微生物培养基验证规程

孟加拉红培养基

用途:用于食品中霉菌和酵母菌总数的测定。 成分(g/L) 蛋白胨 5.0 葡萄糖 10.0 磷酸二氢钾 1.0 硫酸镁 0.5 琼脂 20.0 孟加拉红 0.033 氯霉素 0.1 用法

称取本品 36.6g,加热溶解于 1000ml 纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌 15 分钟备用。

蒙金娜基础培养基：葡萄糖10g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 3g, KCl 0.3g，FeSO4 7H2O 0.03g，MnSO4 H2O 0.03g，MgSO4 7H2O 0.3g，CaCO3 5g，酵母膏 0.4g，蒸馏水1000ml，pH7.0~7.5。灭菌前分装为10×100ml小瓶，每组1瓶。 1. 无机磷培养基

100ml的蒙金娜基础培养基加入1g磷矿粉（或磷酸钙2g作为无机磷源）和2g琼脂粉，包装，灭菌。 2. 有机磷培养基

100ml的蒙金娜基础培养基加入2g琼脂粉，包装，灭菌。 用酒精擦净新鲜鸡蛋外壳，用解剖刀切破鸡蛋两端，流去蛋清后将蛋黄流

孟加拉红培养基

用途:用于食品中霉菌和酵母菌总数的测定。 成分(g/L) 蛋白胨 5.0 葡萄糖 10.0 磷酸二氢钾 1.0 硫酸镁 0.5 琼脂 20.0 孟加拉红 0.033 氯霉素 0.1 用法

称取本品 36.6g,加热溶解于 1000ml 纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌 15 分钟备用。

蒙金娜基础培养基：葡萄糖10g，(NH4)2SO4 0.5g，NaCl 3g, KCl 0.3g，FeSO4 7H2O 0.03g，MnSO4 H2O 0.03g，MgSO4 7H2O 0.3g，CaCO3 5g，酵母膏 0.4g，蒸馏水1000ml，pH7.0~7.5。灭菌前分装为10×100ml小瓶，每组1瓶。 1. 无机磷培养基

100ml的蒙金娜基础培养基加入1g磷矿粉（或磷酸钙2g作为无机磷源）和2g琼脂粉，包装，灭菌。 2. 有机磷培养基

100ml的蒙金娜基础培养基加入2g琼脂粉，包装，灭菌。 用酒精擦净新鲜鸡蛋外壳，用解剖刀切破鸡蛋两端，流去蛋清后将蛋黄流

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培养基管理规程

1 目的

规范微生物实验室培养基的申购、配制、培养基质量控制、储存、使用、废弃处理等。 2 依据

《药品质量管理规范》、《中国药典》2015年版 四部。 3 范围

适用于微生物实验室检验用的所有培养基。 4 职责

4.1 化验室负责人：监督本规程的实施。 4.2 化验室检验员：按照本规程实施。 5 工具 5.1 定义 培养基 干粉培养基 系指用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配制成的一种混合营养物，用于微生物限度检查、控制菌检查等。 指以干粉形式存在的培养基。 6 内容

6.1 培养基的购买 6.1.1

培养基管理员每月清点干粉培养基的库存量，及时申请购买培养基，以保证实验的

正常进行。 6.1.2

新购进的干粉培养基由培养基管理员验收。验收内容包括：培养基质量检验报告书、

数量，批号、厂家、有效期、包装情况（应包装完整、容器密闭）。若发现包装不完整、不密闭、培养基受潮或物理性状发生了明显改变等应拒绝接收。验收合格后填写《培养基接收记录》，在培养基外部加贴《干粉培养基标签》，填写内容为：名称、接收日期、批号、有效期至、储存条件。

微生物培养基及其成分介绍

培养基通常指人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养物质。广义上说，凡是支持微生物生长和繁殖的介质或材料均可以作为微生物的培养基。培养基的种类繁多，因考虑的角度不同，可将培养基分成以下一些类型：

