蛋白质沉淀反应在生活中的应用

蛋白质的沉淀反应

一、目的和要求

1、加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识 2、掌握几种沉淀蛋白质的方法 3、了解蛋白质变性与沉淀的关系 二、沉淀反应 （一）原理

在水溶液中，蛋白质分子的表面上由于有水化层和同性电荷的作用，所以成为稳定的胶体颗粒。但这种稳定的状态是有条件的。在某些理化因素的作用下，蛋白质分子表面带电性质发生变化、脱水甚至变性，则会以固态形式从溶液中析出，这个过程就称为蛋白质的沉淀反应。蛋白质的沉淀反应可分为以下两种类型：

1、可逆沉淀反应

沉淀反应发生后，蛋白质分子内部结构并没有发生大的或者显著变化。在沉淀因素去除后，又可恢复其亲水性，这种沉淀反应就是可逆沉淀反应，也叫做不变性沉淀反应。属于这类沉淀反应的有盐析作用、等电点沉淀以及在低温下短时间的有机溶剂沉淀法等。

2、不可逆沉淀反应

蛋白质在沉淀的同时，其空间结构发生大的改变，许多副键发生断裂，即使除去沉淀因素，蛋白质也不会恢复其亲水性，并丧失生物活性，这种沉淀反应就是不可逆沉淀反应。重金属盐、生物碱试剂、强酸、强碱、加热、强烈震荡、有机溶剂等都能使蛋白质发生不可逆沉淀反应。

（二）盐析 1、材料与试剂

（1）10%的卵清蛋白溶液（要求新鲜配制）、浓蛋白溶液（2）饱和硫酸铵

人教新课标版高一化学教学课件：糖类、油脂、蛋白质的在生产、生活中的应用制作：江庆平

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第三章 有机化合物第四节《基本营养物质》二、糖类、油脂、蛋白质在生产、 生活中的应用

宁晋职教中心

江庆平

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二、糖类、油脂、蛋白质在生产、生 活中的应用营养物质 葡萄糖 蛋白质 油脂单糖

能量 17.2 kJ/g 18 kJ/g 39.3 kJ/g(葡萄糖和果糖)

分类:

二糖 (蔗糖和麦芽糖) 多糖 (淀粉和纤维素)

糖类物质是 绿色植物光合 作用的产物

人教新课标版高一化学教学课件：糖类、油脂、蛋白质的在生产、生活中的应用制作：江庆平

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(一)糖类的存在及应用:1.单糖：葡萄糖和果糖:存在于水果、蔬菜、血液中 应用：工业原料、食品加工、医疗输液 2.双糖：蔗糖：存在于甘蔗、甜菜 应用：工业原料、食品加工 3.多糖： (1)淀粉：存在于植物的种子和块茎中 应用：做食物、生产葡萄糖和酒精 (2)纤维素：存在于植物的茎、叶、果皮 应用：胃肠蠕

实验7 蛋白质的等 电点测定和沉淀反 应

I. 蛋白质等电点测定 一、目的： 目的： 了解蛋白质的两性解离性质 学习测定蛋白质等电点的一种方法

二、原理： 原理：蛋白质是两性电解质，在溶液中存在如下平衡： 蛋白质是两性电解质，在溶液中存在如下平衡：+ OH+ H+ NH3+ COO+ OH+ H+ NH2 COO-

Pr

NH3

+

Pr

Pr

COOH

pH< pI净电荷为正

pH = pI净电荷=0 净电荷

pH > pI净电荷为负

蛋白质等电点：当蛋白质颗粒上正负电荷 蛋白质等电点： 数目相等时溶液的pH值 数目相等时溶液的 值。 处于等电点时的蛋白质在电场中不发生移 动；处于等电点时的蛋白质溶解度最低。 处于等电点时的蛋白质溶解度最低。 用醋酸与醋酸钠(醋酸钠混合在酪蛋白溶 用醋酸与醋酸钠( 液中)配制成各种不同 值的缓冲液 值的缓冲液。 液中)配制成各种不同pH值的缓冲液。向缓 冲液溶液中加入酪蛋白后， 冲液溶液中加入酪蛋白后，沉淀出现最多的缓 冲液的pH值即为酪蛋白的等电点。 冲液的 值即为酪蛋白的等电点。 值即为酪蛋白的等电点

