酵母表面展示技术

枯草芽胞杆菌( Bacillus subtilis) 是一种典型的好氧型的革兰氏阳性细菌，也是研究的最早且最深入的一种芽胞杆菌。其中枯草芽胞杆菌 168是最早发现的可作为转化的芽胞杆菌菌株，随后对其遗传转化和表达系统做了深入的研究。1997年，日本和欧洲的几个实验室联合完成了枯草芽胞杆菌168 基因组的测序［1］。枯草芽胞杆菌有两个生长时期: 孢子休眠期和生殖生长期。在营养缺乏等胁迫的环境下，枯草芽胞杆菌进入休眠期形成具有抗逆作用的芽胞，在营养充足的环境下，芽胞又会进入生殖时期，即芽胞萌发重新生长成为枯草芽胞杆菌。芽胞抗逆性非常强，在高温和酸碱等极端环境下亦能生存，由于其独特的生理特性，使之成为新型的蛋白质或酶类药物表达载体而倍受关注。由于枯草芽胞杆菌是一种非致病性的益生菌，因此其可以作为一种生物安全的展示外源蛋白的宿主。目前利用该菌株已成功表达了破伤风毒素［2 ～4］、不耐热肠毒素［4］、乙醛酸脱氢

芽孢杆菌属和梭菌属在受到外界应力时如营养缺乏情况下自身母细胞会形成一种休眠体即芽孢,它可以抵御外界环境因素的攻击。年前发现炭疽芽孢杆菌的芽孢即使将其置于沸水中蒸煮一断时间后,它仍能存活下来,这一有趣的现象吸引了科学家们开始探究芽孢的耐热和抵御其

枯草芽胞杆菌( Bacillus subtilis) 是一种典型的好氧型的革兰氏阳性细菌，也是研究的最早且最深入的一种芽胞杆菌。其中枯草芽胞杆菌 168是最早发现的可作为转化的芽胞杆菌菌株，随后对其遗传转化和表达系统做了深入的研究。1997年，日本和欧洲的几个实验室联合完成了枯草芽胞杆菌168 基因组的测序［1］。枯草芽胞杆菌有两个生长时期: 孢子休眠期和生殖生长期。在营养缺乏等胁迫的环境下，枯草芽胞杆菌进入休眠期形成具有抗逆作用的芽胞，在营养充足的环境下，芽胞又会进入生殖时期，即芽胞萌发重新生长成为枯草芽胞杆菌。芽胞抗逆性非常强，在高温和酸碱等极端环境下亦能生存，由于其独特的生理特性，使之成为新型的蛋白质或酶类药物表达载体而倍受关注。由于枯草芽胞杆菌是一种非致病性的益生菌，因此其可以作为一种生物安全的展示外源蛋白的宿主。目前利用该菌株已成功表达了破伤风毒素［2 ～4］、不耐热肠毒素［4］、乙醛酸脱氢

芽孢杆菌属和梭菌属在受到外界应力时如营养缺乏情况下自身母细胞会形成一种休眠体即芽孢,它可以抵御外界环境因素的攻击。年前发现炭疽芽孢杆菌的芽孢即使将其置于沸水中蒸煮一断时间后,它仍能存活下来,这一有趣的现象吸引了科学家们开始探究芽孢的耐热和抵御其

机电设备维修论文

机电设备维修课程

技术论文

论文题目： 工件表面强化技术

系 别 专业年级

学生姓名 学号 日 期 2014年 4月 机电设备维修论文

目录

一、引言 ……………………………………………………………………………1 二、表面强化技术…………………………………………………………………1 三、表面形变强化 …………………………………………………………………1

（一）喷丸强化 ………………………………………………………………2 （二）滚压强化………………………………………………………………2 四、表面热处理强化………………………………………………………………2 五、表面渗碳强化 …………………………………………………………………3 （一）常见渗碳方法 ………………………………………………………………3 （二）渗碳的化学反应 ……………………………………………………………4 （三）渗碳过程 ……………………………………………………………………4 （四）渗碳过程相关的重要参量 …………………………………………………4 六、