天然培养基：利用生物组织、器官及其抽取物或制品配成；根据对培养基成分了解的程度

合成培养基：使用成分完全了解的化学药品配制而成；

半合成培养基：由部分天然材料和部分已知的纯化学药品组成

液体培养基：各营养成分按一定比例配制而成的水溶液或液体状态的培养基；

根据培养基物理状态

固体培养基：液体培养基中加入一定量的凝固剂配制而成的固体状态的培养基；

半固体培养基：琼脂加入量为0.2%-0.5%而配制的固体状态的培养基；

种子培养基：适合微生物菌体生长的培养基；

培养基 根据培养的目的

微生物检测培养基及试剂原理

1.细菌与培养有关的生理结构。 1.1

细胞壁（cell wall）

主要成分：肽聚糖

革兰氏阳性菌（G+）:细胞壁有15-50层肽聚糖，厚20-80nm，组成三维立体框架，结构坚固致密。革兰氏染色紫色。

革兰氏阴性菌（G-）:细胞壁有1-2层肽聚糖，厚10-15nm，不能形成三维结构。但在肽聚糖之外，有G-特有的结构-外膜。革兰氏染色红色。

1.2 细胞膜（cell membrance）

细胞膜位于细胞壁内侧，紧包住细胞质，结构为平行的磷脂双分子层，其中镶嵌有多重蛋白质，大多为酶类和载体蛋白。 功能：物质转运 呼吸 分泌 生物合成

胞质周围间隙：G-菌的细胞膜与细胞壁之间的空间。此处聚集了若干种胞外酶，主要是水解酶。

1.3 细胞质（cytoplasm）

细胞质的主要成分是水、蛋白质、核酸、糖、无机盐等。细胞质含有多种酶系统，是细菌合成蛋白质和RNA的场所。细菌的分解代谢和合成代谢都在胞质中进行。

1.4 核蛋白体

核蛋白体是细菌合成蛋白质的场所。链霉素能与细菌核蛋白体的30s亚基结合；红霉素能与50s亚基结合，干扰细菌的蛋白质合成，从而杀灭细菌。

2. 细菌的物理性状

细菌虽小，也有独立的生命活动。能从外界环境

（一）材料与试剂 1．原始菌种采集：

用特制不锈钢内衬有机硅薄膜的箱式釆样器采集小清河五柳闸片区的底泥，根据不同的应用采取不同的保存方法。 2．培养基【4】:

（1）牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌、芽孢杆菌用）：

成分：牛肉膏3g，蛋白胨10g ，NaCl 5g ，琼脂15g ， 蒸馏水1000ml，

pH 7.2

制法：称取蛋白胨和NaCl，加入水中，用玻璃棒挑取牛肉膏置于另一烧杯

中称量，加热融化然后加入上述烧杯中。加入所需琼脂加热融化，定容，最后调节至所需pH。121摄氏度灭菌20分钟。

（2）脑心浸液培养基（1000ml）（北京路桥技术有限责任公司，用于链球菌、

肺炎球菌、脑膜炎球菌及其它对营养苛求菌的培养）

成分：脑心浸液培养基37g （蛋白胨10g， 牛脑浸粉 12.5g， 葡萄糖2g，

牛心浸粉5g，氯化钠 5g， 磷酸氢二钠 2.5g） 琼脂粉20g 最后定容到1000ml, 121℃灭菌20分钟。

（3）硝化细菌培养基（培养硝化细菌）

成分：亚硝酸钠1g 磷酸氢二钾0.75g 磷酸二氢钠0.25g 碳酸钠

1g 硫酸镁0.03g 硫酸锰0.01g 加蒸馏水1000ml,121℃灭菌20分钟。

微生物学---培养基的制作

? 牛肉汤培养基

1. 去掉筋膜及脂肪的新鲜牛肉,切成条、绞碎、按1000g牛肉加入DH2O 2000ml浸泡,

置冰箱过夜.