三、器材1.水浴锅 2.温度计 3.200毫升锥型瓶 4.100毫升容量瓶 4.100 5.吸管 6.试管 7.试管

概率在生活中的应用

1409025 金哲明 机械一班

概率论在一定的社会条件下，通过人类的社会实践和生产活动发展起来，被广泛应用于各个领域，在国民经济的生产和生活中起着重要的作用。正如英国逻辑学家和经济学家杰文斯（Jevons，1835-1882）所说：概率论是“生活真正的领路人，如果没有对概率的某种估计，我们就寸步难行，无所作为”。在日常生活中，同样不难发现，周围的许多事物都和概率有着千丝万缕的联系，下面将说明概率统计在生活中的应用。 一、数学期望在求解最大利润问题中的应用 如何获取最大利润不但成为商界追求的目标，同时也为越来越多的人所关注，许多数学模型也从概率角度利用期望求解最大利润问题，为问题的解决提供新的思路。下面就是一道应用期望探讨利润的问题。

例1、五一期间，某鲜花店某种鲜花的进货价为每束2.5元，销售价为每束5元。若在五一期间内没有售完，则在五一期间营业结束后以每束1.5元的价格处理。据前5年的有关资料统计，五一期间这种鲜花的需求量为20束、30束、40束和50束的概率分别为0.20、0.35、0.30和0.15。问该鲜花店今年春节前应进该鲜花为多少束为宜？

分析售出一束鲜花能获得利润5-2.5=2.5元

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大数据在生活中的应用

作者：霍素墨

来源：《电子技术与软件工程》2017年第22期

随着我国信息化时代的到来，统计管理能力得到了明显的提升，计算机统计的效能直接影响着我们的生活。计算机大数据统计在人们生产生活中的应用也越来越普遍，使我们的工作更加高效。由此，本文主要对计算机大数据使用的领域进行分析，并提出一些注意和改进的措施，便于大数据工作的发展和提高。 【关键词】大数据 生产生活 提高

大数据又称巨量资料，具有大量、高速、多样、价值四个特点，是对所有数据进行分析处理，现在是信息化时代，网上购物、无纸办公、手机支付在带来便利的同时也在改变我们的生活方式，现在就大数据在生活中的应用浅谈几点看法： 1 大数据统计分析切实有效，在一定程度上改变我们的生活

（1）在学校，在学生入校后，及时建立学生档案信息，并建立数据库，每次考试（包括月考、期中、期末考试），将每名考生的试卷答案录入系统，将差错重点标注，生成错题记录试卷，将学生容易出错或者知识掌握比较薄弱的部分，由辅导老师进行专项讲解，了解学生课业的短板，有针对性

蛋白质纯化方法

蛋白质浓缩有多种方法，有盐析，超滤，离子交换，有机溶剂沉淀等方法。 有机溶剂沉淀法：有机溶剂能降低溶液的电解常数，从而增加蛋白质分子上不同电荷的引力，导致溶解度的降低；另外，有机溶剂与水的作用，能破坏蛋白质的水化膜，故蛋白质在一定浓度的有机溶剂中的溶解度差异而分离的方法，称“有机溶剂分段沉淀法”，它常用于蛋白质或酶的提纯。使用的有机溶剂多为乙醇和丙酮。高浓度有机溶剂易引起蛋白质变性失活，操作必须在低温下进行，并在加入有机溶剂时注意搅拌均匀以避免局部浓度过大。由此法析出的沉淀一般比盐析容易过滤或离心沉降，分离后的蛋白质沉淀，应立即用水或缓冲液溶解，以降低有机溶剂浓度。操作时的pH值大多数控制在待沉淀蛋白质的等电点附近，有机溶剂在中性盐存在时能增加蛋白质的溶解度，减少变性，提高分离的效果，在有机溶剂中添加中性盐的浓度为0.05mol/L左右，中性盐过多不仅耗费有机溶剂，可能导致沉淀不好。沉淀的条件一经确定，就必须严格控制，才能得到可重复的结果。医学教育`网搜集整理有机溶剂浓度通常以有机溶剂和水容积比或用百分浓度表示。有机溶剂沉淀蛋白质分辨力比盐析法好，溶剂易除去；缺点是易使酶和具有活性的蛋白质变性。故操作时要求条件比盐析严格。对

化学在日常生活中的应用

内容摘要： 日常生活中，化学给人类带来许多方便，我们每天都要穿的衣服，吃的食物，住的房子，乘坐的交通工具，日常生活中每处都应用着化学，化学在每个方面都有很大用处。在一些重大的科学领域里，化学的作用也不小，火箭发射所需燃料，就是利用了氢氧燃烧得水的原理。化学给人类生活带来了变 化，化学无时不在人们生活的各种活动中。我们就化学对衣食住行用等几个方面的作用来研究。

