生物化学实验考试重点

名词解释

蛋白质的二级结构：指蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构，也就是该段肽链主链骨架原子的相对空间位置，并不涉及氨基酸残基侧链的构象。 蛋白质的四级结构：蛋白质分子中各个亚基的空间排布及亚基接触部位的布局和相互作用称为蛋白质的四级结构。 结构域：结构域是生物大分子中具有特异结构和独立功能的区域，分子量较大的蛋白质常可折叠成多哥结构较为紧密的区域，并各行其功能，称为结构域。 蛋白质变性：在某些物理或化学因素作用下蛋白质的特定空间构象被破坏，从有序变为无序，从而导致其理化性质改变和生物活性丧失，称为蛋白质的变性。

核酸的一级结构：指构成核酸的核苷酸或脱氧核苷酸的排列顺序，即核苷酸序列。

DNA变性：在某些理化因素（温度，PH，离子强度等）作用下，DNA双链互补碱基对之间的氢键发生断裂，事双链解离为单链，这种现象称为DNA变性。 核酸的分子杂交：在DNA的复性过程中，不同种类的DNA或RNA单链存在一定的碱基配对关系，从而可以形成杂化双链，两条单链可以分别来自DNA或RNA，这样的现象称为核酸的分子杂交。

hnRNA：即核内不均一RNA，是真核生物基因转录过程中产生的mRNA初级产物，具有不稳定，大小不一，分子量大的特点。 酶的活性中心：指酶

第三章 蛋白质化学

1. 氮是蛋白质的特征元素

2. 蛋白质的结构单位——氨基酸结构式

3. 芳香族R基氨基酸、带正电荷R基氨基酸、带负电荷R基氨基酸（定义、所

包含的氨基酸的种类、习惯名称和符号）

4. 两性解离与 紫外线吸收特征（定义）等电点定义 5. 谷胱甘肽（巯基 抗氧化剂 定义）

6. 蛋白质的一、二、三级结构（定义 化学键 常见的结构及特点 维持稳定的

因素） 7. 结构域 （定义） 8. 变构效应（定义）

9. 呈色反应包含哪些，有什么作用 10. 蛋白质是胶体溶液其主要的稳定因素 11. 变性 复性（定义 机理）

12. 沉降与沉降系数（定义 机理） 13. 蛋白质复性的定义

14. 蛋白质沉淀的机理、方法、条件、特点（四种方法分别阐述） 15. 电泳（定义） 16. 层析技术定义 17. 透析（定义 作用） 18. 肽键的定义

19. 能辨别寡肽和多肽链 20. 肽链的书写顺序

第四章 核酸化学

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.

DNA 与RNA核苷酸的区别 核酸的种类、功能、分布

核苷酸是核酸的结构单位和水解产物 核苷酸的组成

核苷酸的连接方式 功能、衍生物 核苷酸与核苷酸的连接方式

基因与基因组的概念：基因：是决

生物化学实验指导 实验一 蛋白质性质实验

【实验目的】

加深对蛋白质胶体分子稳定因素的认识，了解蛋白质的沉淀反应、变性作用的原理及其相互关系。 【实验原理】

1.蛋白质的沉淀反应

蛋白质分子由于形成水化层和双电层而成为稳定的胶体颗粒。但是，蛋白质胶体颗粒的稳定性是有条件的、相对的。在一定的物理化学因素影响下，蛋白质颗粒失去电荷、脱水，甚至变性而丧失稳定因素，即以固态形式从溶液中析出，这种作用称为蛋白质的沉淀反应。该反应可分为以下两种类型：

（1）可逆沉淀反应

在发生沉淀反应时，蛋白质虽已沉淀析出，但其分子内部结构并未发生显著变化，基本

上保持原有的性质。沉淀因素除去后，蛋白质沉淀可再溶于原来的溶剂中。这种沉淀

反应

为可逆沉淀反应。属于此类反应的有盐析作用；在低温下，乙醇或丙酮对蛋白质的短时间作

用以及等电点沉淀等。

用大量中性盐使蛋白质从溶液中析出的过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲水胶体，在高浓度的中性盐影响下，蛋白质分子被盐脱去水化层，同时，蛋白质分子所带的电荷被中和，蛋白质的胶体稳定性遭到破坏而沉淀析出。沉淀出的蛋白质仍保持其天然蛋白质的性质，若减低盐的浓度时，还能溶解。

（2）不可逆的沉淀反应

在发生沉淀反应时，蛋白质的分子内部结

生物化学实验指导 实验一 蛋白质性质实验

【实验目的】

加深对蛋白质胶体分子稳定因素的认识，了解蛋白质的沉淀反应、变性作用的原理及其相互关系。 【实验原理】

1.蛋白质的沉淀反应

蛋白质分子由于形成水化层和双电层而成为稳定的胶体颗粒。但是，蛋白质胶体颗粒的稳定性是有条件的、相对的。在一定的物理化学因素影响下，蛋白质颗粒失去电荷、脱水，甚至变性而丧失稳定因素，即以固态形式从溶液中析出，这种作用称为蛋白质的沉淀反应。该反应可分为以下两种类型：

