做离体功能实验的材料

机 能 实 验 学 实 验 报 告

课题名称：传出神经药物对离体肠肌的作用 院 （系）：韶关学院医学院

专业班 级： 2011级临床医学本科班 学生姓名：符宏展 学 号：112 指导教师：梁俊辉

二○一三 年 六 月 五 日

机能实验报告

实验目录：

1 实验目的

2 实验装置和器材

3 实验药物

4 实验动物

5 实验原理

6 实验方法

7 实验注意事项

8 实验结果

实验数据

实验记录波型及静态测量数据

9 实验结果讨论

10 实验结论

11 实验思考

实 验 报 告

实验次序： 九 实验项目：传出神经药物对离体肠肌的作用 班级：11临本 姓名：符宏展 学号：112 实验类型（打√）：（基础□ 综合□ 设计□） 一、实验预习

实验预习报告内容原则上应包含实验目的、实验原理、实验主要仪器、试剂及实验步骤。 实验目的： 掌握：1.消化道平滑肌的一般生理特性及某些因素对它的影响。 2.哺乳动物离体器官灌流法。 实验装置和器材：RM6240生物信号采集与处理系统、离体器官恒温灌流仪、

实验

实验五 离体蛙心灌注

目的

学习离体蛙心灌流的方法；观察内环境理化因素的相对恒定对维持心脏正常节律性活动的重要作用；了解肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经递质对心脏活动的调节意义。

原理

动物的离体心脏，用理化特性类似于其血浆的代体液灌流时，在一定的时间内，仍然保持有节律的舒张活动。改变灌流液的理化特性，这种节律的舒缩活动也随之发生改变，说明内环境理化因素的相对恒定是维持心脏正常节律活动的必要条件。

器材与药品

蛙心陶罐、蛙心夹、常用蛙手术器械、铁架台、双凹夹、滴管、小烧杯、氯化钠溶液（1%NaCl）、氯化钙溶液（2%Ca Cl）、氯化钾溶液（1%KCl）、肾上腺素（1/10000Ad）、乙酰胆碱（1/100000Ach）、任氏液（Ri/lger’s solution新鲜配制）等。

步骤

（1）取一只蟾蜍或蛙，用探针破坏其脑脊髓后仰卧固定于蛙板上，剪开胸前区皮肤，剪去胸骨，暴露心脏。用眼科镊提起心包膜，再用眼科剪在心脏收缩时将其剪破，使心脏完全暴露出来。

（2）识别心脏的各个部分，包括心房、心室、静脉窦等，并观察心跳。

（3）插蛙心插管，制备离体蛙心。先在左右主动脉下方穿一线，并打一松结留作固定插管用。再在左主动脉下穿一线结扎。用手提起结扎线，用眼科剪在左侧主

植物组织培养实验论文

学 院： 农学院

班 级： 生技12-3

学 号： 20126268

学生姓名： 康莎莎

指导老师： 倪苏 刘凡

完成日期： 2014年6月8日

菘蓝叶片的离体培养

学院：农学院 班级：生物技术2012-3 姓名：康莎莎 学号：20126268

指导教师：倪苏 刘凡

摘要：本实验以菘蓝幼嫩叶片为外植体，为研究不同外源激素种类、组合及其不同浓度对菘蓝叶片丛生芽诱导的影响，通过对离体消毒的菘蓝叶片采用四种不同激素配比的培养基进行比较培养。结果表明，在MS培养基的基础上添加6-BA+NAA都能成功诱导出丛生芽；但当添加激素为2,4-D+KT的培养基中，2,4-D对菘蓝叶片的愈伤组织的形成具有 一定的抑制作用,并且对于丛生芽的形成也有较强的抑制作用。但是对于其最强抑制诱导丛生芽和愈伤组织的浓度还有待进一步试验。

关键词：菘蓝叶片；离体培养；激素配比；愈伤组织；芽

菘蓝(Isatis indigotica Fort．)为十字花科(Cruciferae)菘蓝属植物。以根入药，药材名板蓝根[1]。原产中国。主产河北省安国，江苏省如皋、南通[2]。其根(板蓝根)、叶(大青叶)均可

