rna提取为什么要加液氮研磨

液氮研磨组织提取RNA步骤

一、试剂与耗材（RNA提取专用，无RNase）

75%的酒精（用无酶水配制），RNase Zap， Trizol(Invitrogen)，氯仿，异丙醇，无RNA酶水（Ambion）；研钵，研杵，1.5ml EP管，2.0ml EP管，15ml 管，50ml 管，棉纱布。 二、操作步骤

1) 用75%酒精对实验操作台、移液枪、枪头盒、管架进行消毒，然后再用RNase Zap擦拭上述材料。

2) 取出-80℃冰箱保存的组织块，放于用液氮预冷过的研钵中，敲碎一小块组织，其余放回冻存管。

3) 加入液氮，先轻轻敲碎组织到最小块，再研磨成粉末，直到看不到组织块。

4) 加入液氮使粉末凝聚成团，马上用药勺把粉末转移到2.0ml EP管中。

5) 待液氮挥发干后，加入1ml Trizol裂解液，用1ml移液器将细胞吹散开，保证细胞裂解充分，必要时可借助水平振荡器混匀。 6) 4℃离心机12000rpm离心5分钟,弃沉淀。注：此时可放入-80℃低温冰箱长期保存。

7) 加入氯仿，比例200ul氯仿/ml Trizol，颠倒混匀，室温放置15分钟。

8) 于4℃离心机12000g离心15分钟。取上清液（上层为水相，中间层为蛋白，下层

第一章 为什么要拜拜？ 为什么要拜拜？

理由很简单，有灾可以消灾解厄，无事还可保平安、发大财，外加发挥孝道怀念祖先，这么好的事，为什么不拜？警察破案要拜拜，电影开拍要拜拜，工地破土要拜拜，过年过节要拜拜，婚丧喜庆要拜拜，祭袓扫墓也要拜拜；对中国人而言，拜拜已经跨越了宗教信仰的范畴，成为文化的一部份。不管信不信教，信什么教，拜拜总能使人心安。透过拜拜，中国人得以和袓先、神、鬼和谐相处，这是一种互惠的沟通方式，人们按时的祭拜仪式，提醒着衪们别忽略对人的庛护，其真实性呢？无论科学印证的结果如何，正所「心诚则灵」， 拜拜的效果犹如「潜能开发」， 可以唤起人心深处的强大能量，并呼应瀚未知的大自然，而形成某种坚定的气势。

拜拜是属于道教的仪式，而道教乃是唯一由中国人创立的宗教。道教的学术思源自于公元前四、五千年的三皇五帝以至黄帝时期，再历经公元前两千二、三百年的尧、舜、禹三代；到了公元前一千七、八百年的商汤至西周间则是儒、道不分家。直至春秋战国时期，约当公元前七百余年，道教与道家学术思想才开始分野。魏晋南北朝时，因为佛教的输入中国，促使中国人自觉该建立自己的宗教，终于在唐代开国时，正式宣布道教为李唐时代的国教。

道教之所以在唐朝能与佛教分庭抗礼，同

为什么要大声读书

早、午、晚读时，有人大声诵读、有人小声读、有人在默读。千恣百态，效果各异。现择名人巨匠、成功人士对大声读书的心得教育后生，望领悟实施。 如下是大声读书的好处：

1、可以提高专注的程度。大声读书也有提高专注程度的作用，如果您觉得读书一直无法专心，请你读出声来，一会儿你就会更专心了！

2、可以排除杂念。其实我们在读书的时候常常是散心杂念的，如果你可以学会大声读书的方法，那么不专心的问题大约可以解决一大半，如果每天都确实地做到，我相信不用多久，你的进步可以很明显地看出来。 3、可以提振精神。大声读书可读到全身发热，那么就有达到提振精神的效果了。 4、结合口到和心到。只是用嘴巴读，有时会像“小和尚念经”一样，有口无心。不过大声读书就不同了，您想不用心都不行，因为您的精神力、专注力都提升了，自然心口都会合一，而达到口到与心到结合的目的。

5、大声读书，倾听自己的声音，能给自己带来自信，获得充实和满足感。 6、一夜好睡，早上头脑清静，思路清晰，记忆效率高，大声读书有利于理解和记忆知识；

7、大声读书，眼、耳、手、口、脑各种记忆器官的综合运用，有利于良好学习习惯的形成和智力的开发；

8、早上大声读书，调动了口腔、鼻腔、喉咙、肺部、胸腔

篇一：SEO知识教程

SEO知识

第一节

一、了解SEO，什么是SEO？

SEO定义：是指在了解搜索引擎自然排名机制的基础上，对网站进行内部及外部的调整优化，从而改进网站在搜索引擎中的关键词排名，获得更多的流量，从而达成网站销售及品牌建设的目的。