（1）可逆沉淀反应

在发生沉淀反应时，蛋白质虽已沉淀析出，但其分子内部结构并未发生显著变化，基本

上保持原有的性质。沉淀因素除去后，蛋白质沉淀可再溶于原来的溶剂中。这种沉淀

反应

为可逆沉淀反应。属于此类反应的有盐析作用；在低温下，乙醇或丙酮对蛋白质的短时间作

用以及等电点沉淀等。

用大量中性盐使蛋白质从溶液中析出的过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲水胶体，在高浓度的中性盐影响下，蛋白质分子被盐脱去水化层，同时，蛋白质分子所带的电荷被中和，蛋白质的胶体稳定性遭到破坏而沉淀析出。沉淀出的蛋白质仍保持其天然蛋白质的性质，若减低盐的浓度时，还能溶解。

（2）不可逆的沉淀反应

在发生沉淀反应时，蛋白质的分子内部结

生物化学复习重点

第一章 蛋白质化学

名词解释

氨基酸的等电点 肽键 结构域 四级结构 蛋白质等电点 蛋白质变性作用 蛋白质的复性 二．思考题

1. 氨基酸的分类

2. 常见氨基酸种类、英文简写、一般结构特点 3. 蛋白质二级结构种类及特点

4. 维持蛋白质二级结构及三级结构的作用力 5. 蛋白质的紫外吸收特点

第二章 核酸的化学

一．名词解释

DNA双螺旋结构 减色效应 增色效应 Tm DNA变性 复性 退火 二．思考题

1．嘧啶、嘌呤核苷所形成的糖苷键是怎样相连的？假尿嘧啶核苷与尿嘧啶核苷的区别？ 2．核酸的种类及分布，核酸的组成

3．DNA的二级结构是怎样的？其稳定因素是什么？ 4．DNA双螺旋结构的多态性是怎样的？ 5． RNA的种类及作用？

6．原核与真核细胞的mRNA在结构上的差异（一级结构）？7．tRNA二级结构有那些特点？其作用如何？三级结构？

第三章 酶学

一．名词解释

酶 全酶 多酶体系（多酶复合体） 活性中心 必需基团 Km 别构酶 酶活力 比活力 二 思考题

1． 酶作用的专一性可分为哪几类？

2． 酶的化学本质是什么？近年来对酶的化学本质

生物化学实验讲义

实验一 蛋白质的颜色反应与沉淀反应

蛋白质分子中的某种或某些基团与显色剂作用，可产生特定的颜色反应。不同蛋白质所含的氨基酸不完全相同，颜色反应亦可不同。颜色反应不是蛋白质的专一反应，一些非蛋白物质亦可产生相同的颜色反应，因此不能仅根据颜色反应的结果决定被测物质是否是蛋白质。颜色反应是一些常用的蛋白物质的定量测定的依据。

多数蛋白质是亲水胶体，当其稳定因素被破坏或与某些试剂结合成不溶解的盐后，即产生沉淀。

实验材料与仪器

鸡（或鸭）蛋白

吸管0.5 ml（×1）、1ml（×3）、2 ml（×2）、5ml（×2） 滴管

试管1.5×15cm（×10） 水浴锅 电炉

吸滤瓶500ml（1） 布氏漏斗

试剂

1. 卵清蛋白液：将鸡（或鸭）蛋白用蒸馏水稀释20～40倍，2～3层纱布过滤，滤液冷藏备用。 2. 1%苯酚溶液：苯酚1ml，加蒸馏水稀释至100ml。

3. 1%白明胶液：1g白明胶溶于少量热水，完全溶解后稀释至100ml。

4. 米伦（Millon）试剂：40g汞溶于60ml浓硝酸（比重1.42），水浴加温助溶，溶解后加二倍体积蒸馏水，混匀，静置澄清，取上清液备用。此试剂可长期保存。

5. 0.5%茚三酮溶液：0.5g茚三

生物化学复 习

第一章 蛋白质的结构与功能一、蛋白质的分子组成 1.氨基酸 L-α氨基酸的结构特征和分类、组 成体内蛋白质的20种氨基酸的中、英文名称 及缩写符号，氨基酸的两性解离、等电点、 紫外吸收(280nm)等理化性质。 2.肽 肽链与肽键，重要的生物活性多肽。 谷胱甘肽的组成、生理功能

二、蛋白质的分子结构 1.一级结构：多肽链中氨基酸的排列顺序。 2.二级结构：肽链局部的空间排布、肽单元、 α-螺旋、β-折叠、β-转角、无规卷曲、模体、锌 指结构、分子伴侣。 3.三级结构：整条肽链的三维空间排布、次级 键、结构域。 4.四级结构：亚基之间的三维空间排布。

