分光光度计使用方法

分光光度计的使用方法

1、使用方法

1.接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。

2.将灵敏度开关调至“1”档（若零点调节器调不到“0”时，需选用较高档）

3.根据所需波长转动波长选择钮。

4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。

5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，使读数盘指针指向t=0处。

6.盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。

7.比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。

2、注意事项

①空白溶液与供试品溶液必须澄清，不得有浑浊。如有浑浊，应预先过滤，并弃去初滤液。 ②在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸收度，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确，除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内；否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确度，并以吸收度最大的波长作为测定波长。 ③一般供试品溶液的吸收度读数，以在0.3～0.7之间的误差较小。

④由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。

⑤在测定时或

分光光度计的使用方法

1、使用方法

1.接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。

2.将灵敏度开关调至“1”档（若零点调节器调不到“0”时，需选用较高档）

3.根据所需波长转动波长选择钮。

4.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，放入样品室内，使空白管对准光路。

5.在暗箱盖开启状态下调节零点调节器，使读数盘指针指向t=0处。

6.盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的光密度值，并记录。

7.比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。

2、注意事项

①空白溶液与供试品溶液必须澄清，不得有浑浊。如有浑浊，应预先过滤，并弃去初滤液。 ②在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸收度，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确，除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内；否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确度，并以吸收度最大的波长作为测定波长。 ③一般供试品溶液的吸收度读数，以在0.3～0.7之间的误差较小。

④由于吸收池和溶剂本身可能有空白吸收，因此测定供试品的吸收度后应减去空白读数，再计算含量。

⑤在测定时或

分光光度计考试题

答卷人： 评分： 一、判断题（每题一分）

1. 在一定的光强照射下，光电流与射入的光量近似成正比。( )

2. 在分光光度计中，用光电管代替硒光电池可以提高测量的准确度。( )

3. 单光束紫外-可见分光光度计是根据物质的分子对紫外、可见区辐射(光)产生的吸收光谱和Lambert-Beer定律测量物质的性质和含量的分析仪器。 ( ) 4. 单光束紫外-可见分光光度计的检定周期一般为半年。 ( ) 5. 单光束紫外-可见分光光度计的仪器类别分为A类和B类。（ ）

6. 检定紫外-可见分光光度计所使用的光谱中性滤光片的标称值为10%、20%、30%(或40%)。（ ） 7. 仪器无需预热就能检定。（ ）

8. 单光束紫外-可见分光光度计检定规程规定，仪器透射比重复性应不大于相应投射比准确度绝对值的2倍。（ ）

9. 适用于可见光区的光源，常用的有钨灯和普通灯。 ( )

10．杂散光的存在，会使测量结果吸光度值增加，透射比值减小。 ( )

湘潭职业技术学院药学实训中心

UV2600型紫外分光光度计操作规程

一、开机

1.打开仪器电源。

2.打开电脑，点击UV Analyst 进入光谱分析软件。

3.软件将自动搜索仪器端口，点击“联机”，软件与仪器联机成功。

二、选择测试模式

根据实验需求选择测试模式。仪器提供的测试模式有“波长扫描”“时间扫描”“定点测量”“定量测量”“核酸测量”和“蛋白质测量”

