土壤中微生物的分离与纯化思考题

广东工业大学土壤中微生物的分离与纯化实验报告

微生物学实验报告

实验名称：土壤中微生物的分离与纯化

课程名称 环境微生物学实验

学 院 环境科学与工程学院

专业班级 2011级环境科学（1）班

学 号 3111007364

姓 名 刘迪鸿

联系方式 13824426973

2013年 12 月 10 日

广东工业大学土壤中微生物的分离与纯化实验报告

实验报告 土壤中微生物的分离与纯化

刘迪鸿

（广东工业大学11级环科（1）班）

摘要：各种微生物生长所需条件存在差异，根据需要配制不同的培养基可以得到只含目标菌株的纯培养。

关键词：选择培养基，分离，纯化

一、 实验目的与要求

1. 明确培养基的配制原理，并通过对微生物培养基的配制，掌握配制培养基的一般方法和步骤。

2. 掌握根据需要选取不同的环境以找到目标菌株的基本方法，学习分离纯化微生物的基本操作技术，进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术，掌握微生物培养方法以及接种方法。

二、实验方案

1. 实验原理

培养基是人工的将多种物质按各种微生物生长的需要配制而成的一种混合营养基质，用以培养或分离各种微生物，因此，培养基质应当有微生物所能利用的营养成分（包括碳源，氮源，能源，无机盐

土壤微生物分离纯化及测数

作者：土壤微生物|分离纯化及测数 来源：生物秀 时间：2008-5-28

一、实验目的要求

1 了解土壤微生物的分离纯化及测数的基本原理。 2 学习并掌握微生物分离纯化技术方法。 3 学习并掌握微生物平板菌落计数的技术方法。 二、基本原理

土壤是微生物生活的大本营，其中含有大量不同类型的微生物，可按照一定的方法将各类微生物通过分离进行纯培养，并能对特定类群进行数量测定。基本原理是通过稀释使菌体细胞充分分散，单细胞得以生长发育形成菌落，可使用稀释法或平板划线法进一步纯化，还可通过平板菌落计数，推算单位重量土壤样品含有微生物的数量。 三、实验步骤 （一）土壤样品采集

在待测田块上，若田块面积小于50平方米则按对角线三点采样，若田块面积大于50平方米按对角线五点采样。采样一般定点于耕作层0--20cm，先除去表土1--2cm，以无菌铲采土足量充分混匀后用无菌塑料袋分装。 （二）好气性细菌的分离纯化及测数 1.制备土样稀释液 吹吸三次混匀 无菌操作

另留一管不稀释留作对照（CK）

2.培养基的准备

融化牛肉膏蛋白胨培养基，融化后保温在48℃。并取6个无菌培养皿，分别在皿底贴好标签，注明10-5、10-6、CK（每个稀释

复习思考题

1.什么是微生物？包括哪些主要类群？ .微生物（microorganism）：是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。（<0.1mm）

微米级：光学显微镜下可见（细胞）

小（个体微小）

纳米级：电子显微镜下可见（细胞器，病毒）

单细胞 简（构造简单） 简单多细胞

微生物 非细胞（即“分子生物”）

原核类：细菌（真细菌，古生菌），放线菌，蓝细菌，原

体，立克次氏体，衣原体等

低（进化地位低） 真核类：真菌（酵母菌，霉菌，蕈菌），原生动物，显微

藻类

非细胞类：病毒，亚病毒（类病毒，拟病毒，朊病毒）

2.微生物有哪五大特性？

体积小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应强，易变异；分布广，种类多。 3.微生物的发展经历了几个阶段？各阶段的代表人物为谁？

史前期：各国劳动人民，未见微生物，先利用，如酿酒，发面

《食品微生物学》思考题

第1章 绪论

1、微生物的定义？它包括哪些类群？

答：微生物的定义：是指所有形体微小，具有单细胞或简单的多细胞结构，或没有细胞结构,并需借助显微镜才能观察到的一群微小低等生物的总称。包括属于原核类的细菌（真细菌和古生菌）、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体 、衣原体；属于真菌类的真菌(酵母菌、霉菌)、原生动物和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和亚病毒（类病毒、拟病毒、阮病毒）。

