淋巴细胞生活的液体环境

第九章 B淋巴细胞新乡医学院免疫学教研室E-mail: myx939@

本章要点1. B细胞表面的主要分子 2. B细胞的亚群分类

3. B细胞的功能

B淋巴细胞简称B细胞，是由哺乳动物骨髓 ( bone marrow )或鸟类法氏囊(bursa of Fabricius)中的淋巴样干细胞分化成熟而来， 能产生和分泌抗体的一类细胞。 B细胞 浆细胞

第一节 B细胞的分化发育抗原非依赖阶段：在骨髓

成熟B细胞

未成熟细胞

前B细胞

祖B细胞 淋巴干细胞

抗原依赖阶段：外周淋巴器官 抗原 成熟B细胞 活化B细胞 记忆B细胞

浆细胞 胞浆Ig

一、BCR基因重排(VDJ重排)

二、B细胞在中枢免疫器官中的发育IL-7RIL-7 Late pro-B

Early pro-B

Pre-B

Stromal cell

分期(骨髓内)祖B细胞(pro-B)(重链基因重排)

重链μ胞质

轻链

表面标 志

前B细胞(pre-B)(轻链基因重排)

μ μ μ+δ

替代轻链 Vpre-B,λ5 κ或λ κ或λ

类Ig mIgM mIgM mIgD

未成熟B细胞(immature-B)(轻链基因重排、阴性选择)

成熟B细胞(mature-B)

三、B细胞中枢耐受的形成BImmature B cell

克隆清除

YImmat

T 淋巴细胞

徐琦

新疆医科大学免疫学教研室T淋巴细胞

掌握：熟悉：了解：胸腺、骨髓的微环境；

TCR复合物复合物的组成和功能；

T细胞亚群和功能以及Th细胞亚群的转换和意义；T 细胞的发育；

T 细胞表面分子及其功能；?

?

?

本章主要内容

T细胞的发育

T细胞表面分子及其作用

T细胞分类和功能

T细胞的发育

PHSC （多能造血干细胞）cell

DN（双阴细胞）CD4-CD8-T细胞

Pro-T

骨髓

胸腺

DP（双阳细胞）CD4+CD8+T细胞

SP（单阳细胞）CD4+CD8-T细胞

或CD4-CD8+T细胞T细胞库特性

MHC限制性

对自身抗原的耐受性

外周淋巴器官

T细胞在胸腺发育的三个阶段

骨髓：pro-T

第一阶段：DN

CD4-CD8-

第二阶段：DP

CD4+CD8+

第三阶段：SP

CD4+CD8-或CD4-CD8+

T细胞在胸腺中获得的三个特性

?

功能性TCR的表达(包括CD3的表达)：pro-T→pre-T(DN)→DP→SP自身的MHC限制性：阳性选择DP→SP

自身耐受性：阴性选择DP→SP→外周T细胞

?

?

阳性选择阴性选择(positive selection)(negative selection)发生场所胸腺皮质胸腺皮质→髓质参与的基质细胞胸腺上皮细胞与自身MHC分子过高/

T 淋巴细胞

徐琦

新疆医科大学免疫学教研室T淋巴细胞

掌握：熟悉：了解：胸腺、骨髓的微环境；

TCR复合物复合物的组成和功能；

T细胞亚群和功能以及Th细胞亚群的转换和意义；T 细胞的发育；

T 细胞表面分子及其功能；?

?

?

本章主要内容

T细胞的发育

T细胞表面分子及其作用

T细胞分类和功能

T细胞的发育

PHSC （多能造血干细胞）cell

DN（双阴细胞）CD4-CD8-T细胞

Pro-T

骨髓

胸腺

DP（双阳细胞）CD4+CD8+T细胞

SP（单阳细胞）CD4+CD8-T细胞

或CD4-CD8+T细胞T细胞库特性

MHC限制性

对自身抗原的耐受性

外周淋巴器官

T细胞在胸腺发育的三个阶段

骨髓：pro-T

第一阶段：DN

CD4-CD8-

第二阶段：DP

CD4+CD8+

第三阶段：SP

CD4+CD8-或CD4-CD8+

T细胞在胸腺中获得的三个特性

?

功能性TCR的表达(包括CD3的表达)：pro-T→pre-T(DN)→DP→SP自身的MHC限制性：阳性选择DP→SP

自身耐受性：阴性选择DP→SP→外周T细胞

?

?