【波长扫描】主要用以检测样品对一定范围波长光的吸收情况，以便对样品进行定性测量。

1.点击左侧主功能栏中的“波长扫描”即可进入波长扫描界面。

2. 根据实验要求，在“设置”设定检测参数。

3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。

4. 点击“基线测量”以扣除空白的背景吸收。

5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。

6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。

7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。

注意：在“基线测量”中所选择的基线必须与参数设置中基线一致！

【时间扫描】是检测样品在特定波长范围内吸光度（或透过率）随时间的推移而发生变化情况。主要用以检测样品的稳定性或进行化学动力学研究。

1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。

2. 根据实验要求，在“设

1.吸光度测量步骤：

（1） 按动“功能”键，切换到透过率测量模式。 （2） 调整测试波长。

（3） 置入遮光体，按下“0%T”键调零。 （4） 按动“功能”键，切换到吸光度测量模式。

（5） 置入参比样品，按下“100%T”键调百。此时仪器显示“.000” （6） 置入测试样品，读取测试数据。

（7） 测量值超过1.999时，显示“1–––”,即超出显示范围。 （8） 测量值低于-1.999时，显示“1–––”,即超出显示范围。

2.调零（0%T）步骤：

将遮光体置入样品架，并拉动样品架拉杆使其进入光路。然后按下仪器的“0%T”按钮，便可完成调零。 *注意事项：

a. 调零时光路内必须置入挡零块，否则无法正常完成调零，显示“E1”。 b. 调零时不要打开样品室盖。

c. 调零在透过率模式下显示“00.0”，在吸光度模式下显示“1–––”,即超出显示范围。

3.调百（100%T）步骤：

将空白样品置入样品架，并拉动样品架拉杆使其进入光路。然后按下仪器上的“100%T”，此时屏幕显示“BL”便可以完成调百。 *注意事项：

a. 调百时不要打开样品室盖。

b. 调百时不能把挡零块置入光路，否则无法调百，显示“E2”。

c. 调100%在

实训实验任务名：

课程分析仪器结构及维护

情境三紫外-可见分光光度计

课时：4地点：实C403

目录

介绍 (2)

目的 (2)

预习参考资料 (2)

课1.

分光光度计原理 (5)

分光光度计结构 (5)

课2.

分光光度计检定(测试)的主要项目对分析结果的影响 (5)

课3.

与分光光度计正确使用和维护有关的几个注意事项 (2)

课4.

分光光度计操作中容易出现的几个典型故障及其排除方法 (7)

课2.

练习1-1 (8)

介绍

在完成这一个单元的学习之后，学员将能理解紫外可见分光光度计的结构及常见故障排除。同时具备必要的维护和更换相应部件的技能

目的

1.了解紫外可见分光光度计的理论和操作

2.了解一个典型的分光光度计的结构和常见故障排除

3.掌握成功维修常见故障的技术

技能要求

1.熟悉紫外-可见分光光度计的基本结构及各主要部件的作用；

2．掌握紫外-可见分光光度计一般操作程序和具体操作要求；

3．掌握紫外-可见分光光度计的安装要求和维护保养知识；

讲师的任务:

1.描述721分光光度计结构

2.描述721分光光度计常见故障

预习参考资料

课1.理论和操作

分光光度计的基本工作原理是基于物质对光

(对光的波长)的吸收具有选择性，不同的物质都有各

自的吸收光带，所以，当光色散后的光谱通过某一

溶液时，其中某些

简要介绍资料的主要内容,以获得更多的关注

721分光光度计的使用规程

①该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。

②使用本仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理，以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前，应该对仪器的安全性能进行检查，电源接线应牢固，通电也要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再按通电源开关。

③在仪器尚未接通电源时，电表指针必须于“0”刻线上，若不是这种情况，则可以用电表上的校正螺丝进行调节。

④将仪器电源开通，打开比色皿暗箱盖，选择需用的单交波长，灵敏度选择请参照“5”调节“0”电位器使用电表指“0”；然后将比色皿暗箱盖合上，比色皿座处于蒸馏水校正位置，使光电管受光，旋转调“100%”电位器，使电表指针到满度附近，仪器预热20分钟。

⑤放大器灵敏度有五档，是逐步增加的，“1”最低。其选择原则是保证能使空白档良好调到“100%”的情况下，尽可能采用灵敏度较低档，这样仪器将有更高的稳定性。所以使用时一般置“1”，灵敏度不够时再逐渐升高，但改变灵敏度后需按“4”重新校正“0”和“100%”，仪器即可进行测定工作。

⑥预热后，按“4”连续

1. 2. 3.

4.