无铅组装的表面处理技术_2009年7月30日PCB007 [时间：2009-07-31 14:50:46] [点击：164] [分类：技术信息]

? 作者 Dow Electronic Materials ? 发布 07/28/2009

? 特约专栏作家 , Dow Electronic Materials 引言：

电子零件和印刷电路板之间结合需要焊点强度高、焊锡质量可靠，才能保证良好的连接性。自从组装产业转向无铅焊料合金应用以来，对用于电路板焊垫表面处理（镀层类型和厚度）后焊点的可靠性及关于锡膏和锡球的焊料合金组成，一直有着大量的研究正在进行中。这些研究透过广泛的可靠性试验，包括锡球推力/锡球剪切力测试、剪切速率影响和失效模式分析、挠曲试验、掉落冲击试验和冷热循环试验等方法，对焊点性能进行了深度的探索。界面合金共化物（IMC）的形成和焊点电迁移受回流焊条件、热老化和电流密度影响的研究也在一些学术单位有所进展。所有这些研究的目的都是为了配合不同工业应用条件下，如何提高焊点可靠度的要求。

大约在2006年中，无铅组装开始在亚洲广泛推广，但却遭遇了严重的组装良率大幅下降并造成巨额的经济损失。在这段过渡期，几乎所有的组装公司都同时面

机电设备维修论文

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技术论文

论文题目： 工件表面强化技术

系 别 专业年级

学生姓名 学号 日 期 2014年 4月 机电设备维修论文

目录

一、引言 ……………………………………………………………………………1 二、表面强化技术…………………………………………………………………1 三、表面形变强化 …………………………………………………………………1

（一）喷丸强化 ………………………………………………………………2 （二）滚压强化………………………………………………………………2 四、表面热处理强化………………………………………………………………2 五、表面渗碳强化 …………………………………………………………………3 （一）常见渗碳方法 ………………………………………………………………3 （二）渗碳的化学反应 ……………………………………………………………4 （三）渗碳过程 ……………………………………………………………………4 （四）渗碳过程相关的重要参量 …………………………………………………4 六、

酵母菌小专题复习

本专题主要考点：

1. 酵母菌的结构和生理等相关知识； 2. 与酵母菌有关的实验（探究酵母菌细胞呼吸类型（c）、探究酵母菌种群数量变化（c）、果酒的制作（b）、酵母细胞固定化（b））

一、酵母菌的结构和生理

1. 结构：单细胞真菌，有染色体和质粒，有液泡， 细胞壁的主要成分是葡聚糖。

2. 代谢类型：异养型，兼性厌氧型

3. 生殖方式：无性生殖为主，恶劣条件下可有性生殖。

【训练1】判断下列有关酵母菌的叙述是否正确：

1. 酵母菌主要分布在土壤中，在光学显微镜下可以观察到。 （ ） 2. 可以用纤维素酶处理酵母菌，获得原生质体。 （ ） 3. 青霉素可以抑制酵母菌的生长。 （ ） 4. 将目的基因导入酵母菌时，可以用感受态法，使其细胞壁的通透性增强。（ ） 5. 酵母菌与植物细胞的区别是植物细胞有液泡。 （ ） 6. 人的糖蛋白相关基因可以在酵母细胞中表达。

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Q/JXISO000035-2010

代替Q/JXISO000035-2008

表面处理技术标准

2010-11-12发布 2010-11-15实施 绍兴九喜卫浴有限公司 发 布

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目 录

前言 .................................................................................. Ⅱ 1 范围 ................................................................................. 1 2 定义 .......................................

