qpcr原理及应用

范围和适用性

本实验适用于使用StepOnePlus?实时PCR仪对DNA PE、DNA PE Index、SE文库以及Exon Capture组、转录组、表达谱、Small RNA组、表观遗传组等制备的文库进行上机前的精确定量。

摘 要

荧光定量PCR实验是以Agilent 2100 Bioanalyzer对文库的检测结果为参照, 使用StepOnePlus?实时PCR仪对文库进行定量,得出待测文库浓度，为之后的Cluster制备提供浓度依据。该实验的主要内容包括：（1）梯度稀释标准品；（2）按实验要求稀释样品；（3）配制反应预混液；（4）加样；（5）设置反应程序；（6）运行实验；（7）分析实验结果，计算待测样品浓度。整个流程需要3-4小时。

缩写词和SOP中专业术语的解释

缩写词或术语 基线(Baseline) C t 值 扩增曲线中的水平部分 扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环数。 解释 阈值(Threshold) 高于基线但处于扩增曲线的指数增长区范围之内的荧光水平。 实验材料及方法

1 实验试剂和耗材

1.1试剂

表1-1 实验所需试剂

试剂名称 10× Buffer dNTP(2.5mM) EX

范围和适用性

本实验适用于使用StepOnePlus?实时PCR仪对DNA PE、DNA PE Index、SE文库以及Exon Capture组、转录组、表达谱、Small RNA组、表观遗传组等制备的文库进行上机前的精确定量。

摘 要

荧光定量PCR实验是以Agilent 2100 Bioanalyzer对文库的检测结果为参照, 使用StepOnePlus?实时PCR仪对文库进行定量,得出待测文库浓度，为之后的Cluster制备提供浓度依据。该实验的主要内容包括：（1）梯度稀释标准品；（2）按实验要求稀释样品；（3）配制反应预混液；（4）加样；（5）设置反应程序；（6）运行实验；（7）分析实验结果，计算待测样品浓度。整个流程需要3-4小时。

缩写词和SOP中专业术语的解释

缩写词或术语 基线(Baseline) C t 值 扩增曲线中的水平部分 扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环数。 解释 阈值(Threshold) 高于基线但处于扩增曲线的指数增长区范围之内的荧光水平。 实验材料及方法

1 实验试剂和耗材

1.1试剂

表1-1 实验所需试剂

试剂名称 10× Buffer dNTP(2.5mM) EX

QPCR中常见的问题

Q：ROX是什么，有什么作用？

A：ROX是一种荧光染料，作为参比信号校正。试剂中必须包含固定浓度的ROX，这样由于反应总体积的差异、所在孔的位置不同、试管壁的厚度差异、管盖透光性能的差异等所引起的荧光信号波动都能够被扣除，使数据真正反映PCR进程。ROX校正能够极大地改进定量的精确度，提高重复管之间的数据重现性。

Q：荧光通道的选择？

A：定量PCR实验必须使用ROX校正荧光，占去一种荧光。

TaqMan探针的淬灭基团(TAMRA)也要占用一种荧光，对于4色检测的仪器来说，只剩下2种荧光可以标记探针，对于5色检测的仪器还有3种荧光可以使用。如果将探针改用TaqMan MGB探针，由于它的淬灭基团是不发荧光的，比之TaqMan探针就可以多1种荧光用于标记探针。如果实验要求不高，不做ROX校正（AB公司不推荐这样做），还可以再多一种荧光用于标记探针。

研究应用本身的要求。如果研究SNP和基因突变，因为绝大多数人类基因是2态的，只存在两种等位基因，2条探针已经足够。如果研究基因表达，通常是两两比较居多，比如处理比未处理，正常比异常等，加上一个内对照，3色也就足够了。

Q：内标法和外标法哪种数据更精密？

A：是同样

IGMP Snooping

原理及应用

目 录

第1章 IGMP ....................................................................................................................................... 1 1.1 多播组地址 .................................................................................................................................. 1 1.2 IP多播映射到以太网多播 ......................................................................................................... 2 1.3 IGMP协议 .........................................................................

《微机原理及应用》综合复习资料

一、填空题

1、 对于十六进制表示的数码26.8H，转换为十进制数时为： ；该数码用压缩BCD码表

示时数据为： 。

2、 设机器字长为8位，最高位是符号位。则十进制数–14所对应的原码为： 。 3、 可编程接口芯片8255A的I/O口可以通过编程的方式来设定其工作方式，其中B口工作

方式有 种。

4、 设AX=2000H，BX=2002H，则在执行了指令CMP AX，BX后，标志位CF为 ，AX= 。 5、 若AL＝10011000B，BL＝01100111B，则执行指令“ADD AL，BL”后，AL ＝ ；执行指