实验三 胡萝卜离体根的培养（理论）

一、污染

◆组织培养中经常遇到的问题 ◆影响试管苗的质量，关系快繁的成败 1、污染的来源及危害 来源：

◆材料表面消毒不彻底

◆无菌操作中外界环境进入培养容器造成 危害：

◆初代培养失败、增殖速度慢、生长速度慢、玻璃化加剧

◆成活率低、病毒和病菌的扩散、培养物的遗传变异 2、污染的种类及其防止 种类： A、细菌性污染

◆培养基某一位置或培养材料周围出现黏液状物或浑

1

浊的水渍状痕，有时呈发酵状泡沫。接种后1 ~ 2天可见。 ◆材料、培养基灭菌不彻底 ◆操作不当 B、真菌性污染 ◆主要是霉菌污染

◆培养基污染部位发霉，接种3 ~ 5d或更长时间可见 ◆颜色有黝黑、白、黄等 原因：

◆周围环境和空气污染造成 ◆接种过程中，操作不慎造成 防止：

◆选择植物材料：品种、部位、大小、时期 ◆严格消毒灭菌 ◆合理安排繁殖程序 ◆规范操作，控制环境条件 二、外植体褐变

2

1、原因

细胞内的酚类化合物经多酚氧化物氧化成褐色的醌类物质和水，醌类物质与酪氨酸酶发生作用使外植体蛋白聚合，导致外植体生长停顿，直至死亡。 2、影响褐变的因素

教学时数 2学时 实验原理 一、 离体实验

1、所用组织：心脏、膀胱、子宫、气管、肺、肠等均可用于离体实验 2、特点：实验条件易于控制、操作简便、结果准确、节省时间，可进行大量

药物的筛选。 3、要求：离体实验需在一定生理环境下进行，模拟体内环境。 （1）温度：38±0.5℃ （2）通氧气：1－2气泡/s

（3）营养液：含有一定离子和葡萄糖的溶液，不同的组织所选用的营养液不同。

二、离体肠管实验

1、肠管的选择：根据实验目的的不同进行选择 （1）小肠：十二指肠、空肠、回肠

（2）自律性：频率较慢，起博点位于十二指肠，自律性自上而下渐弱。 （3）空肠多做定性实验，回肠多做定量实验 2、肠内受体及作用原理

（1）受体：家兔小肠平滑肌上存在α、β、M受体。

（2）作用：α、β受体兴奋可使小肠平滑肌抑制而舒张；M受体兴奋可使小肠

平滑肌兴奋而收缩。 （3）药品对受体的作用：

1、氯化乙酰胆碱（Ach）：M受体激动剂，乙酰胆碱可兴奋M受体，使小肠收缩

幅度增加，蠕动加强。 2、阿托品(Atro)：M受体阻断药，为竞争性拮抗剂，单独用药对肠管无作用，

可阻断M受体，对抗乙酰胆碱的M样作用，使肠管收缩幅度降低。

3、肾上腺素

大学学生实验报告

开课学院及实验室：生科院生化楼603 2015年3月17日 年级、专生技学院 生命科学学院 姓名 学号 业、班 131 实验课程名称 动物生理学实验 实验项目名称 实验二离子及药物对离体蛙心脏活动的影响 成绩 指导 老师 [实验目的]

1．学习离体蛙心灌流的实验方法。

2．观察Na、K、Ca三种离子及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。

[实验原理]

1．心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境，内环境的变化直接影响着心脏的正常活动。本实验在蛙心的灌流液内人为地加入一些物质而改变心脏活动的内环境，观察心脏活动有何变化。

2．心肌细胞的生理特征：

电生理特征：自律性，兴奋性，传导性 机械生理特征：收缩性

[实验对象] 青蛙 [实验器材和药品]

1．器材 生物信号采集系统、张力换能器(10g)、蛙类手术器械1套、蛙心插管、蛙心夹、试管夹、双凹夹、万能支架、滴管、150ml小烧杯4个、任氏液。

2．药品 0. 65％氯化钠、2％氯化钙、1％氯化钾、1：10 000肾上腺素、1：10 000乙酰胆碱等。

[实验步骤]

1 离体蛙心的制备 2．观察项目

(1)记录心脏在

实验数据分析

1. 加入Ach后的小肠运动曲线

图1. 加入Ach后的小肠运动曲线

图2. 洗脱Ach后的小肠运动曲线

由图可知，加入0.01?h后，可见离体肠管活动增强，曲线出现收缩频率变快，幅度增加。主要原因和消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M型乙酰胆碱受体结合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+专用通道。前一类通道对Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach相对不敏感，只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中 Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。

