脂肪酸脱氢酶的辅酶

　花生学报　2006,35(1):1～7

　JournalofPeanutScience,Vol.35,No.1,2006

　文章编号:100224093(2006)0120001207

花生△12脂肪酸脱氢酶基因AhFAD2B在酿酒酵母中的表达及功能分析3

张洪涛1,2,单　雷2,全先庆1,2,3,毕玉平1,2,杨家森1,2,王秀丽2

(1.山东师范大学生命科学学院,山东济南250014,

山东济南250100;3.临沂师范学院,)

摘要:花生油中亚油酸(LAΔ9,12),脂肪酸脱氢酶(Δ12FAD)的功能,用RT-AhD2B的cDNA,连接到酵母表达载体p416中,并转,KFAD2B。气相色谱分析脂肪酸成分,结果表明该基因能在酵母K601中表达,并使菌株产生了两种新的脂肪酸即棕榈二烯酸(C16∶2Δ9,12)和亚油酸(C18∶2Δ9,12),含量分别占总脂肪酸的2.1%和9.2%,棕榈油酸(C16∶1Δ9)和油酸(C18∶1Δ9)含量与对照相比相应地下降,证明该基因编码的Δ12脂肪酸脱氢酶除能作用于C18∶1Δ9,还具有催化16碳的C16∶1Δ9底物在Δ12位脱氢生成C16∶2Δ9,12的功能,但在两种底物之间可能更偏爱C18∶1Δ9。

关键词:花生;亚

　花生学报　2006,35(1):1～7

　JournalofPeanutScience,Vol.35,No.1,2006

　文章编号:100224093(2006)0120001207

花生△12脂肪酸脱氢酶基因AhFAD2B在酿酒酵母中的表达及功能分析3

张洪涛1,2,单　雷2,全先庆1,2,3,毕玉平1,2,杨家森1,2,王秀丽2

(1.山东师范大学生命科学学院,山东济南250014,

山东济南250100;3.临沂师范学院,)

摘要:花生油中亚油酸(LAΔ9,12),脂肪酸脱氢酶(Δ12FAD)的功能,用RT-AhD2B的cDNA,连接到酵母表达载体p416中,并转,KFAD2B。气相色谱分析脂肪酸成分,结果表明该基因能在酵母K601中表达,并使菌株产生了两种新的脂肪酸即棕榈二烯酸(C16∶2Δ9,12)和亚油酸(C18∶2Δ9,12),含量分别占总脂肪酸的2.1%和9.2%,棕榈油酸(C16∶1Δ9)和油酸(C18∶1Δ9)含量与对照相比相应地下降,证明该基因编码的Δ12脂肪酸脱氢酶除能作用于C18∶1Δ9,还具有催化16碳的C16∶1Δ9底物在Δ12位脱氢生成C16∶2Δ9,12的功能,但在两种底物之间可能更偏爱C18∶1Δ9。

关键词:花生;亚

实验六 乳酸脱氢酶酶活力测定 及紫外吸收法测定蛋白质含量

目的要求

(1) 掌握LDH活性测定原理；

(2) 学习用比色法测定酶活性的方法。

实验原理

乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase简称LDH，EC.1.1.1.27, L－乳酸：NAD+氧化还原酶）广泛存在于生物细胞内，是糖代谢酵解途径的关键酶之一，可催化下列可逆反应。

LDH可溶于水或稀盐溶液。组织中LDH含量测定方法很多，其中紫外分光光度法更为

简单、快速。鉴于NADH, NAD+ 在340nm及260nm 处有各自的最大吸收峰，因此以NAD+为辅酶的各种脱氢酶类都可通过340nm光吸收值得改变，定量测定酶的含量。本实验测定LDH活力，基质液中含丙酮酸及NADH，在一定条件下，加入一定量酶液，观察NADH在反应过程中340 nm 处光吸收减少值，减少越多，则LDH活力越高。其活力单位定义是：在25℃，pH7.5条件下A340nm/min下降为1.0的酶量为1个单位。可定量测定每克湿重组织中LDH单位。定量测定蛋白质含量即可计算比活力（U/mg）。