关键词： 化学与生活 衣 食 住 行 用

随着生活水平的提高，人们越来越追求健康、高品位的生活，化学与生活的联系也日趋密切。只要你留心观察、用心思考，就会发现生活中的化学知识到处可见。化学是一门自然科学，有着丰富的实验内容。化学本应是一门生动的、贴近生活的、探求自然奥秘的一门学科。生活中充满着化学的踪影，化学就在我们身边，用化学知识可以解决生活中的实际问题。化学可以服务于社会，服务于其它学科，服务于人类自身。设计实验，改进实验，探究和创新。培养出有科学头脑，有科学方法，有化学理念，有辩证唯物主义世界观的新人。

一．化学在衣服中有应用

在这一方面，化学可谓给生活增添温暖。尼龙，分子中含有酰铵键的树脂，自然界中并不存在，需要靠化学方法得到

沉淀蛋白质的常用方法（TCA、乙醇、丙酮沉淀蛋白操作步骤）

TCA-DOC

For precipitation of very low protein concentration

1) To one volume of protein solution, add 1/100 vol. of 2% DOC (Na deoxycholate, detergent).

2) Vortex and let sit for 30min at 4oC.

3) Add 1/10 of Trichloroacetic acid (TCA) 100% vortex and let sit ON at 4oC

(preparation of 100% TCA: 454ml H2O/kg TCA. Maintain in dark bottleat 4oC.Be careful, use gloves!!!).

4) Spin 15min 4oC in microfuge at maximum speed (15000g). Carefully discharge supernatant and retain the pellet: dry tube

Ⅱ实验内容

实验一 蛋白质的沉淀与凝固

蛋白质溶液是一稳定的亲水性溶胶液，其稳定的因素有二：一是蛋白质胶粒上的电荷使之相互排斥，不易凝集成团；二是胶粒表面的水化膜，它使胶粒与水融洽相依，又在胶粒之间起了隔离作用。如果上述两种稳定蛋白质溶液的因素被破坏，蛋白质将于溶液中沉淀析出。

促使蛋白质沉淀的因素很多，大致可分为两类：

第一类是可逆的沉淀反应。这时蛋白质的空间构象未受到很大改变，除去沉淀因素后，可以重新溶解，例如盐析和低温乙醇沉淀蛋白。

第二类是不可逆的沉淀反应，重金属盐类或生物碱试剂沉淀蛋白后，由于蛋白质结构发生重大改变，所以不再溶于水中。不可逆的蛋白质沉淀多表示蛋白质已经变性。变性的蛋白质在等电点附近加热时，蛋白质分子间相互盘绕而变成坚实的凝块。

一、 蛋白质的盐析

[原理]

高浓度的盐离子可与蛋白质胶粒争夺水化膜，同时盐又是强电解质，可抑制蛋白质的解离。因而用高浓度的中性盐，使蛋白质带电量减少，水化膜破坏而从溶液中沉淀出来。盐析沉淀蛋白一般不引起蛋白变性，故常用于分离各种天然蛋白质。

由于蛋白质的组成及性质不同，所以盐析时所需中性盐的浓度也不相同。例如半饱和的硫酸铵沉出球蛋白，饱和的硫酸铵则沉出清蛋白。

欧姆定律在生活中的应用

欧姆定律是电学的重要定律，是组成电学内容的主干知识。欧姆定律不仅在理论上非常重要，在实际应用中也非常广泛，将欧姆定律运用于人们的工作生活，去分析生活中简单的电学现象，是实现理论联系实际的重要方式。

一、电子秤

例1．如图1所示是目前市场上广泛使用电子秤的简单电路图，秤盘和滑动变阻器通过滑片P连在一起，物体质量大小可以通过电流表示数大小显示出来。当闭合开关时，下列说法正确的是（ ）

A．若被测物体质量变大，则电流表示数变大

B．若被测物体质量变小，则电流表示数变大

C．若被测物体质量变大，电路的总电阻变小

D．该电路属于并联电路

解析：分析电路图可知，定值电阻R和变阻器串联，当被测物体质量变大时，弹簧在压力的作用下

紧缩，带动滑片P向下滑动，变阻器连入电路中的电阻长度变长，使电路中的电阻变大。由欧姆定律可知，电路中的电流变小，即电流表的示数变小。故选B。

二、称重计

例2．某高速公路收费站对过往的超载货车实施计重收费，小明同学结合所学的物理知识设计了如图2所示的称重表原理图，对于小明同学的设计你认为（ ）

A．此设计可行，称重表由电流表改装

B．此设计可行，称重表由电压表改