vc的测定方法及原理

实验一、维生素C的测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)

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一、实验原理

2,6-二氯酚靛酚滴定法用于测定还原型抗坏血酸。抗坏血酸分子中存在烯醇式结构（HO—C═C—OH），因而具有很强的还原性，还原型抗坏血酸能还原2,6-二氯酚靛酚染料。

2,6—二氯酚靛酚染料在酸性溶液中呈红色，在中性或碱性溶液中呈蓝色。因此，当用2,6—二氯酚靛酚染料滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，被还原后红色消失成为无色的衍生物，可作为维生素C含量测定的滴定剂和指示剂。

还原型抗坏血酸还原染料后，本身被氧化为脱氢抗坏血酸。

当抗坏血酸全部被氧化时，滴下的2,6—二氯酚靛酚溶液则呈红色。在测定过程中当溶液从无色转变成微红色时，表示抗坏血酸全部被氧化，此时即为滴定终点。根据滴定消耗染料标准溶液的体积，可以计算出被测定样品中抗坏血酸的含量。

在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准染料液的量、与样品中所含抗坏血酸的量成正比。 反应式如下：

二、实验仪器与试剂

1.仪器 (1)公用仪器 ① 组织捣碎机；水果刀；② 托盘天平；精密天平；称量纸；③ 1000ml烧杯；250ml烧杯；500 ml、1000 ml量筒；④ 20cm镊子；⑤ 蒸馏水，蒸馏水洗瓶；⑥ 记

柑橘果实糖、酸、Vc含量的测定方法

熊庆娥

（四川农业大学）

第一部分 测定程序及计算公式

一、样品制备

样品果至少10个。擦净果皮后，用水果刀在每样果对称部位切取两块。去果皮后，用纱布包好果肉，挤压果汁于干燥烧杯中，总量不少于100ml。样品液混合搅拌均匀后，可供测定可溶性固形物（TSS）、糖、酸、Vc。 二、Vc含量的测定

1. 果汁5ml，用1%草酸稀释，定容至50ml，即稀释10倍。用移液管吸取稀释液5ml至50ml三角瓶，通过半微量滴定管滴入2，6-D，至溶液呈粉红色30秒内不消失止。记录所耗2，6-D（ml）。重复滴定2~3次。

2. Vc含量（mg/100ml）=

V??B?C?100 （1式）

V：2，6-D滴定值（ml） A：每毫升2，6-D相当的Vc量（mg） B：滴定用样品量（ml） C：样品稀释倍数 三、总酸含量的测定

1. 用移液管吸取果汁5ml，转入100ml三角瓶，加酚酞1~2滴，用0.1N NaOH（标定浓度为准）滴至溶液出现粉红色不消失止。记录滴定所耗NaOH量（ml）。重复滴定2~3次。

2. 总酸含量（g/100ml）=

V?N?0.064B?

第八章 设计性实验

实验设计，就是要求学生设计实验方案，选择实验器材，安排实验步骤，进行数据处理及分析实验现象。它包括设计实验方案，设计实验步骤、设计实验改进方法等。实验设计，主要考察学生是否理解实验原理，是否具有灵活运用实验知识的能力，是否具有在不同情境下迁移知识的能力。

学生通过完成设计性实验，可以了解科学研究的思路、方法和步骤，使之具有严肃的科学态度、严密的科学思想和严谨的工作作风，培养学生的创新意识和创新精神，提高学生分析问题和解决问题的能力，提高学生综合素质，能有效地推动学生科研立项活动的开展，为将来从事科学研究打下良好的基础。

一、实验设计的目的

学生应在已掌握生物化学基础知识、基本理论和基本实验技能的基础上，在教师指导下，利用本实验室已有的设备条件和材料试剂等技术基础，自己从网络上获取相关资料，设计出综合性的、探索性的实验，在学生讨论、实验教师点评的基础上，学生修改实验设计方案，并在学生设计方案中选出最适合开展的方案若干个，将学生进行编组完成实验。因此实验中学生参与完成选题、设计实验、实验准备、实施实验和实验论文撰写等全过程。这种“理论-实践-理论-综合实践”的过程能使学生深刻理解生物化学实验技术与原理，能熟练运用已经学习的多种

第八章 设计性实验

实验设计，就是要求学生设计实验方案，选择实验器材，安排实验步骤，进行数据处理及分析实验现象。它包括设计实验方案，设计实验步骤、设计实验改进方法等。实验设计，主要考察学生是否理解实验原理，是否具有灵活运用实验知识的能力，是否具有在不同情境下迁移知识的能力。