2. 加入CaCl2后的小肠运动曲线

图3. 加入CaCl2后的小肠运动曲线

图4. 洗去CaCl2后的小肠运动曲线

由图可知，加入2êCl2溶液2滴后，离体肠管活动稍有减弱，描记曲线出现收缩幅度略微减弱。可能是因为加入CaCl2后，细胞内Ca2+浓度升高，一直处于较高水平。生成钙调蛋白复合物后激活MLCK，造成肌肉收缩后并没有明显的Ca2+浓度下降，MLCK一直维持活性，横桥与肌动蛋白解离不彻底，肌肉不完全舒张，

实验数据分析

1. 加入Ach后的小肠运动曲线

图1. 加入Ach后的小肠运动曲线

图2. 洗脱Ach后的小肠运动曲线

由图可知，加入0.01?h后，可见离体肠管活动增强，曲线出现收缩频率变快，幅度增加。主要原因和消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是Ca2+的内流有关。乙酰胆碱可与肌膜上的M型乙酰胆碱受体结合，使得两类通道开放：一类为电位敏感性Ca2+专用通道，另一类为特异性受体活化Ca2+专用通道。前一类通道对Ach敏感，小剂量Ach即引起开放；后一类通道对Ach相对不敏感，只有大剂量Ach才会引起开放。这两类通道开放都使得肌浆中 Ca2+增高，进而激活肌纤蛋白—肌凝蛋白—ATP系统，使平滑肌收缩，肌张力增加。

2. 加入CaCl2后的小肠运动曲线

图3. 加入CaCl2后的小肠运动曲线

图4. 洗去CaCl2后的小肠运动曲线

由图可知，加入2êCl2溶液2滴后，离体肠管活动稍有减弱，描记曲线出现收缩幅度略微减弱。可能是因为加入CaCl2后，细胞内Ca2+浓度升高，一直处于较高水平。生成钙调蛋白复合物后激活MLCK，造成肌肉收缩后并没有明显的Ca2+浓度下降，MLCK一直维持活性，横桥与肌动蛋白解离不彻底，肌肉不完全舒张，

（0721）《园艺植物离体培养》网上作业

名词解释

1． 外植体

用于组织培养（离体培养）的植物材料，如根、茎、叶、花药、胚珠等。 2． 离体培养

指从植物体分离符合需要的组织，器官或细胞（包括去壁后的原生质体、离开花药的花粉细胞等）等作为外植体，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养，以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他生物产品的一种技术。 3． 不定芽

在植物离体培养中，由外植体脱分化形成愈伤组织，继而形成一些分生细胞，分化形成一些芽丛，这些芽即是不定芽。 4． 细胞全能性

一个完整的植物细胞拥有形成一个完整植株所必需的全部遗传信息，植物细胞在适宜条件下具有发育成完整植株的潜在能力。 5． 胞质杂种

所谓胞质杂种（Cybrid）是指一个物种的细胞质（不包括核基因组）基因与另一个物种的细胞质和胞核基因融合为一体的体细胞杂种产物。 6． 继代培养

组织培养中，培养物培养一段时间后，为了防止培养的细胞团老化，或培养基养分利用完而造成营养不良及代谢物过多积累毒害等的影响，要及时将其转接到新鲜培养基中进行培养。 7． 胚状体

所谓胚状体（embryoid）：指在组织和细胞培养中产生的在形态结构上与合子胚相类似的结构。对称体细胞胚（Som

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实验五离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观察

【实验目的】

学习一种离体组织器官实验方法;观察离子成分、酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用；分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境改变对它的影响。

【实验原理】

消化道平滑肌具有自动节律性、较大的伸展性，对化学物质、温度及牵张刺激较为敏感等生理特性。

【实验材料】

实验动物：家兔，2.0-2.5kg

实验药品：台式液、0.01%去甲肾上腺素溶液、0.01%乙酰胆碱溶液、0.01%阿托品溶液、1.0%氯化钙溶液、1mol/l盐酸溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。

实验器材：恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、BL-420生物信号系统、丝线等。

【实验步骤】

1.恒温浴槽的准备工作；

2.标本制备；

3.仪器连接与设置；

4.启动计算机，打开BL-420生物信号系统，调节参数，开始记录。

观察项目

1.自动节律性收缩，描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线，观察其节律性

收缩及张力水平。

2.观察胆碱能受体激动剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用。

（1）乙酰胆碱的作用：向浴槽标本管中加入0.01%的乙酰胆碱溶液1~2滴，观察肠