2. 次晨,将其煮沸半小时,并同时不断用不锈钢饭勺去掉脂肪及油汽（注意:不能用铁勺

以免Fe2+掉入汤中影响细菌生长）,静置15分钟,肉汤分层,将上清液吸出,沉渣过滤. 3. 于上述肉汤中加入蛋白胨10g每1000ml,NaCl 3g 每1000Ml,再煮沸3分钟,用

10mol/L的NaOH调节PH 7.2～7.6（实际应用中应调到处7.7～8.0 每12000ml 加入10mol/L 的NaOH调出浓度即大致为PH约为8 即每400ml加入1mlNaOH） 4. 再按2g每1000ml 加入K2HPO4（对肉汤的PH起缓冲作用）,煮沸150秒,静置30

分钟吸取上清液,沉淀过滤用1mol/L NaOH 滴到PH为8 （以酚红作指示剂）再煮沸静置1～2小时,吸取上清液,以DH2O补至原有体积,再测PH8（因高压会使PH降低）分装、高压灭菌、置室温备用

? 肝化汤

1. 取猪胃数个,洗净绞碎称400g 与绞碎的猪肝400gI混合,再加50摄氏度DH2O

4000ml 浓盐酸40ML置50～5

汉水生群大型活丑动三

20之7-00212六高年考题知点识类汇编分

策：汉划丑水生

织组：汉丑水、生鸿翼飞掌上、的沙、风暖、anhdsoe、足教、一哲m

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()212山东340).(分)【8物—生生物技实术践】辣椒素作为一种生碱物广用泛于食品保、健医药业工等域。辣椒素的领得途获如图。径“汉丑水生的生物行同”超 群级大型公益活动：年高历考题P TP版制 。本 作件课 为益公 作，品 权版所，有不得以何形式任用 商于业的。目202年111月日，5 汉丑水生记标。脱化(分去或分化)(1 )图中和②①分表示别椒组织培辣中养胞的__细_______

和___________ 再化分过程。 琼脂 。( 2)中图培养植外的培养体中基常用凝的固是_剂________培养_基中的长生素细和

培养基验收规程

1 目的

规范培养基验收的过程和项目，以保证实验室所用培养基符合要求。

2 适用范围

适用于本实验室培养基的验收工作。

3 职责

培养基验收员应遵循本规程，按照本规程的要求进行培养基验收。 建立并更新《实验室在用培养基清单》

4 程序

4.1术语和定义

4.1.1培养基批量：是培养基完整的可追溯单位，是指满足产品要求（内部控制）和性能测试，产品型号和质量稳定的一定量的半成品或成品。这些产品在特定的生产周期生产，而且编号相同。

4.1.2商品化脱水合成培养基：使用前需加水和处理的干燥培养基，如：粉末、小颗粒、冻干粉等形式：

——完全培养基；

——不完全培养基，使用的时候需加入添加剂。

4.1.3商品化即用型培养基：以即用形式或融化后即用形式置于容器（例如平皿、试管或其他容器）内供应的液体、固体或半固体培养基： ——完全可即用的培养基； ——需重新融化的培养基；

——使用前需重新融化并分装的培养基；

——使用前需重新融化，添加物质并分装的培养基。

4.2培养基接货验收

培养基的接货验收，由培养基验收员完成。

新购买的商品化脱水合成培养基（通常为脱水的粉状或颗粒装）和商品化即用型培养基，应保

食品接触面微生物验证规程

编 号 编 订 人 编订日期 变更原因 发送部门 质量部、生产车间 ＳＯＰ－质— 许新生 审 核 人 页数 共5页 生效日期 批 准 人 批准日期 2016-05-13 审核日期 目的：检测生产用水、车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，生产区域环境当中病原微生物的监控，达到规定标准，以控制食品成品的质量。

范围：本标准规定了公司生产过程中的微生物控制要求以及验证计划。 本标准适用于公司食品生产过程中对微生物控制的验证活动。

规范性引用文件：下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本均适用于本标准。

GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB 14881 食品企业通用卫生规范 GB 15980 一次性使用医疗用品卫生标准

GB 4789.2 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定 GB 4789.3 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数 G