值得注意的是：在搜索引擎中搜索出的结果页面，以“推广”结尾的属于百度推广，是百度的广告，而SEO需要做的是以“百度快照”结尾的。

二、为什么要学习SEO？

1、给别人做SEO：

①为别人或企业提供SEO服务的优势：入门快、成本低、市场大

②目前SEO人才紧缺，企业很难招聘到合适的SEO人员，学会SEO找份好工作。

对于有志于SEO服务的站长建议： （1）清楚定位 （2）考虑SEO的细分市场

（3）高价 （4）流程化

2、给自己做SEO：

出路：自己做电子商务网站。通过SEO技术让自己的网站以低成本获得廉价流量从而产生价值，为自己盈利。

三、了解网站的三大标签

三大标签：

标题标签：

描述标签：

关键词标签：

意义：

1、使得搜索引擎后爬行时抓去到这些内容，了解本网页的主要内容。

2、搜索引擎也是通过看标题和描述知道这个网页在讲什么，相关性如何，权威性如何，该在什么词语上给它合适的排名。3、

写好关键字和描述，就是定位了你网站的方向。

四、了解

为什么要保护海洋

海洋覆盖了地球71%的面积，是大陆淡水径流的主要来源。广阔的水面，巨大的水体和永不停息的海流调节了全球的气温和降水。海洋每年为人类提供30亿吨的鱼，仅藻类产品就比世界目前小麦总产量多20倍，海洋所能提供食品的能力是陆地的1000倍。海底石油可采储量约3000亿吨是世界石油总储量的40%。海底锰（měng）结核可供人类使用上万年。海水中还含有铀、氢的同位素等多种核原料、大量无机盐类等资源。海洋还蕴藏着巨大的潮汐能，据估计约有10亿多千瓦。如果把波浪能和海流能也计算进去，就更可观了。

无节制的污染、掠夺性的开发，必然严重破坏人类共有的海洋环境。保护海洋就是保护人类共同的环境，就是保护人类的未来，这已成为人们的共识。 为什么要建立海洋自然保护区

海洋是生命的摇篮。至今那里还生活着20多万种生物。据统计，动物界有32个门类，其中23个生活在海洋里。但是，随着科学技术的发展，海洋开发利用的范围不断扩大，给海洋自然环境和自然资源带来一些不利的影响，甚至造成严重破坏。最明显的是，一些海域鱼类资源量急剧减少，某些海洋珍稀动植物濒临灭绝，这不能不引起人们的高度重视。

建立海洋自然保护区，可以保留一部分不受人类干扰的海域自然

篇一：动物为什么要冬眠

丰富多彩的科学

动物为什么要冬眠？天气渐渐变冷了，很多动物都要冬眠。我有时在想：为什么我们不能和动物一样去冬眠呢？妈妈提醒我说：“你还是先把动物冬眠的原因找到后，再想想我们人类能不能冬眠吧！”是啊，我去找找资料，长长见识吧！

原来，人类属于哺乳类，是高级动物，能通过各种方式躲过冬天的寒冷，所以人不需要冬眠的。动物冬眠是个有趣的现象。它们为什么要冬眠？又是怎样冬眠的？哪些动物不会冬眠？

虽然科学家至今未能完全揭开动物冬眠的奥秘，但是他们通过不断探索，已经认识到研究动物的冬眠不仅妙趣横生，而且颇有价值。

鼻子是动物的呼吸器官，当然它还有闻气味的功能，但不是所有的动物都有鼻子。鲸类中的齿鲸除胚胎期外，完全没有嗅觉器官，须鲸的嗅觉器官也严重退化。鲸类的喷气孔移到头顶上，虽然呼吸方便了，但通往嗅觉器官的神经通路受到破坏，所以嗅觉不发达。此外，灵长类动物的嗅觉也较为退化。

相反，食肉动物以及啮齿类、反刍类动物的嗅觉却比较灵敏。实际上，这些类群中有许多动物完全是夜间活动的，因此它们善于利用嗅觉器官也是可以理解的。有些物种的嗅黏膜甚至扩大至鼻腔外，嗅觉极为灵敏。

水是一种神奇的物质。水对人类来说并不陌生，我们每天洗衣、做饭都离不开它。生物体的一切生

篇一：离职证明一定要吗

离职证明一定要吗法律没有签合同必须有离职证明的规定。但是，你的这种情况，在于你已经在毕业之前签署了就业的协议，这一来，你也就与相关单位确立了合同关系。如果没有解除前面的协议，就与新的公司发生劳动合同关系对新公司的不妥的。公司可能被起诉，对你的前程也不利。

不一定要的。主要是怕新的单位要，他们需要证明你在以前那单位上过班\并且已经交接完毕，防止你工作没交清而影响他的工作

新单位要离职证明的目的是确定你是否与其他单位存在劳动关系。

依据是：劳动法第99条“用人单位招用尚未解除劳动合同的劳动者，对原单位造成经济损失的，该用人单位应当依法承担连带赔偿责任。”

看来你的新单位做得还比较正规。

你与原单位没有签合同与开离职证明关系不大，简单的作法是：你自己起草一份离职证明之类的拿回原单位盖章、签字即可。不需要很正规的，只要证明你已经与原单位没有劳动关系即可。