2、简述微生物的特点？

答：1.个体微小、分布广泛2.种类多、食谱杂3. 代谢能力强、繁殖快4.适应性强、易变异5、观察和研究手段特殊

3、试根据微生物的特点，谈谈为什么说微生物既是人类的敌人，更是人类的朋友？

答：①有害方面：

引起疾病：如爱滋病、非典型肺炎、细菌性食物中毒、真菌毒素中毒、大肠杆菌O157H7、皮肤病等。食品腐败、变质。 ②有利方面

生产食品：如酸奶、面包、酒、醋等； 生产药物：如抗生素、激素、干扰素等； 自然界物质循环； 废水、环境治理等。

4、简述微生物发展史上主要时期的特点和代表人物？ 答：（1）远古时期：在食品，农业，医学防治方面都有很好的发展。

（2）微生物学初创

对于期末考试有用

微生物学绪论

一、选择题

1. 大部分微生物（）。

A 是原生动物 B 帮助改善生活质量 C生活在海洋的底层 D发现于外层空间。

2. 适合所有微生物的特殊特征是（）。

A 它们是多细胞的 B 细胞有明显的核C 只有用显微镜才能观察到 D 可进行光合作用

3.人类通过微生物产生的食品有（）。

A 牛奶 B 火腿 C 酸乳酪 D 黄瓜

4. 第一位观察到微生物的科学家是（）。

A Robert Hooke B Louis Pasteur C Joseph Lister D James T. Watson

5. 自然发生说的理论认为（）。

A 微生物来自无生命的物质 B 大动物中发现有系统发育 C人类是从类人猿进化的 D 病毒是从细菌退化的

6. 广泛进行微生物研究的17世纪70年代荷兰商人（）。

A van Goph B van Hoogenstyne C van Dyck D van Leeuwenhoek

7. 路易.巴斯德对微生物的贡献在于他（）。

A 发现了病毒B 提出了自然发生说理论 C抨击了进化论 D 号召人们关注微生物在日常生活中的重要性

8. 阐明微生物是传染病原因的概念称为（）。

A 进化论 B 病原菌学说 C 生物学细胞论 D

钼矿周围土壤中微生物的分离与鉴定

步骤一 钼矿周围土壤的采集与处理

一、采集地点：河南省、洛阳市、栾川县钼矿区土壤。

二、实验器材：无菌牛皮纸袋，无菌铲，长线，标杆，标签，尺子，冰箱。 三、样本采集及处理方法: 1.取样：2012 年3月于洛阳市栾川县钼矿区土地选择2 个不同的地点进行采样，

分别在4个方向选取3点，每个地点在不同位置各取3 个样，直取5~20cm深度的土壤，每点按1m×1m取样，每点取样量一致，将样点土壤混均后取200 g装入无菌牛皮纸袋中封好，带回实验室放入灭菌的袋中或放在4℃冰箱中暂存备用。 采样注意事项：

(1)样品标记：采集的样品放入统一的灭过菌的牛皮纸袋样中，用铅笔填写好标签，袋内外各具一张。

(2)一个混合土样以取土1公斤左右为宜，如果样品数量太多，可用四分法将多余的土壤弃去（方法是将采集的土壤样品放在洁净的塑料布上，弄碎、混匀，铺成四方形，划对角线将土样分成四份，把对角的两份分别合并成一份，保留一份，弃去一份，果所的样品依然很多，可用四分法处理，直至所需数量为止）。

(3)采样深度，对一般土地采样深度5—30cm即可，采样时深度要垂直，上下取土量要一致，每个采样点的取土深度及采样量应均匀一致，土壤上层与下层的

钼矿周围土壤中微生物的分离与鉴定

步骤一 钼矿周围土壤的采集与处理

一、采集地点：河南省、洛阳市、栾川县钼矿区土壤。

二、实验器材：无菌牛皮纸袋，无菌铲，长线，标杆，标签，尺子，冰箱。 三、样本采集及处理方法: 1.取样：2012 年3月于洛阳市栾川县钼矿区土地选择2 个不同的地点进行采样，

分别在4个方向选取3点，每个地点在不同位置各取3 个样，直取5~20cm深度的土壤，每点按1m×1m取样，每点取样量一致，将样点土壤混均后取200 g装入无菌牛皮纸袋中封好，带回实验室放入灭菌的袋中或放在4℃冰箱中暂存备用。 采样注意事项：