利用上述原理，改变不同第五则可测定相应脱氢酶反应过程中A340nm的改变，定量测定酶活力，如苹果酸脱氢

EPA 是Eicosapentaenoic Acid 即二十碳五烯酸的英文缩写，是鱼油的主要成分。EPA属于Ω-3系列多不饱和脂肪酸，是人体自身不能合成但又不可缺少的重要营养素，因此称为人体必需脂肪酸。虽然亚麻酸在人体内可以转化为EPA，但此反应在人体中的速度很慢且转化量很少，远远不能满足人体对EPA的需要，因此必须从食物中直接补充。DHA 是Docosahexaenoic Acid 即二十二碳六烯酸的英文缩写。 EPA功效

EPA具有帮助降低胆固醇和甘油三酯的含量，促进体内饱和脂肪酸代谢。从而起到降低血液粘稠度，增进血液循环，提高组织供氧而消除疲劳。防止脂肪在血管壁的沉积，预防动脉粥样硬化的形成和发展、预防脑血栓、脑溢血、高血压等心血管疾病。 DHA功效

DHA对脑神经生长发育至关重要

脑部发育从胎儿期就开始了，胎儿期至三岁这段时间宝宝脑部发育最快，到3岁时，脑重就达成年人的80%，因此这段时间被称为“脑部发育黄金期”。胎儿期的脑部发育主要表现为脑细胞数量的快速增长，脑细胞每分钟增长高达约25万个;到出生时，脑细胞数量达到千亿个，和成人脑非常接近。出生以后，脑部发育进入另外一个阶段：脑细胞快速联接。直到6岁，就会长成发达的“大脑互联网”。要

中国脂肪酸生产和应用

1 脂肪酸的来源脂肪酸主要是从天然油脂、石蜡氧化或从松木造纸废液中回收妥尔油经精馏制得。石蜡氧化制脂肪酸可以得到天然油脂中不具有的单碳数脂肪。

随着世界各国对生态环境和环境保护的重视，对天然林的保护和禁伐，使得妥尔油资源产量、质量逐年下降。

目前从天然动植物油脂经水解、精馏生产的脂肪酸占脂肪酸总量的4/5以上，是世界脂肪酸的主要来源。

2 脂肪酸的分类一类是饱和脂肪酸，主要应用于乳液聚合和作为橡胶添加剂；在塑料工业中用作稳定剂、增塑剂和润滑剂；其酯类用于食品工业作乳化剂；其含氮衍生物是优良的表面活性剂，广泛应用于纺织、交通、日用化工和塑料等行业。这类脂肪酸主要包括椰油酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸等。

另一类是不饱和脂肪酸（包括妥尔油酸），主要用于制取矿石浮选剂、油田化学品和生产涂料用的二聚酸、三聚酸。如油酸、亚油酸、芥酸等。3 脂肪酸原料情况东南亚地区拥有丰富的棕榈油和椰子油。棕榈仁油和椰子油是提供生产C8-14脂肪酸的原料，它们主要用于生产表面活性剂。棕榈油是提供生产C16-18脂肪酸的原料，主要用于生产硬脂酸及盐和酯类、阳离子表面活性剂和塑料加工助剂等。

我国脂肪酸的生产目前以棕榈油、棉籽油、棉籽油脚和菜籽油为

?类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶?类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性

乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA的克隆与表达

周文婷1，崔羽，王晓燕2，张永红，李世荣，李景鹏*

（东北农业大学生命科学与生物技术中心，哈尔滨 1500301；

哈尔滨医科大学附属第四医院检验科，哈尔滨 1500012）

摘 要： 类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用，由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物，利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性测定。经检测重组ADH1，ADH2和ADH3的酶活力分别为1.8± 0.3U/mg, 0.9±0.2U/mg和1.4±0.2U/mg。

关键词：乙醇脱氢酶（ADH）；基因克隆，原核表达；酶活力检测1

酒是重要的

?类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用,由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物,利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶?类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性

乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA的克隆与表达

周文婷1，崔羽，王晓燕2，张永红，李世荣，李景鹏*

（东北农业大学生命科学与生物技术中心，哈尔滨 1500301；

哈尔滨医科大学附属第四医院检验科，哈尔滨 1500012）

摘 要： 类乙醇脱氢酶(ADH)在乙醇的肝代谢中发挥重要作用，由ADH1、ADH2和ADH3组成。根据序列数据设计一对引物，利用RT-PCR同时克隆乙醇脱氢酶 类基因全长cDNA。测序后的cDNA被克隆在表达载体pTYB11上并在大肠杆菌中稳定表达。纯化获得的酶通过检测其在340nm处吸光值的变化进行酶活性测定。经检测重组ADH1，ADH2和ADH3的酶活力分别为1.8± 0.3U/mg, 0.9±0.2U/mg和1.4±0.2U/mg。

