药敏试验论文

摘要:药敏试验能够快速的确定病原菌以及药物敏感结果，加强耐药监测，减少用药的盲目性，合理使用抗生素有效控制感染，避免耐药菌的产生，提升治愈率。临床微生物实验室应选择先进、方便的方法进行常规的抗菌药物敏感实验。

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药敏试验能够快速的确定病原菌以及药物敏感结果，加强耐药监测，减少用药的盲目性，合理使用抗生素有效控制感染，避免耐药菌的产生，提升治愈率。临床微生物实验室应选择先进、方便的方法进行常规的抗菌药物敏感实验。

一、国内常用常用的四种方法:

第一种纸片扩散法

原理:将含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，在纸片周围抑菌浓度范围内测定菌的生长被抑制，从而形成无菌生长K的透明圈即抑菌圈。其大小反映测试菌对测定药物的敏感性，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度呈负相关。

优点:药敏试验具有重复性好、操作简便、试验成本相对较低、结果直观、容易判读、便于基层开展等。

缺点:其虽是一一种传统、经典的药敏试验方法，但随着全自动微生物分析仪的推广和应用，K-B 纸片扩散法出现药敏试验假耐药、受人为因素影响较大、试验耗时长的缺点也渐渐体现出来，同时快速性、准确性方面存在不足[1]。

应用:应用于兼性厌氧

大肠杆菌的分离以及药敏试验（悠然）

摘 要：山东某集团送检的疑似大肠杆菌病的病死鸡的心、肝、脾，进行病原菌的分离、鉴定和药敏试验。结果显示引起该鸡场鸡只发病的病原为大肠杆菌，对阿米卡星、新霉素敏感，对头孢和新霉素的复方制剂中度敏感，几乎对可克林霉素不敏感。表明该鸡场出现了耐药的致病性大肠杆菌，在以后的肉鸡生产中应慎用抗生素，在使用药物治疗大肠杆菌病时，应根据药敏试验结果，选择敏感药物，且应注意交替用药，按疗程投药。 关键词：大肠杆菌；分离鉴定；致病性；药敏试验

大肠杆菌病是由大肠杆菌某些血清型菌株引起的一类疾病的总称。各个品种和日龄的鸡均可发病，但肉仔鸡最易感。随着养禽业的迅速发展与高度集约化饲养，鸡大肠杆菌病已成为鸡群重要的疾病之一。为了控制鸡大肠杆菌在鸡群中的传播，我们对送检的疑似大肠杆菌病例进行病原的分离鉴定，并对分离菌的培养特性、致病力及抗菌药物的敏感性进行了研究，为有效防制鸡大肠杆菌病提供了依据。 1 材料与方法 1.1 病料来源

2006年11月山东省某集团养殖场场送检的疑似大肠杆菌病的病料若干，已死亡鸡只死亡时间不超过24 h。 1.2 细菌分离培养

无菌采集病、死鸡的肝脏、心血等组织，接种在普通琼脂平板及普通肉汤，37℃培

从山东某繁育猪场送检的疑似病例中分离到4株革兰氏阴性细小杆菌,通过培养特性试验和生化试验初步诊断为副猪嗜血杆菌,根据副猪嗜血杆菌16SrRNA序列设计引物,进行PCR鉴定,结果表明4株分离菌株为副猪嗜血杆菌。对4株分离菌株进行小白鼠毒力试验和药敏试验,结果表明,4株分离菌能致死小白鼠,对头孢他啶、头孢噻呋、氧氟沙星、多西环素、环丙沙星敏感,对土霉素、链霉素、林可

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山东畜牧兽医

2O年第 2卷 O8 9

副猪嗜血杆菌的分离鉴定和药敏试验研究宋风香①②闰振贵①姜世金 (山东农业大学动物科技学院泰安① 2 11②德州市畜牧局 ) 70 8 摘要从山东某繁育猪场送检的疑似病例中分离到 4株革兰氏阴性细小杆菌，通过培养特性试验和生化试验初步诊断为副猪嗜血杆菌，根据副猪嗜血杆菌 1SrNA序列设计引物，进行 P R鉴定，结果 6 R C表明 4株分离菌株为副猪嗜血杆菌。对 4株分离菌株进行小白鼠毒力试验和药敏试验，结果表明，4株分离菌能致死小白鼠，对头孢他啶、头孢噻呋、氧氟沙星、多西环素、环丙沙星敏感，对土霉素、链霉素、林可霉素抵抗。 关键词副猪嗜血杆菌分离鉴定药敏试验 中图分类号：￥ 5 .8 882文献