学生通过完成设计性实验，可以了解科学研究的思路、方法和步骤，使之具有严肃的科学态度、严密的科学思想和严谨的工作作风，培养学生的创新意识和创新精神，提高学生分析问题和解决问题的能力，提高学生综合素质，能有效地推动学生科研立项活动的开展，为将来从事科学研究打下良好的基础。

一、实验设计的目的

学生应在已掌握生物化学基础知识、基本理论和基本实验技能的基础上，在教师指导下，利用本实验室已有的设备条件和材料试剂等技术基础，自己从网络上获取相关资料，设计出综合性的、探索性的实验，在学生讨论、实验教师点评的基础上，学生修改实验设计方案，并在学生设计方案中选出最适合开展的方案若干个，将学生进行编组完成实验。因此实验中学生参与完成选题、设计实验、实验准备、实施实验和实验论文撰写等全过程。这种“理论-实践-理论-综合实践”的过程能使学生深刻理解生物化学实验技术与原理，能熟练运用已经学习的多种

第八章 设计性实验

实验设计，就是要求学生设计实验方案，选择实验器材，安排实验步骤，进行数据处理及分析实验现象。它包括设计实验方案，设计实验步骤、设计实验改进方法等。实验设计，主要考察学生是否理解实验原理，是否具有灵活运用实验知识的能力，是否具有在不同情境下迁移知识的能力。

学生通过完成设计性实验，可以了解科学研究的思路、方法和步骤，使之具有严肃的科学态度、严密的科学思想和严谨的工作作风，培养学生的创新意识和创新精神，提高学生分析问题和解决问题的能力，提高学生综合素质，能有效地推动学生科研立项活动的开展，为将来从事科学研究打下良好的基础。

一、实验设计的目的

学生应在已掌握生物化学基础知识、基本理论和基本实验技能的基础上，在教师指导下，利用本实验室已有的设备条件和材料试剂等技术基础，自己从网络上获取相关资料，设计出综合性的、探索性的实验，在学生讨论、实验教师点评的基础上，学生修改实验设计方案，并在学生设计方案中选出最适合开展的方案若干个，将学生进行编组完成实验。因此实验中学生参与完成选题、设计实验、实验准备、实施实验和实验论文撰写等全过程。这种“理论-实践-理论-综合实践”的过程能使学生深刻理解生物化学实验技术与原理，能熟练运用已经学习的多种

原理

以没食子酸为主的多酚类化合物在碱性溶液中可将钨钼酸还原成蓝色化合物，该化合物在765nm处有最大吸收，且吸收值与多酚化合物含量成正比，以没食子酸为标准物质，标准曲线法定量。

试剂

（1） 钨酸钠——钼酸钠混合溶液：称取50.0g钨酸钠，12.5g钼酸钠，用350ml水溶解到

1000ml的回流瓶中，加入25ml磷酸及50ml盐酸，充分混匀，小火加热回流两小时，再加入75g硫酸锂、25ml蒸馏水、数滴溴水，然后继续沸腾15min（至溴水完全挥发为止），冷却后，转入500ml容量瓶定容，过滤，至棕色瓶中保存，使用时稀释一倍。

（2） 75g/L碳酸钠溶液：称取37.5g无水碳酸钠溶于250ml温水中，混匀，冷却，稀释至500ml，过滤到储液瓶中备用。

（3） 没食子酸标准储备液：准确称取0.1100g一水合没食子酸，溶解并定容至100ml，此溶液没食子酸质量浓度为1000mg/L,在冰箱中2——3度可保存五天。

（4） 没食子酸标准使用液：分别称取1000mg/L的没食子酸标准储备液0、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml和5.0ml至100ml容量瓶中，定容，溶液质量浓度为0、10.0mg/L、20.0mg/L、30.0mg/L、

蛋白酶酶活测定方法及原理 Protease activity assay method and principle

方法

原理

福林-酚试剂在碱性条件下可被酚类化合物还原呈蓝色钼蓝和钨蓝

福林酚法

混合物，而蛋白质分子中有含酚基的氨基酸如酪氨酸、色氨酸等，可使蛋白质及其水解产物呈上述反应，利用此原理测定蛋白酶酶活。 考马斯亮蓝染料与蛋白质在酸性条件下结合，主要是染料与蛋白质中的碱性氨基酸（特别是精氨酸）和芳香族氨基酸残基相结合，使