三、蛋白质的结构与功能的关系 1.蛋白质的一级结构与功能的关系 一级 结构对空间结构和蛋白质功能的决定性、 一级结构与物种进化、一级结构变异与分 子病。 2.蛋白质的空间结构与功能的关系 肌红 蛋白与血红蛋白的结构特征，血红蛋白与 氧结合的正协同效应理论，变构效应。

四、蛋白质的理化性质及其分离纯化 两性解离 等电点 溶液中蛋白质胶粒稳定的因素 蛋白质的变性 变性与沉淀的关系 紫外吸收(280nm) 蛋白质含氮量计算

第二章 核酸的结构

第一章 蛋白质的结构与功能

一、名词解释

肽键 ：一个氨基酸的a--羧基与另一个氨基酸的a--氨基脱水缩合所形成的结合键，称为肽键。 等电点：蛋白质分子净电荷为零时溶液的pH值称为该蛋白质的等电点。 蛋白质的一级结构：是指多肽链中氨基酸的排列顺序。

三、填空题

1，组成体内蛋白质的氨基酸有20种，根据氨基酸侧链（R）的结构和理化性质可分为①非极性侧链氨基酸；②极性中性侧链氨基酸：；③碱性氨基酸：赖氨酸、精氨酸、组氨酸；④酸性氨基酸：天冬氨酸、谷氨酸。 3，紫外吸收法（280 nm）定量测定蛋白质时其主要依据是因为大多数可溶性蛋白质分子含有 色氨酸， 苯丙氨酸，或 酪氨酸。 5，蛋白质结构中主键称为 肽键，次级键有氢键、离子键、疏水作用键、 范德华力、二硫键 等，次级键中属于共价键的有 范德华力、二硫键

第二章 核酸的结构与功能

一、名词解释

DNA的一级结构：核酸分子中核苷酸从5’-末端到3’-末端的排列顺序即碱基排列顺序称为核酸的一级结构。

DNA双螺旋结构：两条反向平行DNA链通过碱基互补配对的原则所形成的右手双螺旋结构称为DNA的二级机构。

三、填空题

1，核酸可分为 DNA 和 RNA 两大类，前者主要存在于真核细胞的 细胞核

生物化学重点整理

绪论

名词解释：

1、生物化学：研究生物体内化学分子与化学反应的基础生命科学，从分子水平探讨生命现象的本质。主要研究生物体分子结构与功能、物质代谢与调节以及遗传信息传递的分子基础与调控规律等。 大题：

1、（1）简述生物化学的发展阶段及其成就

答：1．叙述生物化学阶段。主要成就：脂类、糖类及氨基酸的性质的研究；发

现了核酸；从血液中分离了血红蛋白；证实了连接相邻氨基酸的肤键的形成；化学合成了简单的多肤；发现酵母发酵可产生醇并产生CO2，酵母发酵过程中存在“可溶性催化剂”，奠定了酶学的基础等。

2．动态生物化学阶段。主要成就：发现人类必需氨基酸、必需脂肪酸及多种维生素；发现多种激素，并将其分离、合成；认识到酶的化学本质是蛋白质，酶晶体制备获得成功；对生物体内主要物质的代谢途径基本确定，包括糖代谢途径的酶促反应过程、脂肪酸-β氧化、尿素合成途径及柠檬酸循环等。提出ATP循环学说。

3．分子生物学阶段。主要成就：DNA双螺旋结构的发现；DNA克隆技术；基因组学及其他组学的研究。

2、（2）简述生物化学研究的主要方面

1．生物分子的结构与功能

2．物质代谢及其调节：1、物质代谢有序性调节的分子机制。2、细胞信息传递的机制及网络。 3．

§§§蛋白质的化学

1. 用紫外吸收法测定溶液中蛋白质含量时，波长是多少？用此波长的依据是什么？

? 色氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸在280nm附近有最大吸收，多数蛋白含有这tyr， trp残基。所以在紫外分光中用280nm对它们进行检测。

2. 氨基酸有哪些成色反应？哪些是肽，蛋白质共有的？各有什么用途？ ? 氨基酸的成色反应有茚三酮反应，丹磺酰氯，FDNB成色反应。 蛋白质的成色反应有：双缩脲反应，。其中，FDNB又叫sanger试剂， 可以与氨基酸的α-NH2形成又颜色的衍生物，并可在蛋白质水溶液中保持稳定。这几种试剂币茚三酮更具有优点。AA的R基团可保留于产物中，各种AA的R基团的不同可以用来检测蛋白质中各种氨基酸(蛋白质定性，定量分析)。

此外，含有酪氨酸，色氨酸，精氨酸，组氨酸 这四种AA的肽也有相同的反应。 酪氨酸： millon反应， 酚试剂反应， 黄色蛋白反应； 色氨酸： 乙醛酸反应， ehrlich蛋白反应； 精氨酸： 坂口反应； 组氨酸： poly反应。

3. 什么是蛋白质的一级，二级，三级，四级结构？他们分别依靠什么样的键合力建立起这样的结构？

? 一级结构(肽键)：各种氨基酸在多肽链上按一定顺序的排列成为~