(1)样品标记：采集的样品放入统一的灭过菌的牛皮纸袋样中，用铅笔填写好标签，袋内外各具一张。

(2)一个混合土样以取土1公斤左右为宜，如果样品数量太多，可用四分法将多余的土壤弃去（方法是将采集的土壤样品放在洁净的塑料布上，弄碎、混匀，铺成四方形，划对角线将土样分成四份，把对角的两份分别合并成一份，保留一份，弃去一份，果所的样品依然很多，可用四分法处理，直至所需数量为止）。

(3)采样深度，对一般土地采样深度5—30cm即可，采样时深度要垂直，上下取土量要一致，每个采样点的取土深度及采样量应均匀一致，土壤上层与下层的

钼矿周围土壤中微生物的分离与鉴定

步骤一 钼矿周围土壤的采集与处理

一、采集地点：河南省、洛阳市、栾川县钼矿区土壤。

二、实验器材：无菌牛皮纸袋，无菌铲，长线，标杆，标签，尺子，冰箱。 三、样本采集及处理方法: 1.取样：2012 年3月于洛阳市栾川县钼矿区土地选择2 个不同的地点进行采样，

分别在4个方向选取3点，每个地点在不同位置各取3 个样，直取5~20cm深度的土壤，每点按1m×1m取样，每点取样量一致，将样点土壤混均后取200 g装入无菌牛皮纸袋中封好，带回实验室放入灭菌的袋中或放在4℃冰箱中暂存备用。 采样注意事项：

(1)样品标记：采集的样品放入统一的灭过菌的牛皮纸袋样中，用铅笔填写好标签，袋内外各具一张。

(2)一个混合土样以取土1公斤左右为宜，如果样品数量太多，可用四分法将多余的土壤弃去（方法是将采集的土壤样品放在洁净的塑料布上，弄碎、混匀，铺成四方形，划对角线将土样分成四份，把对角的两份分别合并成一份，保留一份，弃去一份，果所的样品依然很多，可用四分法处理，直至所需数量为止）。

(3)采样深度，对一般土地采样深度5—30cm即可，采样时深度要垂直，上下取土量要一致，每个采样点的取土深度及采样量应均匀一致，土壤上层与下层的

微生物分离纯化技术及其应用

摘要：微生物的分离纯化技术是进行微生物学研究的基础。本文介绍了微生物学中常用的传统分离纯化技术并且分析了其所存在的问题，综述了近年来涌现微生物分离纯化的新技术、新方法，并对其今后的发展趋势作了展望。 关键词：微生物；分离；纯化

Abstract: The microbial separation and purification technology is the basis of microbiological studies. The traditional separation and purification technology in microbiology and its problems of existence was described in this paper. The new methods and new technologies of microbial separation and purification emerged in recent years were summarized .Then its development trends in the future was pr

第一章的复习思考题

1，发酵及发酵工程的定义

狭义 “发酵”的定义 在生物化学或生理学上发酵是指微生物在无氧条件下，分解各种有机物质产生能量的一种方式，或者更严格地说，发酵是以有机物作为电子受体的氧化还原产能反应。如葡萄糖在无氧条件下被微生物利用产生酒精并放出二氧化碳。同时获得能量，丙酮酸被还原为乳酸而获得能量等等。

广义 “发酵”的定义 工业上所称的发酵是泛指利用生物细胞制造某些产品或净化环境的过程。它包括厌氧培养的生产过程，如酒精、丙酮丁醇、乳酸等，以及通气（有氧）培养的生产过程，如抗生素、氨基酸、酶制剂等的生产。产品有菌体细胞、酶，细胞代谢产物，生物转化产品等。

Fermentation Engineering应用微生物学等相关的自然科学以及工程学原理，利用微生物等生物细胞进行酶促转化，将原料转化成产品或提供社会性服务的一门科学。

2，发酵工程的特点

发酵和其他化学工业的最大区别在于它是生物体所进行的化学反应。

1，发酵过程一般来说都是在常温常压下进行的生物化学反应，反应安全，要求条件也比较简单。

2，发酵所用的原料简单粗放。通常以淀粉、糖蜜或其他农副产品为主，只要加入少量的有机和无机氮源就可进行反应。微生物因不同的类别可以