细菌分离培养方法及操作步骤

无菌取血液或脏器、淋巴结划线接种于鲜血琼脂平板或血清琼脂平面培养基、普通肉汤培养基，37℃恒温培养24 h，观察其生长特性。目前细菌分离培养的常用方法有平板划线分离法、加热分离法和实验动物分离法。

平板划线接种法

这是目前临床上最常用的分离接种方法。它可以从被检病料中通过划线可使细菌分离、分散生长而形成单个菌落（有利于从含有多种细菌的标本中分离出目的菌），以便挑选可疑菌落作纯培养加以鉴定。具体操作：

1、右手持接种环，在酒精灯上火焰灭菌；

图1 病料采集 图2 接种环灭菌

2、待接种环冷却后，挑取被检料少许，左手持琼脂平板，以食

指为支点，用拇指和无名指将平皿揭开一空隙。大约20℃时，迅速地将接种环轻轻地涂布在培养基的边缘。

3、在涂布处来回移动作曲线形划线接种。（注意：划线时，以腕力使接种环在琼脂平板表面划动，尽量不要划破培养基，划的线条要密，但不能重复旧线，以免培养物形成菌苔。）

图3 平板划线接种法

4、划线完毕，合上平皿盖，将琼脂平板倒置，放入37℃温箱内培养18－24小时。

注意：分离培养用的平板培养基应表面干燥，可于临用前置37℃孵育箱内30分钟，这样表面即干

药敏纸片的制备及药敏试验方法抗菌药物对预防或治疗动物疾病发挥了巨大的作用，但随着抗菌药物在兽医临床的广泛使用，尤其为了防治疾病，常常以亚剂量水平的药物添加于饲料中，以致长期使用后病原微生物产生了耐药性，使本来对治疗病原微生物感染有效的抗菌药物失去作用，给兽医临床上有效地预防和治疗疾病的发生带来一定的困难。通过制作自家药敏纸片进行试验,可快速进行药物的筛选,获得对病原微生物敏感的药物, 对指导临床合理用药，提高治疗效果，节约养殖过程的用药费用，有着重要的意义。

一. 药敏纸片的制备

1.材料

抗菌药物、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、冰醋酸、新华1号定性滤纸、50mL容量瓶、无菌过滤器或一次性过滤器等

2．方法

PBS的配制

A.制备L储备液

LNa2HPO4 ： +1000 mL蒸馏水

或 +1000 mL蒸馏水

L NaH2PO4 : +1000 mL蒸馏水

或 +1000 mL蒸馏水

B.将两种储备液按下表比例，配制成不同pH值的PBS,室温保存备用

L磷酸缓冲液的配制

抗菌药物原液的配制和保存期限

抗菌药物配制溶剂和保存期限

抗菌药物溶剂浓度（ g/mL）－20℃4℃

青霉素 PBS 1280 3个月1周

半合成青霉素类 PBS 1280 3个月1周

头孢菌素类 PBS 1280

击实试验过程中注意事项分析

作者: 罗士然

摘要 在工程建设中，为了提高填土的强度，增加土的密实度，降低其透水性和压缩性，常将填土夯实。夯实土样是最简单易行的土质改良方法，土样经夯实后，土体变得密实又坚硬，对工程很有利，所以工程上利用干密度作为夯实的质量检验指标。室内击实试验就是模拟工程现场的夯实原理，利用标准化的击实仪和操作规程，对土料施加一定的冲击荷载使之压实,从而确定所需的最大定干密度和最优含水率，作为选择填土密度、夯实次数等主要依据。在击实试验的过程中，影响土的最优含水率和最大干密度因素较多，通过对这些影响因素的分析，提高土的击实效果，达到击实试验的目的。 关键词 击实试验 最大干密度 最优含水率

在工程建设中，经常遇到填土压实的问题，例如修筑道路、堤坝、飞机厂、运动场、挡土墙、埋设管道、建筑物地基的回填等。为了提高填土的强度，增加土的密实度，降低其透水性和压缩性，通常用分层压实的办法来处理地基，通过对土的最优含水率和最大干密度的研究来提高土的击实效果。土的最优含水率和最大干密度可用室内击实试验来测得，室内击实试验采用击实仪法，是用锤击实土，使土密度增大，测定土样在一定压实功能作用下达到最大密度时的含水率(最优含水率)和

本科毕业论文（设计）

题 目

山东省单县鸡大肠杆菌病病原的分离-与鉴定及药敏试验

系 部 动物医学系 专 业 动物医学 年 级 2007级 学 号 222007602033167 姓 名 王亚 指 导 教 师 唐建华（副教授） 成 绩

2011年5月23日

目 录

任 务 书.............................................................................................................1 文献综述............................................................................