令“AND AL，BL”后，AL ＝ 。

6、 设DS=24E0H，SS=2410H，ES=2510H，DI=0206H，则指令“MOV AX，[DI+100H]”源操作数

的物理地址为 。

7、 要组成容量为8KB的存储器，需要 片1K×8位的静态RAM芯片串联。 8、 十六进制数2B.4H转换为十进制数为 。

9、 8086/8088 CPU从功能上分为 和指令执行部件EU两部分。 10、 11、 12、 13、 14、 1

一．填空题（本题总分12分，每空1分）

1．累加器A分为三个部分，分别为 ； ； 。 1．AG,AH,AL

2．TMS320VC5402型DSP的内部采用 条 位的多总线结构。 2．8,16

3．TMS320VC5402型DSP采用 总线结构对程序存储器和数据存储器进行控制。 3．哈佛

4．TMS329VC5402型DSP有 个辅助工作寄存器。 4．8个

5．DSP处理器TMS320VC5402中DARAM的容量是 字。 5．16K字

6．TI公司的DSP处理器TMS320VC5402PGE100有___________个定时器。 6．2

7．在链接器命令文件中，PAGE １通常指________存储空间。 7．数据

8．C54x的中断系统的中断源分为____ ___中断和____ ____中断。 8．硬件、软件

1．TI公司DSP处理器的软件开发环境是__________________。 1．答：CCS(Code Composer Studio)

2．DSP处理器TM

1． 微型计算机由哪些部件组成？各部件的主要功能是什么？ 微机系统 微型计算机 系统软件 外围设备：打印机、键盘、CRT、磁盘控制器等 微处理器 （CPU） 系统总线：AB、CB、DB （功能：为CPU和其他部件之间提供数据、地址 和控制信息的传输通道） 存储器：只读存储器（ROM）、随机存储器（RAM） （功能：用来存储信息） 输入/输出（I/O）接口：串/并行接口等 （功能：使外部设备和微型机相连） 算术逻辑部件(ALU） 累加器、寄存器 控制器 操作系统（OS） 系统实用程序：汇编、编译、编辑、调试程序等 （注：CPU的功能－－①可以进行算术和逻辑运算； ②可保存少量数据； ③能对指令进行译码并执行规定的动作； ④能和存储器、外设交换数据； ⑤提供整修系统所需要的定时和控制； ⑥可以响应其他部件发来的中断请示。） 2． 8086/8088 CPU 由哪两部分组成？它们的主要功能各是什么？是如何协调工作的？ 微处理器（CPU） 总线接口部件(BIU）：负责与存储器、I/O端口传送数据 执行部件（EU）：负责指令的执行 协调工作过程： 总线接口部件和执行部件

GPS测量原理及应用 实习报告

专 业：12级测绘工程专业 班 级：1220502 姓 名：方 明 学 号：201220050208 指导教师：吴良才

目录

一、前言.............................................................................................................3 1.1 实习目的.................................................................................................3 1.2 实习内容.................................................................................................3 1.3 实习分组情况.................................

SIP协议原理及应用

SS_012030_C SIP协议原理及应用

课程目标：

掌握SIP协议的定义、特点和SIP系统的构成

掌握SIP协议的消息结构典型的消息流程

掌握SIP-I协议的原理及应用

了解SIP协议和其它协议如：SIP-T，SIP-I，BICC，H.323之间的区别和联系

参考资料：

RFC3261

SIP协议原理及应用

SIP协议原理及应用

目 录

第1章 SIP的基本概念 ................................................................................................................ 1

1.1 SIP的提出和发起 ............................................................................................................... 1

1.1.1 SIP的引入 .............................................................................

科技信息

计算机与网络

ＧＰＳ原理及应用简介

桂林航天工业高等专科学校电子工程系

陈磊

粱强

［摘要］本文简述了全球定位系统（ＧＰＳ）的基本结构和测量原理，总结了ＧＰＳ用于工程测量所具有的特点，并对

ＧＰＳ在工程测量中的应用前景进行了分析。

［关键词】ＧＰＳ定位系统卫星导航工程测量

全球定位系统（ＧＰＳ）是英文ＧｌｏｂａｌＰｏｓｉｔｉｏｎｉｎｇＳｙｓｔｅｍ的字头缩写词的简称。它的含义是利用导航卫星进行测时和测距以构成全球定位系统。它是由美国国防部主导开发的一套具有在海、陆、空进行全方位实时三维导航与定位能力的新一代卫星导航定位系统。ＧＰＳ是以卫星为基础的无线电卫星导航定位系统，它具有全能性、全球性、全天候、连续性和实时性的精密三维导航与定位功能，而且具有良好的抗干扰性和保密性。因此，ＧＰＳ技术率先在大地测量、工程测量、航空摄影测量、海洋测量、城市测量等测绘领域得到了应用，并在军事、交通、通信、资源、管理等领域展开了研究并得到广泛应用。

ｌＣＰＳ工作原理

ＧＰＳ设备（ＧｌｏｂａｌＰｏｓｉｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍ）即全球定位系统，用于接收并解析太空中数个卫星回传电波中的轨道信息及时刻信息，来计算出ＧＰＳ接收器所在位置的经度、纬度、水平高度及移动速度。ＧＰＳ设备基本配备通常