关键词：乙醇脱氢酶（ADH）；基因克隆，原核表达；酶活力检测1

酒是重要的

反式脂肪酸 人类健康

食品科技

2010年第35卷第4

期

FOODSCIENCEANDTECHNOLOGY

食品开发

食品中反式脂肪酸的研究进展

章萍萍，赵培城*，张建友

(浙江工业大学生物与环境工程学院，杭州310014)

摘要：就反式脂肪酸的性质、来源、危害、检测方法、控制措施及各国对反式脂肪酸的标示规

定6个方面进行了综述，同时强调了专门针对乳制品中反式脂肪酸的检测与消解技术研究的迫切性。

关键词：反式脂肪酸；来源；危害；检测方法；控制措施；乳制品

中图分类号：TS201.2

文献标志码：A

文章编号：1005-9989(2010)04-0095-05

Researchprogressoftransfattyacidsinfoods

ZHANGPing-ping,ZHAOPei-cheng*,ZHANGJian-you

(CollegeofBiologicalandEnvironmentalEngineering,ZhejiangUniversityofTechnology,

Hangzhou310014)

Abstract:ThispapergivesanoverviewofTFAonitsproperties,sources,hazards,detectionmeth

第25卷　第5期2009年3月

甘肃科技

GansuScienceandTechnology

Vol.25　No.5Mar.　2009

锁阳脂肪酸组成成分的GC-MS分析

黄霄檬,赵保堂,王俊龙,王小芳,张　继,许　乐,王　邦

1

2

2

2

2

2

2

(1.浙江大学生命科学学院生物科学系,浙江杭州310058;2.西北师范大学生命科学学院,甘肃兰州730070)

摘　要:采用超临界CO2萃取法提取锁阳(CynomoriumsongaricumRupr)中的脂肪酸,运用GC-MS进行分析,用气相色谱面积归一化法测定了各成分的相对百分含量,经毛细管色谱分离出12个峰,并鉴定出各峰所对应的化合物。其中多不饱和脂肪酸(PUFA)与饱和脂肪酸(SFA)相对含量比值显示,锁阳的油脂具有降血脂的功能不明显,但在所含脂肪酸中,人体必需亚油酸、亚麻酸含量较高。探讨了锁阳脂肪酸成分的可利用性。关键词:锁阳;脂肪酸;气质分析;超临界CO2中图分类号:S645.2

　　锁阳(CynomoriumsongaricumRupr),又名铁

棒槌、锈铁棒、地毛球、乌兰高腰(蒙语),是锁阳科(Cynomoriaceae),寄生于蒺藜科(a)植物根部,[,把,又名“不老药”、“金不换”、“沙漠人参”等。明

ASTM D7797?18

标准试验方法

使用傅里叶变换红外光谱学-快速筛选法的流量分析测定航空涡轮燃

料脂肪酸甲酯含量

本标准以固定名称D7797发行。名称后紧跟的数字表示最初采用的年份，如果是修订版本，则表示上次修订的年份。括号中的数字表示上次批准的年份。上标（ε）表示自上次修订或重新批准以来的编辑更改。

1.范围

1.1此测试方法指定了一种快速筛选方法，该方法使用傅里叶变换红外（FA-FTIR）光谱和偏最小二乘（PLS-1）处理进行流动分析来测定航空涡轮机燃料（A VTUR）中脂肪酸甲酯（FAME）的含量，范围从10 mg/kg到150 mg/kg。

注1：属于该测试方法范围的规范是：规范D1655和国防标准91-91。

注2：按照标准D6751和EN 14214的规定，该测试方法可检测所有FAME组分，并具有约1749 cm-1的红外吸收峰和C8至C22分子。该方法的准确性基于分子量C16至C18 FAME 组分；其他分子量不同的FAME组分的存在可能会影响准确性。

注3：添加剂，例如抗静电剂，抗氧化剂和腐蚀抑制剂，是通过FTIR光谱仪用FAME 测量的。但是，这些添加剂的作用已通过流动分析过程消除。

注4：可以测量的FAME浓度范围为150 mg/kg