2

离职证明

_______先生/女士/小姐，自____年__月__日至____年__月__日在我公司担任________(部门)的_______职务，由于_________原因提出辞职，与公司解除劳动关系。以资证明! 公司名称(加盖公章)

劳动关系解除/终止确认书

甲方：(单位名称)

乙方： 身份

篇一：有哪些动物会冬眠

有哪些动物会冬眠？动物冬眠为什么不会饿死？ 冬眠的动物一览：

1、睡鼠是冬眠动物中有名的瞌睡虫，一睡就是六个月。这时，它的呼吸变得非常微弱，身体变得硬硬的，外界的任何声响，甚至碰撞触动，它还是照睡不醒。

2、白熊的冬眠最有意思，它们一家只有雌熊才冬眠。一到冬天，雌熊就把自己埋在雪中，一直睡到来年春天才苏醒过来。醒时，已在梦中生下了小熊仔。白熊在冬眠期间，偶尔醒过来舔一舔自己脚掌，算吃过东西了。

3、刺猬在冬眠的时候，可以连续236天不进食。这是因为它在冬眠时，就陈代谢减弱，体温接近零度，几乎不呼吸。就是把它扔进水里，过半小时再捞起来，也不会淹死。

4、蝙蝠一到冬天，就躲到岩洞和树洞里去睡觉了。它用爪子钩住物体，飞膜囊住身躯，倒挂着头，一动也不动。这时，心脏跳动每分钟从400多次减少到5~6次。

5、蜗牛的“避寒所”选择得更为稳妥，它除了钻进深洞外，还把自己的介壳口封闭起来，只留一个小孔，用来吸呼，自己藏在壳内睡上一冬。

6、有些鱼类也要冬眠。鲤鱼常常在河水底部过冬，几十尾到成百尾群集在水底的洼处围成一圈，头和头密密地紧挨在一起，呼吸迟钝，鳃盖活动得非常缓慢，体温可下降到1摄氏度，直到春天才“复苏”散去。丁（鱼咸）鱼冬眠时比鲤鱼睡得更

　　《老子》中说：上善若水，水善利万物而不争。

　　一滴水，可方可圆，泽润万物；一个人，能方能圆，方圆相济，便可活的豁达、圆满。

　　"方圆"之说源于我国古代的钱币，外部是圆形，内部是方孔，看似朴实无华，但蕴含着人生哲理。

　　做人也应当像这铜钱一般，能圆能方，虽未能熠熠生辉，但也有存在的意义。

　　01

　　做事要方

　　方不是执拗，方是一种坚毅，一种正直，更是一种做人的根本，亦是做人的气节和原则。

　　就像脚下的刹车，红灯时适可而止；绿灯时一路前行，别犹豫彷徨。

　　曾有个拦路抢劫的少年，潜逃到外地隐姓埋名四年。然而，他还是被抓获，不是因为躲避不及，而是一起见义勇为的壮举让他暴露了。

　　在那个寒冷的早春，他跳下冰冷的湖里接连救起了两个落水的儿童。

　　他的义举也暴露了自己，自然就被捕了。

　　记者问他，当时是怎么想的，想没想过那样做会暴露自己？还是想这是一次立功赎罪的机会？

　　他摇摇头说，当时什么也没想，只想到赶快去救人。

　　虽曾拦路抢劫，但心中有温度，做事自有底线。

　　人在世间，又有谁能尽善尽美，心中有尺，行事有度，一辈子问心无愧，如此便好。

　　02

　　做人要圆

　　圆不是圆滑，圆是一种周全、一种宽厚、一种通融，更是一种大智若愚的人生智慧。

　　苏轼在 63

为什么要提高创新能力，建设创新型国家？

第一， 提高自主创新能力，建设创新型国家，是全面建设小康社会的迫切需要。

第二，提高自主创新能力，建设创新型国家，是转变经济增长方式，实现科学发展的必然要求。要实现经济增长方式从要素增长向创新增长的转变，实现科学发展，只能依靠科技创新，提升整个国家的自主创新能力。

第三，提高自主创新能力，建设创新型国家是提高国际竞争力的重要举措。

第一，培养创新型人才，这是建设创新型国家的关键。我们必须着重加强三个层次创新型人才队伍建设：一是加强专业技术人才队伍建设，加快培养创新型科技人才，特别是以中青年为主体的创新型领军人才；二是加强党政人才和企业经营管理人才队伍建设；三是加强高技能人才和农村实用人才队伍建设。有了这样一支规模可观、结构合理的创新型人才队伍，建设创新型国家就有了保证。

第二， 建立健全鼓励自主创新、优化创新环境的体制机制，这是建设创新型国家的重要条件。

一要加快科技体制改革，特别是要加快国家创新体系建设。要加强政府的主导作用，加强市场对资源配置的基础性作用，加强企业作为技术创新主体的作用，还要加强国家科研机构在整个国家创新体系当中的骨干和排头兵作用，加强大学的基础和生力军作用。二要加大知识产权保护力度