[目的]探讨暹罗斗鱼的发病原因和病害防治方法。[方法]对暹罗斗鱼的病原菌进行分离,并通过生理生化指标测定和16S rD-NA测序对其鉴定,同时进行药敏试验。[结果]菌株DY001为暹罗斗鱼嗜水气单胞菌病的病原菌。经鉴定,确定菌株DY001为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。该病原菌对暹罗斗鱼的半致死量(LD50)为0.04×10^6CFU/g。药敏试验结果表明,病原菌对阿奇霉素、奥复星、氟

安徽农业科学，ora o A h i .S i 0 2 4 (2: 18 Junl f n u A c. 1,0 2 ) 129—12 2 2 19

责任编辑

陈玉敏

责任校对

卢瑶

暹罗斗鱼致病性嗜水气单胞菌的分离 定及药敏试验鉴杨宁，海，魏贫，连 (海省亚南科技研院海三 5o;海大海学，黄 张希，:巫火 1南三市繁学术究，南亚 702南学洋院海 . 20.南海口 50 2 3海南省三亚市节能监察中心， 7 2 8;.海南三亚 5 2 0 ) 7 0 0

摘要[目的]探讨暹罗斗鱼的发病原因和病害防治方法。[方法]对暹罗斗鱼的病原菌进行分离，并通过生理生化指标测定和 1Sr— 6 D N A测序对其鉴定，同时进行药敏试验。[结果]菌株

微量肉汤稀释法药敏检测

以下实验方法主要适用于需氧菌及部分兼性厌氧菌（以大肠杆菌为例），微需养菌和厌氧菌的培养条件亟待摸索。本实验方法，虽然操作较为繁琐，但是能够确切的得到细菌临床分离株对某种抗菌药物的MIC值，以此作为临床用药指导的部分依据。 菌悬液的制备：

① 菌液培养：取待测菌保存液10μL加入1mLMH肉汤（可根据实际需要做调整），置37℃温箱过夜静止培养12小时左右；

② OD600值测定：利用紫外分光光度仪测定OD值，MH肉汤调整菌液浓度使其OD600值落在0.08-0.1之间，此时菌液浓度约10cfu/mL（大约需将培养菌液稀释7-10倍左右）； ③ 上样菌液稀释：将待测菌液在步骤②所得稀释倍数的基础上再稀释1000倍，此时菌液浓度约10cfu/mL（即7000-10,000倍），此时的菌液即为上样菌悬液； 注意：测定OD值所需菌液应在超净台中无菌取样，剩余菌液还需实验。 抗菌药物的制备：

抗生素母液配制：参照NCCLS标准上抗菌药物相应的R（抗药）值制备待测抗菌药物（母液浓度要远远大于R值，至少160倍），分装于无菌小管置-20℃备用（附件一.常用抗生素溶液的配制）。

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注意：无菌操作，抗菌药物的稀释液均需灭菌，溶解后

试验设计与分析

结课论文

论文名称：磁鼓电机正交优化试验 姓 名：

学 号：2009092567 院 系:机电学院09机制

2012/6/23

磁鼓电机正交优化试验

磁鼓电机是彩色录像机的磁鼓组件的关键部件之一，按质量要求其输出力矩应大于0.0210N·m。某生产厂过去这项指标的合格率较低，从而希望通过试验找出好的条件，以提高磁鼓电机的输力矩。

1. 试验原理、目的及条件

正交试验设计是研究多因素多水平的一种高效率、快速、经济的试验设计方法。它用正交表来安排试验 ，能以较少的试验次数、较短的试验周期，用极差分析方法、方差分析方法、回归分析方法等对试 验结果进行分析，迅速找出影响指标的主要因素，进而找到较优的工艺参数。正交试验包括制定正交因素表、安排试验、计算和结果分析等几个部分。

在安排试验时，一般应考虑如下几步：

(1) 明确试验目的：在本例中试验的目的是提高磁鼓电机的输出力矩。

(2) 明确试验指标：试验指标用来判断试验条件的好坏，在本例中直接用输出力矩作为考察指标，该指标越大表明试验条件越好。

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(3) 确定因子与水平：在试验前首先要分析影响指标的因子是什么，每个因子在试验中取哪些水平。