品25mg，用水溶解并定容至250ml，得对照品标准溶液。精密吸取对照品溶液0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5ml于25m比色瓶中，再加入1ml福林酚显色剂，摇匀后再加入2ml 10% Na2CO3溶液，定容至10ml，室温下反应20min后测定A760.取一定量的香椿加蒸馏水碾碎，测其上清液测定。（根据吸光值自己调整量）

称取剪碎的香椿0.5g（按需称取），加入5 mL 80%乙醇研磨过滤，将滤液放置20 min。取0.1 mL滤液，加入5 mL水及0.5 mL福林酚反应8 min，再加

1.5 mL 10%的碳酸钠溶液，于760 nm处测定吸光度值。根据标准曲线算出总酚含量。 黄酮

精确称取芦丁标准品10mg，加入几滴无水乙醇溶解，然后用60%乙醇定容至100ml，得对照品标准溶液。取芦丁标准液0.00、0.20、0.40、0.60、0.80 和1.00 mL 分别放入1～6号25ml比色管中，然后分别加入5ml蒸馏水，加入0.2mL 5%NaNO2，摇匀,静置6min ;再分别加入0.2mL 10%Al(NO3)3，摇匀，静置6min，再分别加入1mL 4%NaOH，用60%乙醇定容至刻度10ml处

VFA的测定方法及标准曲线

VFA的测定方法及标准曲线

VFA测定的方法

指 标

检测方法

分析仪器

检测条件 挥发性脂肪酸VFA，包含乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸 液相色谱法 高效液相色谱仪，HPLC （Agilent 1200, 安捷伦科技有限公司，美国） 流动相：0.05%稀磷酸，流速0.7 mL min-1；

检测器：紫外检测器，波长=210 nm；

分析柱：Shodex RSpak KC-811 有机酸专用分析柱（6 μm, 8× 300 mm） + KC-G 保护住（10 μm, 6× 50 mm），柱温箱恒定55℃；

进 样：自动进样器进样，进样量 20 μL；

定 量：基于峰面积的外标法。

样品处理： 过0.45 μm水相滤膜后转移至棕色自动进样瓶。

注：乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸出峰时间分别为15.15、17.30、19.18、20.64、23.43、28.00min。

实验仪器

高效液相色谱仪（Agilent 1200,）

1 总黄酮含量测定

1． 1 紫外可见分光光度法严赞开［1］综述了紫外分光光度法测定植物中黄酮含量的方法． 重点介绍了单波长法、差示法、双波长法、三波长法、导数法等紫外分光光度法测定黄酮类化合物含量的原理及分析特性。

1． 1． 1 紫外可见分光光度法: 是以分子吸收光谱为基础的紫外－ 可见分光光度法，利用某些物质的分子在峰带I( 300 ～400 nm) 和峰带Ⅱ( 220 ～ 280 nm) 光谱区的吸光度来进行分析测定的方法。具有简便、适用性广、准确度、精密度和重现性较好等特点，在总黄酮含量分析中发挥着重要作用。 1． 1． 2 比色法: 是一些药典最常用的总黄酮含量检测方法，它主要以Al( NO3 ) 3 为显色剂，在碱性条件下，利用其与总黄酮形成红色螯合物为特征。常用于总黄酮类化合物含量测定的金属盐试剂有Al( NO3 ) 3、AlCl3 等。

1． 1． 3 差示分光光度法简称ΔA 法: 使用稍高于样品或稍低于样品的标准作参比，测量样品和参比间的相对吸光度。而此相对吸光度又与样品和参比间的浓度差成比例关系，借差示工作曲线而求出样品的含量。

1． 1． 4 双波长和导数分光光度法: 用于测定吸收光谱曲线重达的混合物的含量而不须用解联