建议: 在每次测量完毕后，用蒸馏水清洁样品平台，这样可以保证下一次测量的准确性。 每次测量的样品量建议不少于2微升

Nanodrop分光光度计操作说明

双击电脑屏幕上的Nanodrop图标,启动软件.

选择所需的测量模式,屏幕上会弹出初始化仪器的提示.往仪器的加样孔中加入2微升的蒸馏水,合上上盖使形成液柱,然后点击确定以开始初始化,可以听见电磁阀开合的声音.

五六秒后屏幕上的提示信息消失,表示初始化完成.用擦镜纸将蒸馏水擦干净,加入2-3微升的Buffer,合上上盖并点击Blank.

Blank完成后,用擦镜纸将Buffer擦干净即可以开始上样,点击Measure开始测量.

图一 图二

图三 图四

5. 测量完成后,点击Show Report查看结果,选择Save进行保存. 6. 保存的数据对应地保存在C:\\Nanodrop Data文件夹.

注: 具体的实验方法如BCA,Bradford等以及标准曲线的建立请参阅生物学资料和说明书

名词介

一、 原子荧光分光光度计 技术参数 1、工作条件要求 1.1电源: 220V，50Hz 1.2温度: 15～35℃ 1.3相对湿度: 10-75% 2、技术能力要求

2.1用途：用于食品卫生检验、环境样品检验、城市给排水检测、农产品检验、地质冶金检验、化妆品检验、土壤肥料饲料检验等样品中As、Sb、Bi、Hg、Se、Te、Sn、Ge、Pb、Zn、Cd元素的痕量分析。 2.2分析方法：非色散光学系统,进行两道元素同时测量

*2.2.1氢化物发生进样方式：双注射泵联合进样，蠕动泵主动排废

2.2.2检测能力：适用于As、Hg、Se、Pb、Ge、Sn、Te、Bi、Sb、Cd、Zn等十一种元素的痕量测定

2.2.3检测限(D.L.)：As、Pb、Se、Bi、Sn、Sb、Te、Hg≤0.01μg/L； Hg（冷原子测汞）、Cd≤0.001μg/L； Ge≤0.05μg/L;Zn≤1.0μg/L *2.2.4相对标准偏差（RSD)：≤0.8% 2.2.5线性范围：≥三个数量级

*2.3光学光源系统：双光束、实时监控，脉冲恒流或集束脉冲供电，无色散光学系统，自识空心阴极灯

2.4气路设计（气路控制模块）： 2.4.1控制方式：质量流量控制器（MFC）

荧光分光光度计技术指标

一．设备的主要用途、功能及特点

该设备可用于食品、饲料、生化样品、药品以及环境样品中荧光物质的定性定量分析。采用石英涂层的光学系统。可同时测定荧光、磷光、化学和生物发光。软件具有扫描（激发光谱、发射光谱、3D光谱、同步光谱、等高线图）、浓度、动力学、时间分辨以及仪器校准、性能认证等功能。 二．技术参数及指标

*2.1 光源：闪烁式氙灯，脉冲半峰宽小于2微秒，功率≥70KW，氙灯必须只在工作时才闪烁；

2.2 无需关闭样品室就可以测试荧光数据，样品体积大小不受仪器限制； 2.3 切尼－特纳型单色器，超低杂散光。

*2.4 最大扫描速率：＞22000 nm/min，可以在3s左右完成全波长扫描； *2.5 水平狭缝光路，采用标准比色皿（1cm光程）测试样品量最少体积≤0.6mL； 2.6 波长精度：±0.5nm(541.92nm)； 2.7 波长重现性：±0.2nm； *2.8 波长范围

激发态：200-900nm， 发射态：200-900nm； 2.9、灵敏度(水的Raman峰信噪比)

≥750：1 RMS，350nm激发，发射和激发狭缝为10nm，平均采样时间为1秒； *2.10 激发/发射单色器配置下列自动滤光片，