阳性选择阴性选择(positive selection)(negative selection)发生场所胸腺皮质胸腺皮质→髓质参与的基质细胞胸腺上皮细胞与自身MHC分子过高/

第1章 第1 节

人体的内环境与稳态 细胞生活的环境

第一节

细胞生活的环境

1、图1和图2中各是什么细胞？ 请说出细胞的名称？ 红细胞、白细胞 草履虫

2、它们分别生活在什么样的环 境中?两者生存环境有何异同？ 血浆 水 液体环境

一、细胞外液1、体液： 人体内大量以水为基础的液体

细胞内液: 约2/32、分类 血浆细 胞 内 液

细胞外液 组织液 (约1/3) 淋巴

细 胞 外 液

并不是人体内的所有液体都为体液，也并不是除细胞内液外的所 有液体都是细胞外液，比如泪液、汗

液、尿液、消化液。他们虽在人体内存储，但由于其所在器官都直接与外

界环境相通，因此不能算作细胞外液，也不能算作体液。

脑脊液：在脑室中产生的一种无色透明液体，相当于淋巴液，处

于不断生产、循环和回流的平衡状态，对中枢神经系统起着缓冲、保 护、营养、运输代谢废物及维持正

常颅内压的作用，若其循环受阻，可引起脑积水或脑疝。在人体及动

物生理学上，脑脊液属于细胞外液。

注意1、内环境与细胞外液含义相同 从细胞角度看——细胞外液 从人体角度看——内环境

2、汗液、尿液、消化液、泪液、唾液属于体液吗？ 呼吸道、肺泡腔、口腔、消化道、膀胱腔与 外界环境相通。因此汗液、尿液、唾液等不 属于体液，属于外界环境。

3、血浆红

一、淋巴细胞转化试验（MTT）

（一）原理：

四甲基偶氯唑盐（MTT）可作为线粒体中琥珀酸脱氢酶的底物。当有活细胞存在时，线粒体内琥珀酸脱氢酶可将淡黄色的MTT还原成紫兰色的甲臢，将结晶的甲臢溶解释放后，可根据所测的OD值反映活细胞的数量和活性，从而推知待测样品的水平。

（二）材料：

MTT、电子天平、PBS液、二甲基亚砜、无菌针头过滤器、细胞计数板、台盼兰、无菌操作台，CO2培养箱，酶标仪，－20℃冰箱。用称取50mg的MTT，溶于10ml后，终浓度为5mg/ml，过滤除菌，无菌EP管分装，－20℃避光保存。丝裂原：PHA、ConA、PWM或其他丝裂原

（三）方法： 1、脾细胞制备：

（1）小鼠颈椎脱臼处死，75%乙醇浸泡3分钟，取出小鼠置于无菌纸上，左腹侧朝上；

（2）在小鼠左腹侧中部剪开小口，撕开皮肤，暴露腹壁，可见红色长条状脾脏；

（3）在脾脏下侧提起腹膜，剪开后上翻，暴露脾脏，用镊子提起脾脏，眼科剪分离脾脏下面的结缔组织，取出脾脏。放入盛有5ml Hanks液的培养皿中；

（4）制备脾细胞悬液

①钢网研磨法：无菌取脾，将脾脏放置不锈钢网（100或200目）上，置于盛有适量无菌Hanks液的小平皿中，用镊子轻轻将脾撕碎，用

项目十八 B淋巴细胞功能检测

一、溶血空斑试验 (Plaque forming cell assay)

【实验原理】

将SRBC免疫动物，隔一定时间取其脾脏制成细胞悬液，当与SRBC混合孵育时，其中抗体形成细胞释放的抗体会与周围SRBC特异性结合，在补体作用下，使这些致敏的SRBC溶解，从而在琼脂凝胶中的每个抗体形成细胞周围形成一个肉眼可见的溶血空斑。测定与补体结合力强的IgM形成细胞采用直接方法；测定与补体结合力弱的IgG或IgA形成细胞采用间接法，即实验中需加入抗免疫动物Ig的抗体(二抗)，才能促进溶血空斑形成。 此处只介绍小鼠琼脂直接溶血空斑技术。 【试剂和器材】

1．小白鼠 体重18~22 g。 2．补体 豚鼠混合新鲜血清。

3．SRBC悬液 用Gey液将SRBC洗3次，分别配成2.5×108个细胞/ml和5×108个细胞/ml浓度的红细胞悬液。 4．Gey液、琼脂糖。

5．注射器、剪刀、镊子、不锈钢网、小平皿、试管、吸管、显微镜、温箱、水浴箱。 【步骤和方法】

1．免疫小鼠 取1ml 2.5×108个细胞/ml 浓度的SRBC悬液注入小鼠腹腔，或取0.2 ml SRBC悬液经小鼠尾静脉注入

Brucella abortus induces apoptosis of human T lymphocytes

流产布鲁氏菌诱导人类T淋巴细胞的凋亡

摘要：免疫逃避是布鲁氏菌在面对CD4+T细胞有效的适应性反应后在其内存活的必

要条件。之前我们已经证明B.abortus可以通过下调MHC-Ⅱ分子的表达及巨噬细胞的抗原呈递间接的抑制CD4 + T细胞。然而，目前还不清楚B.abortus是否能够直接干扰T淋巴细胞。据报道，即使低水平的和非复制型的入侵T淋巴细胞，B.abortus也能诱导人类T淋巴细胞的凋亡。灭活的B.abortus也能产生同样的现象，说明有一个复杂的细菌的结构成分。我们已证明，典型的B.abortus外膜脂蛋白（L-Omp19），而并非他的非脂化形式，能诱导人类T淋巴细胞的凋亡。此外，合成的脂己肽能模拟蛋白的脂质部分的结构也能诱导T淋巴细胞死亡的增加，这表明牵连到现象的结构部件可以是任何B.abortus脂蛋白。B.abortus诱导的T淋巴细胞的凋亡依赖于TNF-α的分泌，因为用抗TNF-α的单克隆抗体预孵育的T淋巴细胞细胞的凋亡被抑制。总体而言，这些结果说明了一种新机制，通过直接抑制T细胞介导的反应B. abortus可