毕赤酵母是甲醇营养型，甲醇代谢的第一步是：醇氧化酶利用氧分子将甲醇氧化为甲醛和过氧化氢。为避免过氧化氢的毒性，甲醛代谢主要在过氧化物酶体里进行，使得有毒的副产物远离细胞其余组分。由于醇氧化酶与O2 的结合率较低，因而毕赤酵母代偿性地产生大量的酶。而调控产生醇氧化物酶的启动子也正是驱动外源基因在毕赤酵母中表达的启动子。

毕赤酵母含有两种醇氧化物酶，AOX1 AOX2。细胞中大多数的醇氧化酶是AOX1 基因产物。甲醇可紧密调节、诱导 AOX1 基因的高水平表达，为Mut+菌株，可占可溶性蛋白的 30%以上。AOX2 基因与 AOX1 基因有 97%的同源性，但在甲醇中带 AOX2 基因的菌株比带 AOX1 基因菌株慢得多，通过这种甲醇利用缓慢表型可分离 Muts 菌株。

毕赤酵母表达外源蛋白：分泌型和胞内表达。利用含有α因子序列的分泌型载体即可。

翻译后修饰：酿酒酵母与毕赤酵母大多数为 N-连接糖基化高甘露糖型，毕赤酵母中蛋白转录后所增加的寡糖链长度（平均每个支链 8-14 个甘露糖残基）比酿酒酵母中的（50-150 个甘露糖残基）短得多。

菌株：GS115 （ Mut+， Muts）和 KM71（Muts） 分泌型载体: pPICZα A,B,

酵母双杂交相关实验方法

一、 酵母总DNA的提取方法（蜗牛酶法） 1、 酵母质粒提取试剂

Buffer I 0.9 mol/L Sorbitol 0.1mol/L EDTA Buffer II 50mM/L Tris 20mM/L EDTA Buffer III 10mM/L Tris 1Mm/L EDTA 2、 操作步骤：

(1) 收集新鲜菌体重加入150μl buffer I，25μl 蜗牛酶（30mg/ml）。. (2) 37℃水浴1h。

(3) 10000rpm离心10min，去上清，沉淀中加入250μl buffer II。 (4) 加入25μl 10% SDS，65℃ 水浴30min，每间隔5min中震荡一次。 (5) 加入25μl 5mol/L 醋酸钾，冰浴60min。 (6) 4℃12000rpm离心15min，取上清。

(7) 在上清中加入2-3倍体积的无水乙醇，混匀静置于-20℃，1小时以上。 (8) 取出，4℃12000rpm离心15min ，弃上清。

(9) 加入150μl

２０１０年第１７期

Ｏ企业论坛Ｏ科技信息

表面处理技术及其发展趋势

李道宏

（巢湖铸造厂有限责任公司安徽巢湖２３８０００）

【摘要】随着基础工业及高新技术产品的发展，对优质、高效表面改性及涂层技术的需求向纵深延伸，国内外在该领域与相关学科相互促进的局势下，在诸如“热化学表面改性”、“高能等离子体表面涂层”、“金刚石薄膜涂层技术”以及“表面改性与涂层工艺模拟和性能预测”等方面都有着突破的进展。

【关键词】表面处理；气相沉积；涂层技术

０引言

新型表面功能覆层技术。包括低温化学表面涂层技术及超深层表面改性技术。它运用物理、化学或物理化学等技术手段来改变“材料及其制件表面成份和组织结构”，其特点是保持基体材料固有的特征，又赋予表面化所要求的各种性能，从而适应各种技术和服役环境对材料的特殊要求。因而它是制造和材料学科最为活跃的技术领域．又是涉及表面处理与涂层技术的交叉学科。其最大的优势在于能以极少的材料和能源消耗制备出基体材料难以甚至无法获得的性能优异的表面薄层。从而获得最大的经济效益，它是一种优质高效的表面改性与涂层技术。

１

得突破性进展．美国、瑞典等国已推出金刚石金属切削工具供应市场。而我国该技术还没有达到实用水平．急待开发并实现产业化。

表面改性与涂层工艺模拟和性