考马斯亮蓝法

染料的最大吸收峰的位置由465nm变为595nm，溶液的颜色也由棕黑色变为兰色，在595nm下测定的吸光度值A595，与蛋白质浓度成正比。

甲醛滴定法

蛋白酶催化蛋白质水解成氨基酸，再用甲醛固定氨基酸的氨基，用0.1mol/LNaOH溶液滴定生成的氨基酸，从而测定其酶活。 用5-氨基四唑重氮盐将氨基酸中部分组氨酸和酪氨酸重氮化，得到黄色的重氮5-氨基四唑酪蛋白（DHT-酪蛋白）。以DHT-酪蛋白为

DHT-酪蛋白法

底物，在蛋白酶作用下，水解生成DHT-肽，二价离子可与DHT-蛋白与DHT-肽形成稳定的可溶性红色螯合物，而锌离子可迅速沉淀DHT-酪蛋白，但不沉淀DHT-肽。选用合适浓度的锌离子和镍离子作为沉

VFA的测定方法及标准曲线

VFA的测定方法及标准曲线

VFA测定的方法

指 标

检测方法

分析仪器

检测条件 挥发性脂肪酸VFA，包含乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸 液相色谱法 高效液相色谱仪，HPLC （Agilent 1200, 安捷伦科技有限公司，美国） 流动相：0.05%稀磷酸，流速0.7 mL min-1；

检测器：紫外检测器，波长=210 nm；

分析柱：Shodex RSpak KC-811 有机酸专用分析柱（6 μm, 8× 300 mm） + KC-G 保护住（10 μm, 6× 50 mm），柱温箱恒定55℃；

进 样：自动进样器进样，进样量 20 μL；

定 量：基于峰面积的外标法。

样品处理： 过0.45 μm水相滤膜后转移至棕色自动进样瓶。

注：乙酸、丙酸、异丁酸、正丁酸、异戊酸、正戊酸出峰时间分别为15.15、17.30、19.18、20.64、23.43、28.00min。

实验仪器

高效液相色谱仪（Agilent 1200,）

中华人民共和国国家标准

旋转电机振动测定方法及限值 GB 10068.1-88

振动测定方法代替GB 2807-81

Measurement evaluation and limits of the vibration severity

of rotating

electrical machinery Measurement of mechanical vibration

中华人民共和国机械电子工业部1988-08-31 批准

1989-07-01实施

本标准参照采用下列国际标准：

IEC34—14(1986)《中心高为56mm及以上旋转电机的振动——振动烈度的测量，评定及限值》

ISO2372(1974)《转速从10～200r/s机器的机械振动——评定标准的基础》

ISO2954(1975)《往复式和旋转式机器的机器振动——对测量振动烈度仪器的要求》

ISO3945(1985)《转速从10～200r/s大型旋转式机器的机械振动——在运行地点对振动烈度的测量和评定》

1 主题内容与适用范围

本标准规定了测量电机振动时有关测量仪器精度，试品的安装与测定时的运行状态，测点配置，测量程序及试验报告等要求。

本标准适用于轴中心高为45～630mm、转速为600～3600r/

液压系统的“净化”措施及测定方法

研究表明，工程机械液压系统故障起因至少70%以上是由于液压油的污染造成的。因此，控制液压系统中油液的污染，除了要求系统中具有良好的过滤装置外，重要的是在设备的使用管理上采取防污措施。

1 提高工程机械液压系统清洁度的主要措施 1.1 系统培训工作人员

(1) 对所有与液压有关的工作人员进行培训，使其掌握使用液压油的基本常识，尤其对从事液压污染管理人员必须掌握取样、分析的基本方法和有关滤油器使用等基本知识。

(2) 牢固树立“新油不干净”的意识，更新“污染”的概念。

1.2 把好“购、贮”关

(1) 采购符合技术条件的液压油品，严禁假冒伪劣产品。 (2) 采用密封专用容器置于室内阴凉干燥处，并注意贮存期不能超限。

1.3 注意“注油前后”

(1) 液压油在加注至油箱前必须过滤。

(2) 加油机具(如油泵、耐油胶管、油抽子、漏斗和油箱等)务必要专用，以免混入其他油种或杂质。

(3) 加油时要清理、擦干净油箱盖及加油口附近等处。

(4) 检查油箱滤网是否完好无损，须经滤网加注；加油后及时拧紧油箱盖。

1.4 狠抓机械的使用过程