第十二章 T淋巴细胞介导的细胞免疫应答

一、选择题 [A型题]

1. TCR识别抗原的信号传递是通过： A. CD2 B. CD3 C. CD4 D. Igα、Igβ E. CD8

2. 特异性细胞免疫的两种基本形式是由哪些细胞介导的？ A. Th1、Th2、 B. Th 1、Ts C. Th 1、Tc D. Th 2、Tc E. Th 2、Ts

3. 下列哪种细胞因子由Tc分泌并参与Tc的增殖及分化? A. IL-1 B. TNF-β C. IFN-γ D. MCF E. MAF

4.Tc细胞活化时, 第二信号中最重要的一对分子是： A. CD2与LFA-3 B. CD8与MHC-I类分子 C. CD4与MHC-II类分子 D.CD28与B7-1 E.TCR与CD3

5. Th细胞在CTL细胞的活化过程中的作用主要是： A. 协助传递第一信号 B. Th分泌促进增殖、分化的细胞因子 C. Th能促进Tc的TCR表达

D. Th促进Tc表达MHCⅡ类分子 E. Th促进Tc释放穿孔素

6. Tc杀伤靶细胞时下列哪项是正确的？ A. TC无需与靶细胞接触 B. 靶细胞被溶解时,TC同时受损 C. TC具特异性杀伤作用 D穿孔素诱导靶细胞

B淋巴细介导胞特的异免疫性应答液免疫体答应：抗进入原体机后诱 导相应的抗特异原性B细胞化、活增殖并 最终化分为浆胞，产生特异性细体 抗进入液体发挥免，疫效。 应分——抗类：原DTAg-的免应疫答 、ITA-g的免疫应答B细

对胞D抗原T免的疫答 B细应对胞D抗原T的别 识 B胞细活 B细胞的化增殖和终末分

B细化对胞D抗原的识T 别BC识别抗R原对B胞的激细的活两个相关 互的作联用B:CR特异性合结抗原—活—第化一信 号B胞细内并加工BC化R所结的抗原，合形p成MH, C呈提给特异T性识别h,h活化后T通过达的 表DC40与BL胞表面C细D4结合——0活第二信化号1. 2

.

BC对R抗原识的别与CRT别识抗的不原同之处：1.

2.3.BC不R仅能识别蛋质白抗，还能原识别 多、核肽、多糖类、酸类和小脂分子 合物类化原 B抗C能特异R识别完整性抗原天然的 象，构识或别原抗降解所暴露位表空的 间构象 BRC对抗原的别识需APC的不加和工提 呈亦无MH,C制性限

细胞B化活需要号 信 细胞B活化第一信号：抗原(激刺信) a) 号)bBCR-CD97/b信a号 BR共受体的C殖作用增— C—1D9C/21DC/D81

B细活化胞第的信号(共二刺的信激号

慢性淋巴细胞白血病是慢性白血病的一种,由于慢性淋巴细胞白血病起病十分缓慢,往往无自觉症状,因此很多患者并不知道自己已经患上白血病,耽误了最佳治疗时间。因此了解慢性淋巴细胞白血病的早晚期的症状表现表现对于我们及时就医有很大的帮助。专家告知全病程可分早晚期两个阶段：

慢性淋巴细胞白血病的早晚期的症状表现

慢性淋巴细胞白血病是慢性白血病的一种，由于慢性淋巴细胞白血病起病十分缓慢，往往无自觉症状，因此很多患者并不知道自己已经患上白血病，耽误了最佳治疗时间。因此了解慢性淋巴细胞白血病的早晚期的症状表现表现对于我们及时就医有很大的帮助。专家告知全病程可分早晚期两个阶段：

慢性淋巴细胞白血病早期无症状阶段，病人感觉正常，淋巴结和脾脏可不肿大，而血象和骨髓象已呈慢淋表现。此类病人往往在偶然情况下检查血象而发现。

慢性淋巴细胞白血病晚期有症状阶段，病人有疲倦、乏力、消瘦、出汗的症状，且出现淋巴结和肝、脾肿大等。淋巴结肿大是慢淋较常见的体征，疾病进展时，淋巴结可由小逐渐增大，由局部发展到全身各处，最常见的部位是颈部、腋下及腹股沟。小的浅表淋巴结不被病人所注意，仅在体检时发现，大的浅表淋巴结可有核桃、鸡蛋样大小，由于没有痛感，虽然肿大明显，有些病人仍不在意，而并不因此就诊